هييف ترانس™ كاشف نقل الليبوسومات التعليمات

(1) س: هل يمكن أن يكون المصل موجودًا عند تحضير مجمع كاشف نقل الحمض النووي؟

ج: يؤثر وجود المصل على تكوين الليبوزومات. يُنصح باستخدام وسط خالٍ من المصل (عادةً وسط MEM) عند تحضير مُركّبات كواشف نقل الحمض النووي.

(2) س: هل يمكن تجميد كاشف النقل؟

ج: لا. يجب تخزين هذا الكاشف عند درجة حرارة 2-8 درجة مئوية، ويجب الحرص على تجنب فتح الغطاء بشكل متكرر لفترة طويلة، لأن فتح الغطاء لفترة طويلة سيؤدي إلى أكسدة الليبوزوم ويؤثر على كفاءة النقل.

(3) س: ما الذي يجب أن أنتبه إليه عند استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™؟

ج: 1) أثناء عملية النقل، من الأفضل أن يصل التقاء الخلايا إلى 80٪ -95٪، ويتم تحديد كثافة الطلاء المحددة وفقًا لحالة الخلايا؛

2) يساعد استخدام الحمض النووي عالي النقاء على الحصول على كفاءة نقل أعلى؛

3) يجب تخفيف كواشف الحمض النووي والتحويل الجيني باستخدام وسط خالٍ من المصل عند تحضير معقدات التحويل الجيني؛

4) لا يمكن إضافة المضادات الحيوية إلى الوسط أثناء عملية النقل؛

٥) يجب تحسين تركيز الحمض النووي وكمية كاشف الليبوزوم الكاتيوني عند الاستخدام الأول لتحقيق أقصى كفاءة في النقل. نسبة الحمض النووي إلى كاشف النقل هي: يوصى عمومًا بأن تكون النسبة 1:2-1:3.

(4) س: هل هناك حاجة إلى إنهاء الأمر بعد النقل؟

ج: لا حاجة لذلك. تبقى مُركّبات الليبوزومات ثابتة لمدة 6 ساعات. إذا لم يُغيّر وسط الخلية قبل النقل، لضمان العناصر الغذائية اللازمة لنمو الخلايا الطبيعي، فمن الضروري تغييره إلى وسط جديد بعد 4 إلى 6 ساعات. أما إذا غُيّر الوسط قبل النقل، فليس من الضروري تغييره بعد نقل الليبوزوم.

(5) س: ما الذي يجب أن أنتبه إليه إذا كنت أريد تحسين كفاءة النقل؟

ج: أ: كثافة الخلايا في وقت النقل هي 90%-95%.

ب: أثناء عملية النقل، استخدم وسط MEM الخالي من المصل لتخفيف الأحماض النووية والليبوزومات.

ج: يمكن تغيير الوسط بعد 4-6 ساعات من النقل الجيني.

(6) س: هل يمكن إجراء النقل المشترك للحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين (DNA) والـ siRNA؟ ما هو التأثير؟

ج: يمكن إجراء النقل المشترك، ولكن يُنصح بإجراء نقل منفصل، ويجب إجراء نقل الحمض النووي بعد ست ساعات من نقل الرنا المتداخل صغير الحجم (siRNA). في حال إجراء العمليتين معًا، ستكون كفاءة نقل الرنا المتداخل صغير الحجم (siRNA) أقل.

(7) س: هل يمكن استخدام كاشف التحويل لنقل التغليف الفيروسي العدسي؟

ج: من الممكن استخدام التغليف الفيروسي العدسي، ولكن كفاءة التغليف الفيروسي العدسي لا ترتبط بالضرورة بكفاءة النقل، بل ترتبط أيضًا باختيار البلازميدات التغليفية والنسبة بين البلازميدات.

(8) س: هل يمكن استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™ لنقل الخلايا المعلقة؟

ج: يُمكن استخدام كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي Hieff Trans™ لنقل خلايا التعليق، للمزيد من التفاصيل، يُرجى مراجعة البروتوكول. بالإضافة إلى ذلك، أطلقنا كاشف نقل خاصًا بخلايا التعليق (رقم الكتالوج 40805، كاشف نقل الحمض النووي الليبوزومي لخلايا التعليق).

