وصف
ينشأ الحمض النووي الريبوزي ثنائي السلسلة (dsRNA) كمنتج ثانوي أثناء النسخ المختبري للحمض النووي الريبوزي المرسال. يتمتع هذا المنتج الثانوي بخصائص مناعية داخل جسم الإنسان، وقادر على إثارة استجابة مناعية، وبالتالي تقليل مستويات الحمض النووي الريبوزي المرسال. وهذا يجعل الحمض النووي الريبوزي ثنائي السلسلة شوائب عملية مزعجة تتطلب التخلص منها تمامًا والتحكم الصارم في وجودها المتبقي.
ولمعالجة هذه المشكلة، تستخدم مجموعة الكشف عن الحمض النووي الريبوزي مزدوج السلسلة (dsRNA) باستخدام اختبار ELISA المبادئ التجريبية لاختبار المناعة المرتبط بالإنزيم (ELISA) باستخدام شطيرة الأجسام المضادة المزدوجة لتحديد كمية الحمض النووي الريبوزي مزدوج السلسلة المتبقي. لا يمكن استخدام المجموعة في الكشف عن dsRNAs العادية فحسب، بل يمكن استخدامها أيضًا في الكشف عن peudo UTP وN1-Me-peudo UTP و 5-OMe-UTP المعدلة بـ dsRNA.
تتضمن العملية إضافة كل من العينة القياسية وعينة الاختبار إلى صفيحة إنزيم (مُشار إليها باسم 36717-A) مطلية مسبقًا بأجسام مضادة لـ dsRNA. بعد ذلك، تتم إضافة أجسام مضادة للكشف عن dsRNA مُوسومة بالبيوتين (36717-F) في صورة مخففة. أخيرًا، يتم إدخال Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36717-G) لإنشاء مركب يتألف من أجسام مضادة ومستضدات وبيوتين وSA-HRP.
بعد غسل اللوحة، تبدأ عملية تطوير اللون بإضافة محلول TMB الكروموجيني (36717-K). وتحت تأثير تحفيز إنزيم HRP، يخضع TMB لعملية تحول من عديم اللون إلى أزرق، ثم يتوقف هذا التحول من خلال تطبيق محلول التوقف (36717-L). وفي النهاية، ينتج عن هذا التحول صبغة صفراء، ترتبط شدتها بشكل إيجابي بكمية dsRNA المحددة في العينة.
تخدم هذه المجموعة غرضًا متعدد الاستخدامات، مما يتيح تحسين عملية تنقية المنتج البيولوجي، والتحكم في الشوائب أثناء المراحل الوسيطة، واختبار الإصدار لتقييم المنتج النهائي.
صالمنتج الخامسالتلقيح تقرير
عناصر
| لا. | اسم | 36717ES48 | 36717ES96 |
| 36717-أ | شرائط ميكروتيتر مطلية بمضادات dsRNA | 48 ت | 96 ت |
| 36717-ب | STD 1: غير معدل، 5 نانوجرام/ميكرولتر | 7.5 ميكرولتر | 15 ميكرولتر |
| 36717-ج | STD 2: pUTP المعدل، 5 نانوجرام/ميكرولتر | 7.5 ميكرولتر | 15 ميكرولتر |
| 36717-د | STD 3: N1-Me-pUTP المعدل، 5 نانوجرام/ميكرولتر | 7.5 ميكرولتر | 15 ميكرولتر |
| 36717-E | المعيار 4: 5-OMe-UTP المعدل، 5 نانوجرام/ميكرولتر | 7.5 ميكرولتر | 15 ميكرولتر |
| 36717-ف | كشف الأجسام المضادة: المقترنة بالبيوتين الأجسام المضادة (100x) | 60 ميكرولتر | 120 ميكرولتر |
| 36717-ج | ستريبتافيدين-HRP (100x) | 60 ميكرولتر | 120 ميكرولتر |
| 36717-ح | محلول التخفيف 1 | 25 مل | 50 مل |
| 36717-I | محلول التخفيف 2 | 15 مل | 30 مل |
| 36717-ج | مركز غسيل العازل (20×) | 20 مل | 40 مل |
| 36717-ك | ركيزة TMB | 6 مل | 12 مل |
| 36717-ل | توقف الحل | 3 مل | 6 مل |
| 36717-م | مانع تسرب اللوحة | 2 | 4 |
الشحن والتخزين
يتم شحن الطقم مع كيس ثلج ويمكن تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين 2 درجة مئوية و8 درجات مئوية. المنتج غير المفتوح صالح لمدة عام واحد. بمجرد فتح الكاشف، يكون صالحًا لمدة نصف عام. لا تقم بتجميد هذا المنتج أبدًا.
