إن فسفرة وإزالة فسفرة البروتينات في الخلايا هي مفاتيح تنظيمية للعديد من الأنشطة البيولوجية المهمة مثل نقل الإشارة، وتكاثر الخلايا، وتمايز الخلايا، وموت الخلايا المبرمج. لذلك، فإن التحكم في عمل الفوسفاتاز له أهمية فسيولوجية كبيرة في أبحاث البروتين. تمتلئ الأنسجة والخلايا بعدد كبير من البروإنزيم، والتي يتم تنشيطها بالكامل بعد التحلل وتبدأ في هضم البروتينات المحيطة. لذلك، فإن حماية حالة فسفرة البروتينات أمر بالغ الأهمية في دراسة مسارات فسفرة البروتينات ونقل الإشارة.

هذا المنتج عبارة عن مزيج خاص من مثبطات الفوسفاتيز المتعددة، والتي تمنع بشكل عام الفوسفاتيز الحمضية/القلوية غير النوعية بالإضافة إلى فوسفاتيز البروتين التيروزيني النوعية، وفوسفاتيز البروتين سيرين/ثريونين (PPA، PP2A)، إلخ.

يأتي المنتج على شكل أنابيب A و B، والمحاليل قادرة على استهداف أنواع مختلفة من الفوسفاتاز لممارسة تأثيرات مثبطة تآزرية.

يحتوي الأنبوب أ على كانثاريدين وبروموتيتراميزول وميكروسيستين-إل آر، متوفر كمحلول جاهز للاستخدام في ثنائي ميثيل سلفوكسيد، مما يثبط إنزيم إل-إيزوزيم للفوسفاتاز القلوي وفوسفاتاز البروتين سيرين/ثريونين، مثل فوسفاتاز البروتين 1 و2أ (PP1 وPP2A). يحتوي الأنبوب ب على أورثوفاناديت الصوديوم وموليبدات الصوديوم وطرطرات الصوديوم وإيميدازول وفلوريد الصوديوم، متوفر كمحلول جاهز للاستخدام في ddH2O، مما يثبط فوسفاتاز البروتين التيروزين والفوسفاتاز الحمضية والفوسفاتاز القلوية.

يمكن استخدام هذا المنتج في اختبارات WB وCo-IP وPull-down وIF وIHC وأبحاث الكيناز والعديد من التحليلات الأخرى.

عناصر

الشحن والتخزين

يتم شحن المنتج مع كيس ثلج ويمكن تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين -15 و-25 درجة مئويةدرجة مئوية لمدة سنة واحدة، أو يتم تخزينها في درجة حرارة تتراوح من 2 إلى 8 درجات.درجة مئوية لمدة شهرين.

تعليمات

قبل الاستخدام، أخرج المنتج من الثلاجة واتركه حتى يصل إلى درجة حرارة الغرفة. أضف محلول A ومحلول B إلى العينة بنسبة 1:100 (حجم/حجم)، واخلط جيدًا بعد كل إضافة.

1. المذيب للأنبوب أ هو DMSO، وللأنبوب ب هو ddH2O. يذوب DMSO بشكل أبطأ، لذا يستغرق وقتًا أطول ليذوب تمامًا محلول أ مقارنة بمحلول ب. في درجات الحرارة المنخفضة، يمكن وضع محلول أ في وعاء به 25 درجة مئوية.درجة مئوية حمام مائي للحل.

2.قد يؤدي خلط محلولي A وB قبل الاستخدام إلى تكوين رواسب بسهولة، لذا يجب تجنب هذه الطريقة. يوصى بإضافة كميات مناسبة من محلول A ومحلول B بشكل منفصل إلى العينة.

3. يمكن لهذا المنتج أن يتحمل 1% SDS، Triton، NP-40.

ملحوظات

1. يوصى بتقسيم محلول المخزون 100 × إلى أجزاء وتجميده لتجنب دورات التجميد والذوبان المتكررة. يجب تحضير المحاليل العاملة طازجة.

2. لا يحتوي هذا المنتج على مثبطات البروتيناز. يمكن إضافة مثبطات البروتيناز المناسبة إلى العينة المراد تحليلها وفقًا للاحتياجات التجريبية.

3. المذيب الموجود في الأنبوب A هو DMSO، يرجى التعامل معه بحذر.

4. قد تؤثر DTT، وEDTA، وEGTA، وما إلى ذلك، على أورثوفاناديت الصوديوم الموجود في هذا المنتج، لذا تعامل معه بحذر.