[1] Liu R، Yang J، Yao J، Zhao Z، He W، Su N، Zhang Z، Zhang C، Zhang Z، Cai H، Zhu L، Zhao Y، Quan S، Chen X، Yang Y. التحكم البصري الوراثي في ​​وظيفة الحمض النووي الريبي (RNA) واستقلابه باستخدام بروتينات ربط الحمض النووي الريبي المُهندسة القابلة للتبديل بالضوء. Nat Biotechnol. 3 يناير 2022. doi: 10.1038/s41587-021-01112-1. النشر الإلكتروني قبل الطباعة. PMID: 34980910. (IF:54.908)

[2] Zhou J، Chen P، Wang H، Liu H، Li Y، Zhang Y، Wu Y، Paek C، Sun Z، Lei J، Yin L. متغيرات Cas12a مصممة لتقليل تأثير الجينوم الخارجي عن الهدف من خلال التعرف الصارم على PAM. Mol Ther. 5 يناير 2022؛ 30(1): 244-255. doi: 10.1016/j.ymthe.2021.10.010. Epub 20 أكتوبر 2021. PMID: 34687846؛ PMCID: PMC8753454. (IF:11.454)

[3] Chen S، Cao X، Zhang J، Wu W، Zhang B، Zhao F. circVAMP3 يحرك فصل طور CAPRIN1 ويمنع سرطان الخلايا الكبدية عن طريق تثبيط ترجمة c-Myc. Adv Sci (Weinh).مارس ٢٠٢٢؛ ٩(٨):e٢١٠٣٨١٧. doi: ١٠.١٠٠٢/advs.٢٠٢١٠٣٨١٧. نُشرت إلكترونيًا في ٢٤ يناير ٢٠٢٢. PMID: ٣٥٠٧٢٣٥٥؛ PMCID: PMC٨٩٢٢٠٩٤. (IF:١٦.٨٠٨)

[4] Zhang Y، Yu X، Sun R، Min J، Tang X، Lin Z، Xie S، Li X، Lu S، Tian Z، Gu C، Teng L، Yang Y. يُعزز عامل الربط الغني بالأرجينين/السرين 8 خباثة النخاع المتعدد وآفات العظام من خلال الربط البديل لـ CACYBP والتواصل الخلوي القائم على الإكسوسوم. Clin Transl Med. 2022 فبراير؛ 12(2):e684. doi: 10.1002/ctm2.684. PMID: 35184390. (IF:11.492)

[5] Tang X، Deng Z، Ding P، Qiang W، Lu Y، Gao S، Hu Y، Yang Y، Du J، Gu C. بروتين جديد مشفر بواسطة circHNRNPU يعزز تطور المايلوما المتعددة عن طريق تنظيم البيئة الدقيقة لنخاع العظم والربط البديل. J Exp Clin Cancer Res. 2022 مارس 8;41(1):85. دوى: 10.1186/s13046-022-02276-7. بميد: 35260179. (IF:11.161)

[6] هوا زد، وي ر، جو م، لين زد، يو إكس، لي إكس، جو س، يانغ ي. يُعزز YTHDF2 تكاثر خلايا المايلوما المتعددة عبر محور STAT5A/MAP2K2/p-ERK. Oncogene. مارس 2022؛ 41(10):1482-1491. doi: 10.1038/s41388-022-02191-3. Epub 24 يناير 2022. PMID: 35075244. (IF:9.867)

[7] ليانغ ي، لو كيو، لي دبليو، تشانغ د، تشانغ ف، زو كيو، تشين ل، تونغ ي، ليو م، وانغ س، لي دبليو، رين إكس، شو ب، يانغ زد، دونغ س، تشانغ ب، هوانغ ي، لي د، وانغ هـ، يو دبليو. إعادة تنشيط مثبط الورم في سرطان الثدي عن طريق تبديل المُحسِّن عبر شبكة نامي آر إن إيه. مجلة أبحاث الأحماض النووية، 7 سبتمبر 2021؛ 49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471؛ PMCID: PMC8421228. (إذا: 16.9)

[8] داي ل، داي ي، هان ج، هوانغ ي، وانغ ل، هوانغ ج، تشو ز. نظرة هيكلية على استقطاب معقد BRCA1-BARD1 إلى الكروماتين التالف. مول سيل. 1 يوليو 2021؛ 81(13):2765-2777.e6. doi: 10.1016/j.molcel.2021.05.010. Epub 7 يونيو 2021. PMID: 34102105. (IF:17.97)

