البروتين الطبيعي A هو بروتين سطح جدار الخلية الموجود في المكورات العنقودية الذهبية، وهو مشابه للبروتين G المعزول من جنس ج أو ج العقدية، ربط معظم الثدييات الغلوبيولين المناعي ج بواسطة متفاعل في المقام الأول مع ال ف س منطقة تختلف البروتينات A وG في خصائص ارتباطها بفئات فرعية مختلفة من الغلوبولين المناعي (Ig)، ولكنها تختلف في خصوصية ارتباطها. ويمكن استخدامها لفصل وتنقية مجموعة متنوعة من الأجسام المضادة (الأجسام المضادة وحيدة النسيلة والأجسام المضادة متعددة النسائل). يختلف البروتين A والبروتين G في خصائص ارتباطهما بفئات فرعية مختلفة من الغلوبولين المناعي (انظر الملحق 1 للمزيد من التفاصيل).
يستخدم هذا المنتج بروتين A المعدل وراثيًا، والذي لا يحافظ على خصائص تقارب Ig فحسب، بل يزيل أيضًا مجال الارتباط غير الرئيسي للبروتين الطبيعي نفسه لتقليل الارتباط غير المحدد. يتميز راتنج أجاروز SuRi rProtein A، وهو عبارة عن هلام أجاروز مترابط للغاية كمصفوفة وبروتين A المعاد تركيبه المقاوم للقلويات المعدل كربيطة، بثبات فيزيائي كيميائي عالي. يمكن الحصول على أجسام مضادة عالية النقاء من عينات الاستسقاء والمصل ووسط الثقافة عن طريق كروماتوغرافيا التقارب بخطوة واحدة باستخدام هذا المنتج، وهو مناسب للاستخدام ويستخدم على نطاق واسع.

عناصر

تحديد

شحن و تخزين

يتم شحن المنتجات مع كيس الثلج.   يمكن تخزينها بشكل مستقر عند درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية لمدة 5 سنوات.

تعليمات

1. إعداد المخزن المؤقت

ومن المستحسن أن يتم ما يلي يجب ترشيح المخازن المؤقتة باستخدام غشاء ترشيح 0.22 ميكرومتر أو 0.45 ميكرومتر قبل الاستخدام. ميزان/ربط/غسل العازل: 0.15 مولار كلوريد الصوديوم، 20 مليمولار نا2 HPO4، درجة الحموضة 7.0

محلول الإيلوشن: 0.1 مول جلايسين، درجة الحموضة 3.0

محلول محايد: 1 MTris-HCl، درجة الحموضة 8.5

2. إعداد العينة

يضمن الذي - التي ال عينة حل لديه ال ملائم أيوني قوة و الرقم الهيدروجيني قبل تحميل ال عمود، أيضاً بواسطة تخفيف عينة المصل أو الاستسقاء أو محلول زراعة الخلايا باستخدام عازل ربط/غسيل، أو عن طريق غسيل العينة باستخدام ربط/غسل المخزن المؤقت.

3. تعبئة العمود

تحميل SuRi rProtein أ يتم وضع راتنج الآغاروز في عمود كروماتوغرافي مناسب، مع الحرص على تجنب الفقاعات.

4. تنقية العينة

1) التوازن: العمود الكروماتوغرافي يكون متوازن مع ملزم المخزن المؤقت من 5 مرات ال عمود مقدار، لذا الذي - التي التعبئة والتغليف في نفس نظام التخزين المؤقت البروتين المستهدف، ويلعب دور حماية البروتين.

2) عينة تحميل: ال عينة كان محملة ل ال متوازن بشكل جيد البروتين أ أغاروز الراتنج ل يضمن ممتلىء اتصال بين البروتين المستهدف والراتنج، تحسين عملية الاسترداد معدل البروتين المستهدف، وجمع النفايات إلى يجب اختبارها.

3) الغسيل: غسل مع 10-15 مرة عمود مقدار التابع غسل المخزن المؤقت، يزيل ال النجاسة بروتين إلا إذا يتم امتصاصه بشكل خاص، وجمع محلول الغسيل.

4) الإيلوشن: الإيلوت مع 5-10 مرات عمود مقدار التابع الإيلوت المخزن المؤقت، يجمع المذيب الذي - التي يكون، ال هدف بروتين عنصر.

5) تنظيف CIP و الحفظ: عمومًا يستخدم 0.1-0.5 م هيدروكسيد الصوديوم أكبر من 3CV، و ال اتصال وقت يكون 15 دقيقة؛ ثم اشطفه بمحلول التوازن 5CV حتى يصبح محايدًا. وأخيرا، هو متوازن بنسبة 20% الإيثانول من 5 مرات العمود مقدار، و ثم مخزنة  في 20%  الإيثانول  ل ال  نفس  مقدار  في  4 درجة مئوية  ل  يمنع  ال  التعبئة والتغليف  من  كون ملوثة بالبكتيريا.

5. كشف SDS-PAGE

ال عينات مُقتَنىً في ال طهارة عملية (مشتمل إبداعي عينات، النفايات السائلة عناصر، غسل و تم الكشف عن مكونات الإيلوشن، وما إلى ذلك) بواسطة SDS-PAGE لتحديد تأثير التنقية.

ملحوظات

1. لا تقم بتبريد المنتج.
2. يجب قلب راتنج البروتين AAgarose بالكامل عدة مرات قبل الاستخدام، بحيث يختلط راتنج الآجاروز بالتساوي.
3. أثناء كافة العمليات، يجب تشغيل العينة عند درجة حرارة 4 مئوية أو على الجليد.
4. من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء المعاطف المخبرية والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء العمل.
5. للاستخدام البحثي فقط.

الجدول المرفق رقم 1: ملخص القدرة على الربطالبروتينات من النوع A و G إلى Ig في أنواع مختلفة صِنف

بروتين سوري أغاروز الراتنج