وصف
ArCas12a، مشتق من نظام CRISPR أغاثوباكتر ريكتاليس البكتيريا والمعروفة أيضًا باسم Cpf1، هي بروتين أحادي يتكون من 1263 حمضًا أمينيًا. بصفته عضوًا من الفئة الثانية (النوع الخامس) في نظام CRISPR/Cas، يعمل ArCas12a فقط من خلال بروتين مؤثر واحد ويظهر اختلافات كبيرة عن Cas9، مثل استهداف العناصر الغنية بـ T، وعدم الحاجة إلى تنشيط crRNA عبر الحمض النووي، وإنتاج نهايات لزجة عند كسر سلاسل الحمض النووي المزدوجة، والمشاركة في معالجة الحمض النووي الريبي، وامتلاك نشاط نوكلياز الحمض النووي.
يفتقر ArCas12a إلى مجال HNH ويمكنه الاستفادة بشكل مستقل من مجال RuvC للتعرف على منطقة PAM الغنية بالثايمين (T) في الطرف 5' من الحمض النووي المستهدف تحت توجيه CRISPR RNA (crRNA)، مما يؤدي إلى بدء انقسام الحمض النووي المستهدف. وقد تم استخدامه بنجاح لتحرير الجينوم في العديد من الثدييات والنباتات. بالإضافة إلى ذلك، يُظهر ArCas12a نشاط انقسام عبر، قادر على قطع الحمض النووي أحادي السلسلة غير المستهدف (ssDNA) بشكل عشوائي في نظام التفاعل.
بالمقارنة مع LbCas12a/AsCas12a الأخرى، يُظهر ArCas12a قدرة أعلى على التكيف مع درجات الحرارة (25-55 درجة فهرنهايت).اوهج)، مما يجعلها مناسبة لتطبيقات تحرير الجينوم والكشف عن الأحماض النووية.
سمات
نطاق واسع لدرجة حرارة التفاعل:يظهر نشاط الانقسام ضمن نطاق درجة الحرارة من 25 إلى 55 درجة مئويةاوهج
بقايا نوكلياز منخفضة:لا يوجد بقايا إكسونوكلياز أو نيكاز أو RNase
نشاط الانقسام السيزي:انقسام عالي الفعالية للحمض النووي مزدوج السلسلة في المختبر
نشاط الانقسام عبر الخلية:نشاط انقسام عالي، مناسب للكشف عن الأحماض النووية
التطبيقات
تعديل الجينات باستخدام تقنية CRISPR/Cas
التشخيص والكشف بناءً على نظام CRISPR/Cas
تطبيقات الكشف الأخرى المدمجة مع تقنيات تضخيم الأحماض النووية المتساوية الحرارة (RPA وLAMP)، وما إلى ذلك
تحديد
| مصدر | جين Cpf1 من أغاثوباكتر ريكتاليس يتم التعبير عنها من خلال التعبير المؤتلف في الإشريكية القولونية |
| الوزن الجزيئي | 149 كيلو دالتون |
| تسلسل PAM | TTTN أو TTTV |
| ظروف التفاعل | 50 مليمولار كلوريد الصوديوم، 10 مليمولار تريس-حمض الهيدروكلوريك، 10 مليمولار كلوريد المغنيسيوم2، الرقم الهيدروجيني 7.9 @25اوهج |
| تركيز | 10 ميكرومتر |
| نقاء | >95% (صفحة SDS) |
| شروط التعطيل | 85اوهج, 5-10 دقيقة |
عناصر
| عناصر لا. | اسم | 14702ES65 | 14702ES80 |
| 14702-أ | نوكلياز أركاس 12أ (10 ميكرومترم) | 100 ميكرولتر | |
| 14702-ب | 10×مُنظِّم تفاعل ArCas12a | 1 مل | 1 مل |
الشحن والتخزين
يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25 ~ -15اوهج لمدة سنتين.
الأرقام
شكل 1. اختبار نشاط انقسام ArCas12a cis: M: علامة؛ C: قالب DNA مزدوج السلسلة (dsDNA)
ملحوظة: تحت إشراف crRNA، يمكنه تقسيم dsDNA (600 bp) بكفاءة لإنتاج قطعتين (200 bp + 400 bp).
شكل 2. نتائج اختبار نشاط الانقسام عبر الجين ArCas12a
ملحوظة: باستخدام dsDNA كهدف، تمت إضافة ArCas12a و crRNA ومسبار مراسل ssDNA (يحتوي على مجموعة مراسلة فلورية) للانقسام في المختبر. بمجرد أن يشكل ArCas12a مركبًا مع crRNA والحمض النووي المستهدف، فإنه ينشط نشاط الانقسام عبر الحمض النووي، ويقطع مسبار مراسل ssDNA، وبالتالي ينبعث منه الفلورسنت.
وثائق:
ورقة بيانات السلامة
14702_بيانات سلامة المواد_الإصدار EN20241205.بي دي اف
الدليل
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.