وصف
نوكلياز AapCas12b (المعروف أيضًا باسم C2c1) هو نوكلياز DNA يتم توسطه بواسطة tracrRNA:crRNA (أو sgRNA)، المشتق من البكتيريا المحبة للحرارة أليسيكلوباسيلوس أسيدوفيلوسفي وجود تسلسل PAM (TTN) عند الحمض النووي ثنائي السلسلة المستهدف (dsDNA)، فإنه يشق الحمض النووي ثنائي السلسلة المستهدف على وجه التحديد، مما يتسبب في حدوث كسر في السلسلة المزدوجة وتوليد نهايات لزجة. يمكن لـ AapCas12b شق أهداف الحمض النووي أحادي السلسلة على وجه التحديد بشكل مستقل عن تسلسل PAM. يمكن لكل من أهداف الحمض النووي ثنائي السلسلة و أحادي السلسلة تنشيط نشاط الانقسام عبر AapCas12b. عندما يشكل إنزيم AapCas12b مركبًا ثلاثيًا مع sgRNA و DNA المستهدف، يتم تنشيطه لنشاط الانقسام عبر ssDNA غير المحدد، مما يقطع أي تسلسل عشوائي من ssDNA في النظام. درجة حرارة تفاعل الانقسام المثلى لـ AapCas12b هي 60اوهج، مما يجعله أكثر مقاومة للحرارة من AacCas12b، وأكثر ملاءمة للاستخدام مع LAMP لتطوير أنظمة التضخيم المتساوي الحرارة/كشف CRISPR-Cas.
سمات
نطاق واسع لدرجة حرارة التفاعل:يظهر نشاط انقسام ضمن نطاق درجة حرارة 37~65اوهج
بقايا نوكلياز منخفضة:لا يوجد بقايا إكسونوكلياز أو نيكاز أو RNase
نشاط الانقسام السيزي:انقسام عالي الفعالية للحمض النووي مزدوج السلسلة في المختبر
نشاط الانقسام عبر الخلية:نشاط انقسام عالي، مناسب للكشف عن الأحماض النووية
التطبيقات
تعديل الجينات باستخدام تقنية CRISPR/Cas
التشخيص والكشف بناءً على نظام CRISPR/Cas
تطبيقات الكشف الأخرى المدمجة مع تقنيات تضخيم الأحماض النووية المتساوية الحرارة (RPA وLAMP)، وما إلى ذلك
تحديد
| الوزن الجزيئي | 130 كيلو دالتون |
| تركيز | 10 ميكرومتر |
| نقاء | >95% (صفحة SDS) |
| تعريف الوحدة | كمية إنزيم Cas12b المطلوبة لتقسيم 1 بيكومول من مسبار ssDNA خلال دقيقة واحدة عند 60 درجة مئويةاوهج في حجم تفاعل إجمالي قدره 20 ميكرومترل، تحتوي على 1×عازل التفاعل، يتم تعريفه على أنه 1 وحدة |
عناصر
| عناصر لا. | اسم | 14808ES65 | 14808ES80 |
| 14808-أ | نوكلياز AapCas12b (10 ميكرومترم) | 100 ميكرولتر | |
| 14808-ب | 10×عازل التفاعل | 1 مل | 1 مل |
سفينةping والتخزين
يجب تخزين هذا المنتج في درجة حرارة -25 ~ -15اوهج لمدة سنتين.
الأرقام
شكل 1. التحقق من نشاط الانقسام السيس لنوكلياز AapCas12b
ملحوظة: في 20 ميكرومترنظام تفاعل L يحتوي على هدف dsDNA مع تسلسل PAM وsgRNA وCas12b و1×محلول التفاعل، تم حضن الخليط عند 60 درجةاوهج لمدة 30 دقيقة ثم يتم إيقاف تشغيله عند 85اوهج لمدة 5 دقائق. أظهرت نتائج التحليل الكهربائي للهلام الآغار أن ثلاث دفعات من نوكلياز AapCas12b كانت جميعها قادرة على تقسيم الحمض النووي ثنائي التكافؤ بفعالية، مع كفاءة تقسيم مماثلة لتلك الخاصة بالعلامة التجارية المستوردة T*.
شكل 2. نتائج اختبار نشاط انقسام نوكلياز AapCas12b
ملحوظة: في 20 ميكرومترنظام تفاعل L يحتوي على هدف dsDNA مع تسلسل PAM، وsgRNA، وCas12b، ومسبار فلوري ssDNA، و1×محلول التفاعل، تم حضن الخليط عند 60 درجةاوهج لمدة ساعة واحدة، وتم جمع إشارة الفلورسنت كل 30 ثانية. أظهرت النتائج أنه في وجود Target DNA وsgRNA وCas12b معًا، يمكن شق مسبار الفلورسنت Report ssDNA، وبالتالي إطلاق إشارة الفلورسنت.
وثائق:
ورقة بيانات السلامة
14808_بيانات سلامة المواد_الإصدار EN20241209.بي دي اف
الدليل
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.