[9] Zhang K، Wang A، Zhong K، Qi S، Wei C، Shu X، Tu WY، Xu W، Xia C، Xiao Y، Chen A، Bai L، Zhang J، Luo B، Wang W، Shen C. يقلل محور UBQLN2-HSP70 من تجمعات بولي جلي-ألا ويخفف من العيوب السلوكية في نموذج C9ORF72 الحيواني. Neuron. 16 يونيو 2021؛ 109(12):1949-1962.e6. doi: 10.1016/j.neuron.2021.04.023. Epub 14 مايو 2021. PMID: 33991504. (IF:17.17)

[10] ليانغ ي، لو كيو، لي دبليو، تشانغ د، تشانغ ف، زو كيو، تشين ل، تونغ ي، ليو م، وانغ س، لي دبليو، رين إكس، شو ب، يانغ زد، دونغ س، تشانغ ب، هوانغ ي، لي د، وانغ هـ، يو دبليو. إعادة تنشيط مثبط الورم في سرطان الثدي عن طريق تبديل المُحسِّن عبر شبكة نامي رنا. مجلة أبحاث الأحماض النووية، 7 سبتمبر 2021؛ 49(15):8556-8572. doi: 10.1093/nar/gkab626. PMID: 34329471؛ PMCID: PMC8421228. (IF:16.9)

[11] لي ت، تشين إكس، تشيان واي، شاو جيه، لي إكس، ليو إس، تشو إل، تشاو واي، يي إتش، يانغ واي. جهاز بصري جيني اصطناعي قائم على BRET للتعبير النبضي عن الجينات المنقولة، مما يُمكّن من استتباب الجلوكوز في الفئران. نات كوميون. 27 يناير 2021؛ 12(1):615. doi: 10.1038/s41467-021-20913-1. PMID: 33504786؛ PMCID: PMC7840992. (IF:14.92)

[12] بان ي، هي إكس، لي سي، لي واي، لي دبليو، تشانغ هـ، وانغ يي، تشو جي، يانغ جيه، لي جيه، كو جيه، وانغ هـ، غاو زد، شين يي، لي تي، هو هـ، ما هـ. يُجنّد النشاط العصبي محور CRTC1/CREB لتحفيز الالتهام الذاتي المعتمد على النسخ للحفاظ على LTD في المرحلة المتأخرة. Cell Rep. 20 يوليو 2021؛ 36(3):109398. doi: 10.1016/j.celrep.2021.109398. PMID: 34289350. (IF:9.42)

[13] Liu H، Xing R، Ou Z، Zhao J، Hong G، Zhao TJ، Han Y، Chen Y. مستقبل GPR17 المقترن بالبروتين G يثبط نمو الورم الدبقي عن طريق زيادة إنتاج ROS بوساطة مركب بوليكومب القمعي 1. Cell Death Dis. 12 يونيو 2021؛ 12(6):610. doi: 10.1038/s41419-021-03897-0. PMID: 34120140؛ PMCID: PMC8197764. (IF:8.463)

[14] فان ي، وانغ ج، جين و، صن ي، شو ي، وانغ ي، ليانغ س، سو د. يعزز CircNR3C2 تأثير HRD1 الكابت للورم عن طريق إسفنج miR-513a-3p في سرطان الثدي الثلاثي السلبي. مجلة سرطان الدم. 2 فبراير 2021؛ 20(1):25. doi: 10.1186/s12943-021-01321-x.PMID: 33530981؛ PMCID: PMC7851937. (IF:27.403)

[15] Gu C، Wang Y، Zhang L، Qiao L، Sun S، Shao M، Tang X، Ding P، Tang C، Cao Y، Zhou Y، Guo M، Wei R، Li N، Xiao Y، Duan J، Yang Y. يُعد AHSA1 هدفًا علاجيًا واعدًا لتكاثر الخلايا ومقاومة مثبطات البروتيازوم في الورم النقوي المتعدد. مجلة أبحاث السرطان السريرية التجريبية، 6 يناير 2022؛ 41(1):11. doi: 10.1186/s13046-021-02220-1. PMID: 34991674؛ PMCID: PMC8734095. (IF:11.161)

[16] لو كيو، وو إكس، تشاو بي، نان واي، تشانغ دبليو، تشو إكس، سو دي، ليو زد. يُنشّط OTUD1 موت الخلايا المبرمج المستقل عن الكاسبيز والمعتمد عليه عن طريق تعزيز انتقال AIF النووي وتحلل MCL1. مجلة العلوم المتقدمة (وينه). 8 فبراير 2021؛ 8(8):2002874. doi: 10.1002/advs.202002874. PMID: 33898171؛ PMCID: PMC8061361. (IF:15.84)

