البروتين الطبيعي A هو بروتين سطح جدار الخلية الموجود في المكورات العنقودية الذهبية، وهو مشابه للبروتين G المعزول من جنس ج أو ج العقدية، ربط معظم الثدييات IgG بواسطة متفاعل في المقام الأول مع ال اف سي منطقة للغلوبولين المناعي (Ig)، ولكنهما يختلفان في خصوصية ارتباطهما. يمكن استخدامه لفصل وتنقية مجموعة متنوعة من الأجسام المضادة (الأجسام المضادة وحيدة النسيلة والأجسام المضادة متعددة النسائل). يختلف البروتين A والبروتين G في خصائص ارتباطهما بفئات فرعية مختلفة من الغلوبولين المناعي (انظر الملحق 1 لمزيد من التفاصيل).
يستخدم هذا المنتج بروتين A المعدّل وراثيًا، والذي لا يحافظ فقط على خصائص تقارب الغلوبولين المناعي (Ig)، بل يزيل أيضًا نطاق الارتباط غير الرئيسي للبروتين الطبيعي نفسه لتقليل الارتباط غير النوعي. يتميز راتنج أغاروز SuRi rProtein A، المكون من هلام أغاروز متشابك عالي الترابط كمصفوفة وبروتين A المعاد تركيبه المقاوم للقلويات كربيطة، بثبات فيزيائي وكيميائي عالي. يمكن الحصول على أجسام مضادة عالية النقاء من عينات الاستسقاء والمصل ووسط الزراعة باستخدام تقنية كروماتوغرافيا التقارب أحادية الخطوة باستخدام هذا المنتج، سهل الاستخدام وواسع الانتشار.

عناصر

تحديد

شحن و تخزين

يتم شحن المنتجات مع كيس الثلج.   يمكن تخزينها بشكل مستقر عند درجة حرارة 2~8 درجة مئوية لمدة 5 سنوات.

تعليمات

1. تحضير العازل

ومن المستحسن أن يتم ما يلي يجب ترشيح المخازن المؤقتة باستخدام غشاء ترشيح 0.22 ميكرومتر أو 0.45 ميكرومتر قبل الاستخدام. محلول التوازن/الربط/الغسيل: 0.15 مولار كلوريد الصوديوم، 20 ملي مولار Na2 HPO4، درجة الحموضة 7.0

محلول الإيلوشن: 0.1 مولار جلايسين، درجة حموضة 3.0

محلول محايد: 1 MTris-HCl، درجة الحموضة 8.5

2. إعداد العينة

يضمن الذي - التي ال عينة حل لديه ال ملائم أيوني قوة و الرقم الهيدروجيني قبل تحميل ال عمود، أيضاً بواسطة تخفيف عينة المصل أو الاستسقاء أو محلول زراعة الخلايا باستخدام محلول رابط/غسيل، أو عن طريق غسيل العينة باستخدام عازل ربط/غسل.

3. تعبئة العمود

تحميل SuRi rProtein أ يتم وضع راتنج الآجار في عمود كروماتوغرافي مناسب مع الحرص على تجنب الفقاعات.

4. تنقية العينة

1) التوازن: العمود الكروماتوغرافي يكون متوازن مع ملزم المخزن المؤقت من 5 الأوقات ال عمود مقدار، لذا الذي - التي التعبئة موجودة في نفس نظام التخزين المؤقت البروتين المستهدف، ويلعب دور حماية البروتين.

2) عينة تحميل: ال عينة كان محملة ل ال متوازن جيدًا بروتين r أ أغاروز الراتنج ل يضمن ممتلىء اتصال بين البروتين المستهدف والراتنج، مما يحسن عملية الاسترداد معدل البروتين المستهدف، وجمع النفايات إلى يتم اختبارها.

3) الغسيل: غسل مع 10-15 مرة عمود مقدار التابع غسل المخزن المؤقت، يزيل ال شوائب بروتين إلا إذا يتم امتصاصها بشكل خاص، وجمع محلول الغسيل.

4) الايلوشن: الإيلوشن مع 5-10 مرات عمود مقدار التابع الإيلوشن المخزن المؤقت، يجمع المذيب الذي - التي يكون، ال هدف بروتين عنصر.

5) تنظيف CIP و الحفظ: عمومًا يستخدم 0.1-0.5 م هيدروكسيد الصوديوم أكبر من 3CV، و ال اتصال وقت يكون 15 دقيقة؛ ثم اشطف بمحلول التوازن 5CV حتى يصبح محايدًا. وأخيرا، هو متوازن بنسبة 20٪ الإيثانول من 5 مرات العمود مقدار، و ثم مخزنة  في 20%  الإيثانول  ل ال  نفس  مقدار  في  4 درجات مئوية  ل  يمنع  ال  التعبئة والتغليف  من  كون ملوثة بالبكتيريا.

5. كشف SDS-PAGE

ال عينات مُقتَنىً في ال طهارة عملية (مشتمل إبداعي عينات، النفايات السائلة عناصر، غسل و تم الكشف عن مكونات الإيلوشن، وما إلى ذلك) بواسطة SDS-PAGE لتحديد تأثير التنقية.

ملحوظات

1. لا تقم بتبريد المنتج.
2. يجب قلب راتنج rProteinAAgarose بالكامل عدة مرات قبل الاستخدام، بحيث يختلط راتنج agarose بالتساوي.
3. خلال كافة العمليات، يجب تشغيل العينة عند 4 درجات مئوية أو على الجليد.
4. من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء المعاطف المخبرية والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة أثناء العمل.
5. للإستخدام البحثي فقط.

الجدول المرفق رقم 1: ملخص القدرة على الربطبروتينات f A و G إلى Ig في أشكال مختلفة صِنف

بروتين سوري أغاروز الراتنج