هييف ترانس™ كاشف نقل الليبوسومات التعليمات

(1) س: هل يمكن أن يكون المصل موجودًا عند تحضير مجمع كاشف نقل الحمض النووي؟

ج: وجود المصل يؤثر على تكوين الليبوزومات. يوصى باستخدام وسط خالٍ من المصل (عادةً وسط MEM) عند تحضير مجمعات كواشف نقل الحمض النووي.

(2) س: هل يمكن تجميد كاشف النقل؟

ج: لا. يجب تخزين هذا الكاشف عند درجة حرارة تتراوح من 2 إلى 8 درجات مئوية، ويجب الحرص على تجنب فتح الغطاء بشكل متكرر لفترة طويلة، حيث أن فتح الغطاء لفترة طويلة سيؤدي إلى أكسدة الليبوزوم ويؤثر على كفاءة النقل.

(3) س: ما الذي يجب أن أنتبه إليه عند استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™؟

ج: 1) أثناء عملية النقل، من الأفضل أن يصل التقاء الخلايا إلى 80% -95%، ويتم تحديد كثافة الطلاء المحددة وفقًا لحالة الخلايا؛

2) يساعد استخدام الحمض النووي عالي النقاء على الحصول على كفاءة نقل أعلى؛

3) يلزم تخفيف كواشف الحمض النووي وكواشف النقل باستخدام وسط خالٍ من المصل عند تحضير معقدات النقل؛

4) لا يمكن إضافة المضادات الحيوية إلى الوسط أثناء النقل؛

5) يجب تحسين تركيز الحمض النووي وكمية كاشف الليبوزوم الكاتيوني للاستخدام الأول للحصول على أقصى قدر من كفاءة النقل. نسبة الحمض النووي إلى كاشف النقل هي يوصى عمومًا بأن تكون النسبة 1:2-1:3.

(4) س: هل هناك حاجة إلى إنهاء الأمر بعد النقل؟

ج: لا حاجة لذلك. تظل مجمعات الليبوزوم مستقرة لمدة 6 ساعات. إذا لم يتم تغيير وسط الخلية قبل التحويل الجيني، فمن أجل ضمان العناصر الغذائية اللازمة لنمو الخلايا الطبيعي، فمن الضروري التغيير إلى وسط جديد بعد 4 إلى 6 ساعات. ومع ذلك، إذا تم تغيير الوسط قبل التحويل الجيني، فليس من الضروري تغيير الوسط بعد تحويل الليبوزوم.

(5) س: ما الذي يجب أن أنتبه إليه إذا كنت أرغب في تحسين كفاءة النقل؟

أ: أ: كثافة الخلايا في وقت النقل هي 90٪ -95٪.

ب: أثناء عملية النقل الجيني، استخدم وسط MEM الخالي من المصل لتخفيف الأحماض النووية والليبوزومات.

ج: يمكن تغيير الوسط بعد مرور 4-6 ساعات من النقل الجيني.

(6) س: هل يمكن إجراء التحويل المشترك للحمض النووي و siRNA؟ ما هو التأثير؟

ج: يمكن إجراء التحويل المشترك، ولكن يوصى بإجراء التحويل المنفصل، ويجب إجراء تحويل الحمض النووي بعد 6 ساعات من siRNA. إذا تم إجراؤهما معًا، ستكون كفاءة تحويل siRNA أسوأ.

(7) س: هل يمكن استخدام كاشف التحويل الجيني في نقل التغليف الفيروسي العدسي؟

ج: التغليف الفيروسي العدسي ممكن، ولكن كفاءة التغليف الفيروسي العدسي لا ترتبط بالضرورة بكفاءة النقل، بل ترتبط أيضًا باختيار البلازميدات التغليفية والنسبة بين البلازميدات.

(8) س: هل يمكن استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™ لنقل الخلايا المعلقة؟

ج: يمكن استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™ لنقل الخلايا المعلقة، راجع البروتوكول للحصول على التفاصيل. بالإضافة إلى ذلك، أطلقنا أيضًا كاشف نقل خاصًا بالخلايا المعلقة (رقم الكتالوج 40805، كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي للخلايا المعلقة).

