وصف
بوليميراز الحمض النووي Tth هو بوليميراز الحمض النووي المقاوم للحرارة الذي تم اكتشافه من البكتيريا المحبة للحرارة ثيرموس ثيرموفيلوس HB8في وجود Mg²⁺، يُظهر هذا الإنزيم نشاط بوليميراز الحمض النووي 5'-3' ونشاط إكسونوكلياز 5'-3'، ولكنه يفتقر إلى نشاط إكسونوكلياز 3'-5'، مما يجعله قابلاً للتطبيق على نطاق واسع في تفاعلات تضخيم تفاعل البوليميراز المتسلسل. في وجود Mn²⁺، يُظهر الإنزيم نشاطًا قويًا للنسخ العكسي عند درجات حرارة تتراوح بين 55 و70 درجة مئوية، مما يجعله مناسبًا لتفاعلات تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي أحادي الخطوة.
مواصفة
تعريف الوحدة: يتم تعريف وحدة واحدة (U) من النشاط على أنها كمية الإنزيم التي تدمج 10 نانومول من إجمالي النيوكليوتيدات في منتج غير قابل للذوبان في الأحماض في 30 دقيقة عند 74 درجة مئوية، باستخدام الحمض النووي للحيوانات المنوية المنشط للسلمون كقالب/بادئ.
عنصر
| لا. | اسم | مقاس | |
| 14607ES72 (250 وحدة) | 14607ES80 (1250 و) | ||
| 14607-أ | بوليميراز الحمض النووي Tth (5 وحدة/ميكرولتر) | 50 ميكرولتر | 250 ميكرولتر |
| 14607-ب | تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي 5×Tth المخزن المؤقت | 1 مل | 4×1.25 مل |
| 14607-ج | 10×Tth PCR المخزن المؤقت (مع Mg2+) | 500 ميكرولتر | 2×1.25 مل |
| 14607-د | 50 ملي مولار Mg(OAc)2 | 250 ميكرولتر | 1.25 مل |
| 14607-هـ | خليط dNTP (10 ملي مولار لكل منهما) | 150 ميكرولتر | 750 ميكرولتر |
شحن والتخزين
شحنمع الثلج الجاف. تخزين في -20 درجة مئوية، مع مدة صلاحية تصل إلى سنتين.
احتياطات
١) إذا ظهرت كمية صغيرة من الرواسب في المحلول المُنظِّم بعد الذوبان، فهذه ظاهرة طبيعية. يُرجى قلب المحلول وخلطه جيدًا قبل الاستخدام.
2) من أجل سلامتك وصحتك، ارتدِ معطفًا مختبريًا وقفازات يمكن التخلص منها أثناء التشغيل.
3) هذا المنتج مخصص للاستخدام البحثي فقط!
تعليمات
إجراء تفاعل PCR الموصى به:
1.إعداد نظام التفاعل
| اسم | مقدار (ميكرولتر) |
| 10×Tth PCR المخزن المؤقت (مع Mg2+) | 5 |
| بوليميراز الحمض النووي Tth (5 وحدة/ميكرولتر) | 0.5 |
| خليط dNTP (10 ملي مولار لكل منهما) | 1 |
| المنبع التمهيدي 10 ميكرومتر | 2 |
| المصب التمهيدي 10 ميكرومتر | 2 |
| قالب الحمض النووي | 50 ص- 1 ميكروغرام |
| دي دي اتش2ا | ل 50 |
[ملاحظة]: يمكن تعديل كميات بوليميراز الحمض النووي Tth، والبادئات السابقة واللاحقة، وخليط dNTP وفقًا للاحتياجات التجريبية المحددة.
2. إعداد الدورة
| خطوات | درجة حرارة(درجة مئوية) | وقت | الدورات |
| ما قبل التحلل | 94 | 30 ثانية - 5 دقائق | 1 |
| التحلل | 94 | 30 ثانية |
35
|
| التلدين | 50-70 | 30 ثانية | |
| امتداد | 72 | 60 ثانية/كيلو بايت | |
| التمديد النهائي | 72 | 10 دقائق | 1 |
[ملاحظة]: يمكن تعديل ظروف التفاعل وفقًا للمتطلبات التجريبية المحددة.
إجراء تفاعل RT-PCR الموصى به:
1. تحضير نظام التفاعل
| اسم | مقدار (ميكرولتر) |
| تفاعل البوليميراز المتسلسل العكسي 5×Tth المخزن المؤقت | 10 |
| بوليميراز الحمض النووي Tth (5 وحدة/ميكرولتر) | 1.5 |
| 50 ملي مولار Mg(OAc)2 | 2.5 |
| خليط dNTP (10 ملي مولار لكل منهما) | 1.5 |
| المنبع التمهيدي 10 ميكرومتر | 2 |
| المصب التمهيدي 10 ميكرومتر | 2 |
| نموذج الحمض النووي الريبوزي | 50 ص- 1 ميكروغرام |
| ddH2O | ل 50 |
[ملاحظة]: يمكن تعديل كميات بوليميراز الحمض النووي Tth، والبادئات السابقة واللاحقة، وخليط dNTP وفقًا للاحتياجات التجريبية المحددة.
2.إعداد الدورة
| خطوات | درجة حرارة (درجة مئوية) | وقت | الدورات |
| النسخ العكسي | 55-70 | 30 دقيقة | 1 |
| قبل-التحلل | 94 | 30 ثانية - 5 دقائق | 1 |
| التحلل | 94 | 30 ثانية |
35
|
| التلدين | 50-70 | 30 ثانية | |
| امتداد | 72 | 60 ثانية/كيلو بايت | |
| التمديد النهائي | 72 | 10 دقائق | 1 |
[ملاحظة]: يمكن تعديل ظروف التفاعل وفقًا للمتطلبات التجريبية المحددة.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.