5. يرجى ارتداء معدات الحماية الشخصية اللازمة، مثل معطف المختبر والقفازات، لضمان صحتك وسلامتك!!

6. للاستخدام البحثي فقط!

وثائق:

ورقة بيانات السلامة

20109-أ-بيانات بيانات سلامة المواد-CN20250110

20109-ب-بيانات سلامة المواد-CN20250110

الدليل

20109_دليل_CN20250107_AR

الاستشهادات والمراجع:

[1] Zhu R، Yan T، Feng Y، وآخرون. علاج الخلايا الجذعية المتوسطة يحسن نتائج مرضى كوفيد-19 من خلال آليات تعديل المناعة المتعددة. Cell Res. 2021؛31(12):1244-1262. doi:10.1038/s41422-021-00573-y(IF:25.617)

[2] Liu H, Zhou Y, Qiu H, et al. Rab26 يقمع هجرة وغزو خلايا سرطان الثدي من خلال التوسط في التحلل الذاتي لـ Src المفسفر. Cell Death Dis. 2021؛12(4):284. نُشر في 17 مارس 2021. doi:10.1038/s41419-021-03561-7(IF:8.469)

[3] Chen Z، Xie J، Li Q، وآخرون. قدرة فوسفات ثنائي فينيل إيثيل هكسيل (مثبط للهب) في الخلايا الثديية على التحلل الخلوي بسبب إنزيم CYP البشري. Environ Pollut. 2021؛285:117527. doi:10.1016/j.envpol.2021.117527(IF:8.071)

[4] Sun J, Guo Y, Fan Y, Wang Q, Zhang Q, Lai D. يؤدي انخفاض التعبير عن IDH1 بسبب الإجهاد المزمن غير المتوقع إلى قمع الانتشار وتسريع شيخوخة الخلايا الحبيبية من خلال مسارات إشارات MAPK المنشطة بواسطة ROS. Free Radic Biol Med. 2021؛ 169: 122-136. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2021.04.016(IF:7.376)

[5] يانغ بي، دينغ جي واي، تشاو آر زي، وآخرون. مسامية Se@SiO2 nanoالقسطرة المغلفة بالكرة تعمل على تسريع التئام جرح مجرى البول البروستاتي عن طريق تعديل استقطاب الخلايا البلعمية من خلال تثبيط مسار الأنواع التفاعلية من الأكسجين-NF-κB. Acta Biomater. 2019؛88:392-405. doi:10.1016/j.actbio.2019.02.006(IF:6.638)

[6] Zhang Y, Li G, Zhang X, Lin L. منصة نانوية لإزالة جزيئات الأكسجين التفاعلية لعلاج التهاب القرنية الجرثومي المضاد للبكتيريا والتئام الجروح بشكل تآزري. J Mater Chem B. 2022؛10(24):4575-4587. نُشر في 22 يونيو 2022. doi:10.1039/d2tb00667g(IF:6.331)

[7] Deng L, Li H, Su X, et al. Chlorzoxazone, a small molecular drug, augments immunosuppressive capacity of mesenchymal stem cells via modulation of FOXO3 phosphorylation. Cell Death Dis. 2020;11(3):158. نُشر في 2 مارس 2020. doi:10.1038/s41419-020-2357-8(IF:6.304)

[8] Zhang X، Cai Z، Wu M، Huangfu X، Li J، Liu X. الحويصلات الخارجية المشتقة من الخلايا الجذعية الدهنية تستعيد التمثيل الغذائي المصفوفي المتضرر لأوتار الكفة المدورة البشرية الممزقة من خلال الحفاظ على توازن الأنسجة. Am J Sports Med. 2021؛49(4):899-908. doi:10.1177/0363546521992469(IF:6.203)

[9] Gao C، Wang SW، Lu JC، وآخرون. يعمل مركب KSR2-14-3-3ζ كعلامة حيوية وهدف علاجي محتمل في سرطان الخلايا الكبدية المقاوم للسورافينيب. Biomark Res. 2022؛10(1):25. نُشر في 25 أبريل 2022. دوى:10.1186/s40364-022-00361-9(IF:6.148)

[10] Chen L، Xu W، Yang Q، وآخرون. Imperatorin يخفف من تقلصات العضلات الناتجة عن السرطان ويمنع ضمور العضلات عن طريق تثبيط STAT3 بشكل مباشر. Pharmacol Res. 2020؛ 158: 104871. doi: 10.1016/j.phrs.2020.104871(IF: 5.893)