Fig. 1 HAN farvning resultater af DSS spids colitis afsnit

2. Zebrafisk modellering

1) Zebrafisk embryoner var dyrket i E3 embryomedium indeholdende methylblåt på 28,5 ℃ indtil 1 dpf;

2) 0,5 % DSS drikke vand var konfigureret med E3 medium og så filtreret igennem -en 0,22 μm filter membran;

3) Zebrafisk var behandlet med 0,5 % DSS fra 3 dpf til 6 dpf.

4) Eksperimentel resultater: alle 0,5 % DSS lægemiddelbehandlinger resulterede i mørklægning af zebrafisk lever farve og inflammatorisk stress.

Fig. 2 DSS forårsager en inflammatorisk reaktion i zebrafiskens lever

3.Svinestøbning

1) Fire til fem dag gammel Yorkshire smågrise, eksperimentel gruppe: perfunderet med DSS, kontrollere gruppe: perfunderet med saltvand

2) Dagligt indtag af 1,25 g DSS/kg om pattegrise, infunderet for 5 dage

3) Eksperimentel resultater: Efter inddrypning af DSS, de plasma D-mannitol optagelse sats af de eksperimentel gruppe var væsentligt højere end at af de kontrollere gruppe, angiver at de smågrise viste symptomer af enteritis synlig til de nøgen øje.

Fig. 3 DSS inducerede højere koncentration af D-mannitol i smågrise end i kontroller

4.Drosophila modellering

1) 5- til 10 dage gamle Drosophila-hun blev anbragt i et tomt hætteglas indeholdende 2,5 x 2,5 x 1 cm hætteglas i kultur med 3,75 cm kromatografipapir (Fisher)-fødemedie fugtet med 5% saccharoseopløsning;

2) Fodermedier indeholdende forskellige komponenter blev fremstillet separat med 5 % saccharoseopløsning, og kategorierne omfattede 3 % DSS hver og 25 μg/ml bleomycin;

3) Drosophila blev anbragt i kolber indeholdende kromatografipapir og inkuberet ved 29°C i tre dage, i løbet af hvilket tidsrum de overlevende Drosophila blev overført dagligt til tomme kolber indeholdende frisk medium;

4) Eksperimentelle resultater: DSS har en dødelig funktion, og DSS inducerer proliferation af ISC-precursorceller.

Fig. 4 DSS inducerer proliferation af ISC-precursorceller i Drosophila

IV. Hvordan til vurdere de succes af modellering?

1. Sygdomsaktivitet Indeks (DAI score)

Tre aspekter var vurderet og scoret: vægt, fækal konsistens, og fækal okkulte blod, og de DAI score var de sum af de tre indikatorer.

Tabel 2 DAI-scoringsregler

score (af elevens arbejde)	Procent af vægt tab	fækal viskositet	fækal okkult blod
0	0	normalitet	negativer
1	1-5 %	blød afføring	lyseblå
2	5-10 %	slimlignende afføring	blå (farve)
3	10-20 %	løs, flydende afføring	Dyb blå
4	＞20 %	/	Blodig afføring for det blotte øje

2.Scoring af histologisk ændringer

Histologisk ændringer var scorede som de sum af de over, og lymfe node dannelse var ikke scorede i de spids colitis model. Standardmetoden til histologisk analyse var HE-farvning (Cat. NO: 60524ES60).

Tabel 3 Histologiske ændringerscores

score (af stud nt's arbejde )	Sår (antal)	Epitel celleforandringer	inflammatorisk infiltrat	Lymfeknuder (nej.)
0	0	Normal	Ingen	Ingen
1	1	Fravær af skålede celler	Perikryptal infiltration	1
2	2	Stor sletning af skålede celler	Infiltration af de muskuløs lag af de slimhinde	2
3	3	krypt fossa	Generaliseret infiltration af muskuløs lag af de slimhinde med fortykkelse af slimhinden	3
4	＞3	Stort fravær eller polypoid regenerering af krypten fossa	submucosal infiltration	＞3

3. Kolon længde

Tyktarm længde afkortning var påviselig på dag 8 i de spids colitis model; det var mere udtalt i de kronisk colitis model.

4. Sammenfatning

DSS UC dyr model konstruktion skulle være foregået ved fortest til føle de modellering forhold, og det er anbefales at der udføres prætests med 8-10 prøver i hver gruppe, og der skal oprettes en kontrolgruppe. Normalt udseendet af vægttab, løs afføring, diarré, blodig afføring eller fækalt okkult blod, sårdannelse kan betragtes som DSS-lægemidlet er effektivt og modelleringen er vellykket.