[1] Liu R, Yang J, Yao J, Zhao Z, He W, Su N, Zhang Z, Zhang C, Zhang Z, Cai H, Zhu L, Zhao Y, Quan S, Chen X, Yang Y. التحكم البصري الوراثي في ​​وظيفة الحمض النووي الريبي والتمثيل الغذائي باستخدام البروتينات المرتبطة بالحمض النووي الريبي القابلة للتبديل بالضوء. Nat Biotechnol. 3 يناير 2022. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. Epub قبل الطباعة. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J، Chen P، Wang H، Liu H، Li Y، Zhang Y، Wu Y، Paek C، Sun Z، Lei J، Yin L. متغيرات Cas12a المصممة لتأثير أقل خارج الهدف على مستوى الجينوم من خلال التعرف الصارم على PAM. Mol Ther. 5 يناير 2022؛ 30(1): 244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Epub 20 أكتوبر 2021. PMID: 34687846؛ PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] تشن س، كاو إكس، تشانغ جيه، وو دبليو، تشانغ ب، تشاو ف.circVAMP3 يحرك فصل طور CAPRIN1 ويمنع سرطان الخلايا الكبدية عن طريق تثبيط ترجمة c-Myc. Adv Sci (Weinh). 2022 مارس؛ 9(8):e2103817. doi: 10.1002/advs.202103817. Epub 2022 يناير 24. PMID: 35072355؛ PMCID: PMC8922094. (IF:16.808)

[4] Zhang Y, Yu X, Sun R, Min J, Tang X, Lin Z, Xie S, Li X, Lu S, Tian Z, Gu C, Teng L, Yang Y. عامل الربط arginine/serine-rich 8 يعزز الخباثة في المايلوما المتعددة وآفات العظام من خلال الربط البديل لـ CACYBP والاتصال الخلوي القائم على الإكسوسوم. Clin Transl Med. 2022 فبراير؛ 12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X، Deng Z، Ding P، Qiang W، Lu Y، Gao S، Hu Y، Yang Y، Du J، Gu C. بروتين جديد مشفر بواسطة circHNRNPU يعزز تطور المايلوما المتعددة عن طريق تنظيم البيئة الدقيقة لنخاع العظم والربط البديل. J Exp Clin Cancer Res. 2022 مارس 8;41(1):85. دوى: 10.1186/s13046-022-02276-7. بميد: 35260179. (IF:11.161)

[6] Hua Z، Wei R، Guo M، Lin Z، Yu X، Li X، Gu C، Yang Y. يعزز YTHDF2 تكاثر خلايا المايلوما المتعددة عبر محور STAT5A/MAP2K2/p-ERK. Oncogene. 2022 مارس؛41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 2022 يناير 24. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. إعادة تنشيط مثبط الورم في سرطان الثدي عن طريق تبديل المعزز من خلال شبكة NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 Sep 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (إذا: 16.9)

[8] Dai L, Dai Y, Han J, Huang Y, Wang L, Huang J, Zhou Z. نظرة هيكلية إلى تجنيد معقد BRCA1-BARD1 للكروماتين التالف. Mol Cell. 1 يوليو 2021؛81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 7 يونيو 2021. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K، Wang A، Zhong K، Qi S، Wei C، Shu X، Tu WY، Xu W، Xia C، Xiao Y، Chen A، Bai L، Zhang J، Luo B، Wang W، Shen C. يقلل محور UBQLN2-HSP70 من تجمعات بولي جلي-ألا ويخفف من العيوب السلوكية في نموذج الحيوان C9ORF72. Neuron. 16 يونيو 2021؛ 109 (12): 1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 14 مايو 2021. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] Liang Y, Lu Q, Li W, Zhang D, Zhang F, Zou Q, Chen L, Tong Y, Liu M, Wang S, Li W, Ren X, Xu P, Yang Z, Dong S, Zhang B, Huang Y, Li D, Wang H, Yu W. إعادة تنشيط مثبط الورم في سرطان الثدي عن طريق تبديل المعزز من خلال شبكة NamiRNA. Nucleic Acids Res. 2021 Sep 7;49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471; PMCID: PMC8421228. (IF:16.9)

