إن مادة D-Luciferin هي ركيزة شائعة لإنزيم لوسيفيراز Luciferase، وهي تستخدم بشكل شائع في جميع أنحاء التكنولوجيا الحيوية، وخاصة في التصوير الحيوي داخل الجسم الحي. وتتلخص آلية العمل في أن مادة لوسيفيرين (الركيزة) يمكن أكسدة لإصدار الضوء في وجود ATP ولوسيفيراز. وعندما يكون هناك فائض من لوسيفيرين، فإن عدد الكميات الضوئية المنتجة يرتبط بشكل إيجابي بتركيز لوسيفيراز (انظر الشكل أدناه). وبعد تحويل الخلايا باستخدام بلازميد يحمل الجين المشفر للوسيفيراز (Luc) وإدخاله إلى حيوانات البحث مثل الفئران والجرذان، يتم حقن لوسيفيرين في الخلايا، ويتم الكشف عن التغيرات في شدة الضوء بواسطة BLI، مما يسمح بمراقبة حالة تقدم المرض أو الفعالية العلاجية للدواء في الوقت الفعلي، على سبيل المثال. ويمكن أيضًا الاستفادة من تأثير ATP على نظام التفاعل هذا للإشارة إلى الطاقة أو العلامات الحيوية بناءً على التغيرات في شدة التلألؤ الحيوي.

يستخدم D-Luciferin أيضًا بشكل شائع في الدراسات المختبرية بما في ذلك تحليل مستوى لوسيفيراز وATP وتحليل الجينات المراسل والتسلسل عالي الإنتاجية واختبارات التلوث المختلفة. يوجد حاليًا ثلاثة أشكال للمنتج في السوق، D-Luciferin (حمض حر)، وملح D-Luciferin الصوديوم، وملح D-Luciferin البوتاسيوم. يتمثل الاختلاف الرئيسي بين هذه المنتجات الثلاثة في خصائص قابليتها للذوبان؛ D-Luciferin (حمض حر) يذوب بشكل ضعيف في الماء وفي أنظمة العازلة، ما لم يكن قابلاً للذوبان في قواعد ضعيفة مثل محاليل NaOH وKOH. يذوب D-Luciferin في شكل أملاح الصوديوم والبوتاسيوم بسهولة وسرعة كبيرة في الماء أو العازلات، وهو سهل الاستخدام، والمذيبات غير سامة، مما يجعله مناسبًا بشكل خاص للتجارب الحية. عند صياغته على شكل سوائل، لا يوجد فرق كبير بين المنتجات الثلاثة لمعظم التطبيقات.

سمات

• لا يوجد إشعاع، وغير ضار تقريبًا بالكائنات الحية.
• التلألؤ الحيوي، لا يوجد مصدر ضوء مثير.
• إنه حساس للغاية، لدرجة أنه يمكنك اكتشافه في بضع مئات من الخلايا.
• اختراق جيد، لا يزال من الممكن اكتشاف عمق الأنسجة 3-4 سم.
• نسبة إشارة إلى ضوضاء عالية، وإشارة فلورية قوية ومقاومة جيدة للتداخل.

التطبيقات

• في تجربة نشوء الورم في الفئران العارية، تمت ملاحظة نمو الورم دون غزو في الوقت الحقيقي، دون قياس تجريد الورم.
• لاختبار تأثير الإدارة على نمو الورم أو نقائله، يمكن إزالة ركيزة الفلوريسين تمامًا في غضون 3 ساعات، دون التدخل في تجربة الدواء.
• تم الكشف عن توطين وتوزيع الخلايا الغريبة في الحيوانات.
• يتم دمج الجين المستهدف أو المحفز للجين المستهدف مع جين لوسيفيراز للكشف عن التغيرات في التعبير الجيني أثناء العلاج الدوائي أو تطور المرض.
• مراقبة عملية زراعة الخلايا الجذعية وبقائها وانتشارها، وتتبع توزيع الخلايا الجذعية وهجرتها داخل الجسم الحي.

تحديد

عناصر

الشحن والتخزين

يتم نقلها في أكياس ثلج؛ يتم تخزينها في درجة حرارة -20 درجة مئوية جافة ومحمية من الضوء؛ صالحة لمدة 1 سنة.

الأرقام

وثائق:

ورقة بيانات السلامة

الدليل

الاستشهادات والمراجع:

[1] Ji C, Zhao M, Wang C, et al. Biocompatible Tantalum Nanoparticles as Radiosensitizers for Enhancing Therapy Efficacy in Primary Tumor and Metastatic Sentinal Lymph Nodes [نُشر على الإنترنت قبل الطباعة، 6 يونيو 2022]. ACS Nano. 2022؛ 10.1021/acsnano.2c02314. doi:10.1021/acsnano.2c02314(IF:15.881)
[2] Miao Z، Tian W، Ye Y، وآخرون. Hsp90 يحفز موت الخلايا الدبقية الحديدي المعتمد على Acsl4 عن طريق إزالة الفسفرة من Ser637 في Drp1. Cell Death Dis. 2022؛13(6):548. نُشر في 13 يونيو 2022. doi:10.1038/s41419-022-04997-1(IF:8.469)
[3] Zhang L, Sun Y, Zhang XX, et al. Comparison of CD146 +/- mesenchymal stem cells in improve early ovarian failure. Stem Cell Res Ther. 2022;13(1):267. Published 21 Jun 2022. doi:10.1186/s13287-022-02916-x(IF:6.832)
[4] Fu RJ، He W، Wang XB، وآخرون. فرط ميثيل عامل Krüppel-like 5 المدعوم من DNMT1 يشارك في تطور سرطان الخلايا الكلوية الصافية.Cell Death Dis. 2017؛8(7):e2952. نُشر في 27 يوليو 2017. doi:10.1038/cddis.2017.323(IF:5.965)
[5] Xu P، Wu L، Cao M، وآخرون. تحديد مكونات مجمع MBW المتورطة في التخليق الحيوي للفلافونويدات في الفراولة البرية. Front Plant Sci. 2021؛12:774943. نُشر في 8 نوفمبر 2021. doi:10.3389/fpls.2021.774943(IF:5.754)
[6] Bai S، Tao R، Yin L، وآخرون. بروتينان من نوع B-box، PpBBX18 وPpBBX21، ينظمان بشكل عدائي تخليق الأنثوسيانين من خلال الارتباط التنافسي مع Pyrus pyrifolia ELONGATED HYPOCOTYL 5 في قشر ثمار الكمثرى. Plant J. 2019؛ 100(6): 1208-1223. doi:10.1111/tpj.14510(IF:5.726)
[7] Yang SX، Wu TT، Ding CH، Zhou PC، Chen ZZ، Gou JY. SAHH وSAMS يشكلان معقد مانح للميثيل مع CCoAOMT7 لمثيلة المركبات الفينولية. Biochem Biophys Res Commun. 2019؛ 520 (1): 122-127. doi: 10.1016 / j.bbrc.2019.09.101 (IF: 2.705)