VI.Yeasen DSS Modellering Sag Studere

Yeasen DSS (Kat. Ingen: 60316ES, MW:36000~50000) er bredt brugt i de konstruktion af UC modeller. Yeasen

DSS kan med succes bygge UC-modeller med resultater, der kan sammenlignes med importerede mærker.

Objektiv: Til sammenligne de grad af forandring i legeme vægt af mus påvirket ved DSS-induceret spids colitis fra anderledes producenter.

Mus type: BALB/c mus ;

Modellering protokol: 2 % DSS koncentration, sammenhængende frit flow drikke for 1 uge.

Konklusion: De tendens af legeme vægt tab induceret ved Yeasen DSS i mus var konsekvent med at af de importeret mærke.

Og vi fundet at de spids colitis modellering tid er hovedsagelig koncentreret i om 7 dage, de effekt er meget væsentlig. De følgende tabel er datafeedback fra nogle kunder.

Tabel 4 Modellering af forskellige typer af enterocolitis med DSS

Skimmelsvamp	Skabelon	Støbning Løsninger	Støbning resultater	Udtalelser
akut colitis	BALB/c mus, kvinde, 6-8 uger, 25 g	3%-5% DSS for 7 dage af sammenhængende fritflydende forbrug	Dag 5 præsentation med forkortet tyktarm længde, HE-farvning og markeret betændelse	Hurtig modelleringshastighed og kort tid. Er i overensstemmelse med egenskaber af de spids colitis model
	C57BL/6 mus, han, 8 uger, 20 g	3%-5% DSS ved sondemad, løbende administration	Dag 5 nuværende, forkortet tyktarm længde, vægttab, blod i afføringen, diarré	Høj modellering sats og kort tid. Konsekvent med spids colitis modellens egenskaber
kronisk colitis	C57BL/6 mus, han, 8 uger, 22 g	1-2 % DSS ved gavage, løbende administration	Dag 40 nuværende, forkortet tyktarm længde, vægt tab, blod i afføring, diarre	Høj modellering sats. Overensstemmende, med kronisk colitis model egenskaber
Tyktarmskræft	C57BL/6 mus, han, 8 uger, 21 g	1%-2% DSS frit tilgængelig for 5 dage for 3 uger	14 uger Nuværende, forkortet tyktarm længde, vægttab, HE-farvning, betændelse indlysende	Høj modellering sats. Konsekvent med tyktarmskræftmodel egenskaber

Produktegenskaber:

1. Symptomerne er høje lignende til dem af human UC: det kan være brugt til studere de mekanisme af colitis og farmakodynamisk undersøgelser.
2. Højskimmeldannelse pris: gratis drikke DSS vandig løsning, enkel og let,
3. canconstructa sort af colitis modeller: spids colitis, kronisk colitis, kan også være kombineret med AOM til konstruere colitis- associeret cancer (CAC) model.
4. Den er egnet til de modellering af mange slags af dyr: mus, rotter, zebrafisk, grise, frugt fluer og så
5. høj sikkerhed:DSS kan være forringet ved de naturlig økosystem, sikker for de miljø; 6, høj renhed: høj renhed (98%), svovlindhold 17-19%;

VII. Ofte stillede spørgsmål

Om spids DSS colitis model eller kronisk DSS colitis model, de sværhedsgrad og succes af enteritis er relateret til mus arter (forskellige genetiske baggrunde), DSS-koncentration og doseringscyklus.

Tabel 5 Ofte stillede spørgsmål til DSS colitis modellering

Mulige problemer	Mulige årsager	Foreslået løsninger
Høj dødelighed i mus	DSS koncentration også høj	Reduceret koncentration af DSS administration
Mus med ingen eller lav tegn af enteritis	DSS koncentration også lav	Forhøjet DSS dosering koncentration; reduceret cyklus interval (10- 14 dage)
I det samme gruppe af mus, den symptomer af enteritis varieret meget	Tilstoppet hætte	Check muse drikkeflasker dagligt

VIII.Produkt Bestilling

Produktnavn	Katalognummer	Specifikation
ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000	60316ES25	25 g
ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000	60316ES60	100 g
ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000	60316ES76	500 g
ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000	60316ES80	1 kg
Hæmatoxylin- og eosinfarvningssæt Hæmatoxylin Eosin (H&E) farvesæt	60524ES60	2 x 100 ml

Modellering af akut pancreatitis hos dyr

Caerulein er -en gastrisk regulerende molekyle funktionelt og kompositionsmæssigt lignende til kolecystokinin (CCK) at stimulerer mave-, galde- og bugspytkirtelsekretion. Rainfrogin kan bruges til at studere signalveje medieret af NF-KB opreguleret proteiner såsom Intercellular Adhesion Molecule (ICAM-1), inflammationsrelaterede faktorer såsom NADPH oxidase og Janus kinase. Og det er med succes blevet brugt til etablering af akut pancreatitis (AP) modeller hos rotter, mus, hunde og syrisk hamstere.