[17] لو كيو، وو إكس، نان واي، تشانغ دبليو، تشاو بي، تشانغ واي، سو دي، ليو زد. توازن TRIM32/USP11 استقرار ARID1A والحالة المسرطنة/القمعية للأورام في سرطان الخلايا الحرشفية. مجلة Cell Rep. 7 يناير 2020؛ 30(1):98-111.e5. doi: 10.1016/j.celrep.2019.12.017. PMID: 31914402. (IF:9.42)

[18] يعمل Sun X، وPeng X، وCao Y، وZhou Y، وSun Y. ADNP على تعزيز التمايز العصبي عن طريق تعديل إشارات Wnt/β-catenin. نات كومون. 2020 يونيو 12;11(1):2984. دوى: 10.1038/s41467-020-16799-0. بميد: 32533114؛ الرقم التعريفي للمعرف: PMC7293280. (إذا:14.911)

[19] يانغ إكس، وانغ هـ، شي إي، تانغ ب، مو كيو، سونغ زد، تشن جيه، وانغ ف، مين جيه. إعادة توصيل إشارات ERBB3 وERK يمنح مقاومة لتثبيط FGFR1 في سرطان الجهاز الهضمي الحامل لطفرة ERBB3-E928G. بروتين سيل. ديسمبر 2020؛ 11(12): 915-920. doi: 10.1007/s13238-020-00749-z. PMID: 32632529؛ PMCID: PMC7719122. (IF:14.872)

[20] تشين، ت.، تشين، ي.، تشين، هـ. وآخرون. آلة نانوية متحركة للحمض النووي غير المحدود، مدفوعة بإنزيم مزدوج، للتصوير داخل الخلايا للحمض النووي الريبوزي الميكروي منخفض التعبير. نانو ريس. 12، 1055-1060 (2019). https://doi.org/10.1007/s12274-019-2344-5 (IF:8.21)

[21] Zhang X، Qi Z، Yin H، Yang G. التفاعل بين إشارات p53 وRas يتحكم في مقاومة السيسبلاتين من خلال تنظيم موت الخلايا المبرمج والالتهام الذاتي بوساطة HDAC4 وHIF-1α. Theranostics. 30 يناير 2019؛ 9(4):1096-1114. doi: 10.7150/thno.29673. PMID: 30867818؛ PMCID: PMC6401400. (IF:8.12)

[22] زو ي، وانغ أ، شي م، تشن إكس، ليو ر، لي ت، تشانغ س، تشانغ ز، تشو ل، جو ز، لوسكالزو ج، يانغ ي، تشاو ي. تحليل بيئات الأكسدة والاختزال وديناميكياتها في الخلايا الحية وفي الجسم الحي باستخدام مستشعرات فلورية مُرمَّزة وراثيًا. بروتوكولات نات. أكتوبر 2018؛ 13(10):2362-2386. doi: 10.1038/s41596-018-0042-5. PMID: 30258175؛ PMCID: PMC6714056. (IF:13.49)

[23] Zhang K، Zhao X، Chen X، Wei Y، Du W، Wang Y، Liu L، Zhao W، Han Z، Kong D، Zhao Q، Guo Z، Han Z، Liu N، Ma F، Li Z. التأثيرات العلاجية المُعززة للجسيمات الخارجية المُشتقة من الخلايا الجذعية المتوسطة مع هلام هيدروجيل قابل للحقن لعلاج نقص تروية الأطراف الخلفية. ACS Appl Mater Interfaces. 12 سبتمبر 2018؛ 10(36): 30081-30091. doi: 10.1021/acsami.8b08449. Epub 29 أغسطس 2018. PMID: 30118197. (IF:8.09)

[24] هاو هـ، هو س، تشن هـ، بو د، تشو ل، شو س، تشو ف، هوو إكس، تانغ واي، صن إكس، دينغ بي إس، ليو دي بي، هو س، وانغ م. فقدان جين CXCR7 البطاني يُضعف التوازن الوعائي وإعادة تشكيل القلب بعد احتشاء عضلة القلب: آثاره على اكتشاف أدوية القلب والأوعية الدموية. مجلة الدورة الدموية. 28 مارس 2017؛ 135(13): 1253-1264. doi: 10.1161/CIRCULATIONAHA.116.023027. نُشر إلكترونيًا في 2 فبراير 2017. PMID: 28154007. (IF:18.881)