كاشف نقل الجينات العالمي Hieff Trans™ هو كاشف نقل جينات ليبوزوم متعدد الأغراض ومريح وفعال تم تطويره بناءً على أحدث تقنيات النانو. وهو مناسب لنقل الجينات DNA وRNA والأليغونوكليوتيدات، بما في ذلك الخلايا الأولية، والخلايا التي يصعب نقل الجينات منها، بما في ذلك الخلايا العصبية، تتمتع بكفاءة نقل جينات عالية. تسمح تركيبته الفريدة بإضافته مباشرة إلى الوسط، ولا يؤثر وجود المصل على كفاءة النقل، مما يقلل من الضرر الذي يلحق بالخلايا بسبب إزالة المصل. ليس من الضروري إزالة مركب كاشف نقل الجينات الحمض النووي أو استبداله بوسط جديد بعد النقل، ويمكن أيضًا استبدال الوسط الجديد بعد 4-6 ساعات وفقًا للحالة الغذائية للخلايا.

مكونات المنتج

الشحن والتخزين

يتم شحن المنتج مع أكياس ثلج ويمكن تخزينه في درجة حرارة تتراوح بين 2 و8 درجات مئوية لمدة عام واحد. لا تقم بتجميده!

تحذيرات

1) أثناء عملية النقل، من الأفضل أن يصل التقاء الخلايا إلى 70% -90%، ويتم تحديد كثافة الطلاء المحددة وفقًا لحالة الخلايا.
2) يتطلب تحضير معقدات النقل تخفيف الحمض النووي وكواشف النقل في وسط خالٍ من المصل.
3) لا يمكن إضافة المضادات الحيوية إلى الوسط أثناء عملية النقل.
4) يساعد استخدام الحمض النووي أو الحمض النووي الريبوزي عالي النقاء على الحصول على كفاءة انتقال أعلى، والسموم الداخلية في البلازميدات هي عدو الانتقال.
5) قم بالتخزين في درجة حرارة تتراوح بين 2 إلى 8 درجات مئوية، واحرص على عدم فتح الغطاء بشكل متكرر لفترة طويلة.
6) يجب تحسين تركيز الحمض النووي وحجم الكاشف للاستخدام الأول للحصول على أقصى قدر من كفاءة النقل.
7) هذا المنتج مخصص لأغراض البحث العلمي فقط!

تعليمات

نقل الحمض النووي
[ملاحظة] تتأثر كمية كاشف التحويل المستخدم بنوع الخلية وظروف التجربة الأخرى. يوصى بتعيين تدرج لتحسين الكمية المثلى للاستخدام في المرة الأولى.
1) يتم طلاء الخلايا، ويجب أن يكون التقاء الخلايا 70٪ -90٪ بحلول وقت النقل.
2) قم بتخفيف محلول Universal-B باستخدام وسط Opti-MEM وفقًا للجدول أدناه واخلطه برفق.
3) قم بتخفيف الحمض النووي باستخدام وسط Opti-MEM للحصول على خليط الحمض النووي المسبق، ثم أضف محلول Universal-A واخلط بلطف للحصول على الحمض النووي المخفف.
4) أضف الحمض النووي المخفف إلى المحلول Universal-B المخفف (بنسبة 1:1).
5) احضنيه في درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق.
6) أضف مركب DNA-الليبوزوم إلى الخلايا قطرة قطرة واخلط بلطف.
7) الحضانة عند 37 درجة مئوية، حاضنة 5٪ CO2 لمدة 48-96 ساعة حتى تحليل التعبير الجيني.

نقل الحمض النووي الريبوزي منقوص الأكسجين
إن إجراء تحويل siRNA هو نفس إجراء تحويل DNA، إلا أن محلول Universal-A (الخطوة 3) لا يحتاج إلى الإضافة عند تخفيف siRNA.

الجدول 1 كمية النقل الجيني في أوعية زراعة الخلايا المختلفة (للمرجع فقط)

[ملاحظة] الكمية المستخدمة في الجدول هي للإشارة فقط. يجب تحسين الكمية المحددة من محلول DNA وUniversal-B المستخدم وفقًا لنوع الخلية وظروف التجربة الأخرى. يوصى بالحفاظ على النسبة بين 1:0.5-1:5.