[11] Li T، Chen X، Qian Y، Shao J، Li X، Liu S، Zhu L، Zhao Y، Ye H، Yang Y. جهاز بصري جيني قائم على BRET الاصطناعي للتعبير عن الجينات المنقولة النابضة مما يتيح توازن الجلوكوز في الفئران. Nat Commun. 27 يناير 2021؛ 12(1): 615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786؛ PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] Pan Y، He X، Li C، Li Y، Li W، Zhang H، Wang Y، Zhou G، Yang J، Li J، Qu J، Wang H، Gao Z، Shen Y، Li T، Hu H، Ma H. يجند النشاط العصبي محور CRTC1/CREB لتحفيز الالتهام الذاتي المعتمد على النسخ للحفاظ على LTD في المرحلة المتأخرة. Cell Rep. 20 يوليو 2021؛ 36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H, Xing R, Ou Z, Zhao J, Hong G, Zhao TJ, Han Y, Chen Y. مستقبل البروتين G المقترن GPR17 يثبط نمو الورم الدبقي عن طريق زيادة إنتاج ROS بوساطة مركب بوليكومب القمعي 1. Cell Death Dis. 2021 Jun 12;12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140; PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] فان واي، وانغ جي، جين دبليو، صن واي، شو واي، وانغ واي، ليانغ إكس، سو د.يعزز CircNR3C2 تأثير HRD1 الكابت للورم عن طريق إسفنجة miR-513a-3p في سرطان الثدي الثلاثي السلبي. Mol Cancer. 2 فبراير 2021؛ 20(1): 25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x. PMID: 33530981؛ PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C، Wang Y، Zhang L، Qiao L، Sun S، Shao M، Tang X، Ding P، Tang C، Cao Y، Zhou Y، Guo M، Wei R، Li N، Xiao Y، Duan J، Yang Y. AHSA1 هو هدف علاجي واعد لتكاثر الخلايا ومقاومة مثبطات البروتيازوم في المايلوما المتعددة. J Exp Clin Cancer Res. 2022 Jan 6؛41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674؛ PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] Luo Q, Wu X, Zhao P, Nan Y, Chang W, Zhu X, Su D, Liu Z. OTUD1 ينشط موت الخلايا المبرمج المستقل عن الكاسبيز والمعتمد على الكاسبيز من خلال تعزيز انتقال AIF النووي وتحلل MCL1. Adv Sci (Weinh). 8 فبراير 2021؛ 8(8): 2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171؛ PMCID: PMC8061361. (IF:15.84)

[17] Luo Q, Wu X, Nan Y, Chang W, Zhao P, Zhang Y, Su D, Liu Z. TRIM32/USP11 Balances ARID1A Stability and the Oncogenic/Tumor-Suppressive Status of Squamous Cell Carcinoma. Cell Rep. 2020 Jan 7;30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] يعمل Sun X، وPeng X، وCao Y، وZhou Y، وSun Y. ADNP على تعزيز التمايز العصبي عن طريق تعديل إشارات Wnt/β-catenin. نات كومون. 2020 يونيو 12;11(1):2984. دوى: 10.1038/s41467-020-16799-0. بميد: 32533114؛ الرقم التعريفي للمعرف: PMC7293280. (إذا:14.911)

[19] Yang X، Wang H، Xie E، Tang B، Mu Q، Song Z، Chen J، Wang F، Min J. إعادة توصيل إشارات ERBB3 وERK يمنح مقاومة لتثبيط FGFR1 في سرطان الجهاز الهضمي الذي يحمل طفرة ERBB3-E928G. Protein Cell. 2020 Dec؛11(12):915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529؛ PMCID: PMC7719122. (IF:14.872)

[20] Chen, T., Chen, Y., Chen, H. et al., آلة نانوية متحركة للحمض النووي غير المقيد ثنائي الإنزيم للتصوير داخل الخلايا للحمض النووي الريبي الصغير المعبر عنه بشكل ضعيف. Nano Res. 12, 1055–1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (إذا: 8.21)

[21] Zhang X, Qi Z, Yin H, Yang G. Interaction between p53 and Ras signaling controls cisplatin resistant via HDAC4- and HIF-1α-mediated of cytoposis and autophagy. Theranostics. 2019 Jan 30;9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818; PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] Zou Y، Wang A، Shi M، Chen X، Liu R، Li T، Zhang C، Zhang Z، Zhu L، Ju Z، Loscalzo J، Yang Y، Zhao Y. تحليل المناظر الطبيعية والديناميكيات المؤكسدة في الخلايا الحية وفي الجسم الحي باستخدام أجهزة استشعار فلورية مشفرة وراثيًا. Nat Protoc. 2018 أكتوبر؛ 13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175؛ PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K، Zhao X، Chen X، Wei Y، Du W، Wang Y، Liu L، Zhao W، Han Z، Kong D، Zhao Q، Guo Z، Han Z، Liu N، Ma F، Li Z. التأثيرات العلاجية المحسنة للجسيمات الخارجية المشتقة من الخلايا الجذعية المتوسطة مع هلام هيدروجيل قابل للحقن لعلاج نقص تروية الأطراف الخلفية. ACS Appl Mater Interfaces. 12 سبتمبر 2018؛ 10 (36): 30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Epub 29 أغسطس 2018. PMID: 30118197. (IF:8.09)

[24] Hao H, Hu S, Chen H, Bu D, Zhu L, Xu C, Chu F, Huo X, Tang Y, Sun X, Ding BS, Liu DP, Hu S, Wang M. فقدان CXCR7 البطاني يضعف التوازن الوعائي وإعادة تشكيل القلب بعد احتشاء عضلة القلب: الآثار المترتبة على اكتشاف الأدوية القلبية الوعائية. Circulation. 28 مارس 2017؛ 135(13): 1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. Epub 2 فبراير 2017. PMID: 28154007. (IF:18.881)