تعليمات
1. التحضير قبل التجربة
1) المواد التجريبية التي لا تتوفر في هذه المجموعة ولكنها مطلوبة للتجربة:
أ. نصائح خالية من RNase؛
ب. أنبوب الطرد المركزي الخالي من RNase؛
ج. ورق خالٍ من الغبار؛
د. لوحة المعالجة المسبقة للعينة الخالية من RNase؛
هـ. الماء منزوع الأيونات أو الماء المقطر مرتين.
2) الأدوات والمعدات المطلوبة والتي لم يتم توفيرها:
أ. قارئ لوحة دقيقة متعدد الوظائف (يتضمن وضع الكشف ثنائي الطول الموجي، يغطي 450 نانومتر و650 نانومتر؛ وقادر على استخدام 450 نانومتر كطول موجي للكشف و650 نانومتر كطول موجي مرجعي)؛
ب. غسالة الأطباق الأوتوماتيكية بالكامل، خلاط الدوامات، خلاط درجة الحرارة الثابتة، أجهزة الطرد المركزي؛
ج. الماصات الدقيقة الدقيقة والماصات الدقيقة متعددة القنوات ذات المواصفات المختلفة؛
د. مؤقت، ثلاجة 4 درجات مئوية؛
هـ. هزاز اللوحة الدقيقة.
2. تحليل النتائج
أ. إذا تجاوزت قيمة OD للعينة المراد اختبارها قيمة OD عند أعلى نقطة من المنحنى القياسي، فيجب تخفيف العينة وإعادة قياسها.
ب. إجراء تطوير المنحنى: قم بإنشاء منحنى قياسي من خلال رسم التركيزات القياسية على المحور السيني وقيم الامتصاص القياسي المعايرة المقابلة على المحور الصادي. يمكن أن تساعد أدوات الرسم والبرامج الإحصائية المختلفة في إنشاء المنحنيات القياسية وتحديد تركيزات العينة غير المعروفة. يُنصح باستخدام طريقة ملائمة بأربعة أو خمسة معاملات لهذه التجربة.في النهاية، قم بحساب الكمية المتبقية من dsRNA في العينة من خلال الرجوع إلى المنحنى القياسي والنظر في عامل تخفيف العينة.
ج. المنحنى القياسي المقدم هو مثال توضيحي (لأغراض مرجعية فقط). يجب تحديد محتوى العينة الفعلي باستخدام منحنى قياسي تم إنشاؤه خصيصًا لنفس المعيار التجريبي.
3. مخطط تدفق التجربة
الشكل 5 مخطط تدفق التجربة
4. أداء المنتج
تم تقييم أداء هذه المجموعة بشكل كامل. لمزيد من التفاصيل، يرجى الاتصال بالموظفين الفنيين للحصول على تقرير التحقق من الأداء المقابل.
5. ملحوظات
- يرجى قراءة دليل التعليمات هذا بعناية قبل استخدام هذه المجموعة.
- يرجى استخدام هذا المنتج خلال فترة الصلاحية، ويُحظر خلط الكواشف ذات الصلة من دفعات مختلفة.
- يجب إعادة جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام.
- من أجل سلامتك وصحتك، يرجى ارتداء معطف المختبر والقفازات التي تستخدم لمرة واحدة.
- هذا المنتج مخصص لأغراض البحث العلمي فقط.
الدفع والأمن
تتم معالجة معلومات الدفع الخاصة بك بشكل آمن. لا نقوم بتخزين تفاصيل بطاقة الائتمان ولا يمكننا الوصول إلى معلومات بطاقة الائتمان الخاصة بك.
سؤال
قد تعجبك أيضًا
التعليمات
المنتج مخصص لأغراض البحث فقط وليس مخصصًا للاستخدام العلاجي أو التشخيصي لدى البشر أو الحيوانات. المنتجات والمحتوى محميان بموجب براءات الاختراع والعلامات التجارية وحقوق الطبع والنشر المملوكة لشركة Yeasen Biotechnology. تشير رموز العلامة التجارية إلى بلد المنشأ، وليس بالضرورة التسجيل في جميع المناطق.
قد تتطلب بعض التطبيقات حقوق الملكية الفكرية الإضافية لجهات خارجية.
تلتزم شركة Yeasen بالعلوم الأخلاقية، حيث تؤمن بأن أبحاثنا يجب أن تعالج الأسئلة الحرجة مع ضمان معايير السلامة والأخلاق.