Fordel ved støbning:

1. nem betjening
2. lavere omkostninger
3. hurtig prototyping
4. flere tilstande af medicin levering

Modelleringsmekanismer:

1. Opregulering af intercellulært vedhæftning molekyle (ICAM-1) udtryk i bugspytkirtel alveolær celler ved stimulerende intracellulært NF-KB. Overflade ICAM-1 fremmer igen neutrofil adhæsion til alveolære celler og øger derved pancreas inflammatorisk effekter;
2. Fremkalder spankreatitis ved inducerende dysregulering af fordøjelseskanalen enzym sekretion og cytoplasmatisk vakuolisering førende til død af alveolære celler og bugspytkirtelødem;
3. Aktivering af betændelsesfremmende faktorer.

Relateret Reagenser

Yeasen giver decapeptid molekylær form, renhed ≥97% (HPLC) regnfrø; høj støbningseffektivitet, gunstig pris, spotudbud.

Produktnavn	Katalognummer	Specifikation
Caerulein	60321ES03	1 mg
DMSO dimethylsulfoxid (cellekulturkvalitet)	60313ES60	100 ml

Diabetes sygdomsmodellering

Streptozocin (STZ) er et antitumorantibiotikum fremstillet af en bestemt type Streptomyces-svamp, Aureobasidium pullulans, og kan også syntetiseres. Det bruges ofte til behandling af bugspytkirtelkræft. Samtidig har STZ en selektiv destruktiv effekt på bugspytkirtlens ø-β-celler fra visse dyrearter og kan inducere diabetes hos mange dyr, generelt ved at bruge rotter og mus til at skabe dyremodeller. Det er blevet bredt undersøgt i anti-leukæmi, DNA-methylering og anti-nefritis.

1.1 Klargøring af dyr

Prøv at bruge handyr, hunner indeholder hormoner, der påvirker modelleringseffektiviteten. Nogle undersøgelser har vist, at hundyr har dårlige modelleringsrater og kan opleve højere dødelighedsrater end hanner, især for type I.

Type I-diabetes (Type I-diabetes) kan generelt vælges i henhold til kropsvægten, anbefalet 170-200g til rotter og 17-22g for mus, og modelleringshastigheden er relativt ideel, når STZ injiceres i faste efter 1~2 ugers adaptiv fodring.

Til type II-diabetes udvælges rotter (f.eks. SD/Wistar) ved 4-5 ugers alderen, med en vægt på 90-100 g, og fodres med højt fedtindhold (højt sukkerindhold) i 4-6 uger for at nå en kropsvægt på omkring 240-280 g. For mus (f.eks. C57/ICR/Kunming) udvælges mus ved 4-5 ugers alderen, der vejer 16-20 g, og fodres med højt fedtindhold (højt sukker) diæt i 4-6 uger for at nå en kropsvægt på ca. 30-35 g. For nyindkøbte dyr eller de, der skifter fodermiljø, skal de fodres med almindelige diæter i en uge, før de vælger den passende alder/vægt for at skifte til foder med højt fedtindhold (højt sukkerindhold). For mus (f.eks. C57/ICR/Kunming-mus) skal du vælge 4-5 uger gamle, der vejer 16-20 g, og fodret med højt fedtindhold (højt sukker) diæt i 4-6 uger for at nå en kropsvægt på omkring 30-35 g. For nyindkøbte dyr eller ændring af fodermiljø er det nødvendigt at fodre dyrene tilpasset med normal diæt i en uge, og derefter vælge den passende ugentlig alder/kropsvægt dyr og skifte til foder med højt fedtindhold og højt sukkerindhold. Med hensyn til modelleringssucces anbefales SD til rotter og C57 til mus.

1.2 Fodring før støbning

Fodring før modellering, type I diabetes model er relativt hurtig, normalt kan rotter begynde at modellere efter 2 ugers adaptiv fodring på normalt foder; type II-diabetesmodel: kost induktion med højt fedtindhold plus en lille dosis STZ. foder med højt fedtindhold (højt sukkerindhold) blev fodret før modellering, hvilket inducerede insulinresistens.

1.3 Forberedelse af reagenser

① Højt fedtindhold (højt sukkerindhold) feeds

Højt fedtindhold (højt sukkerindhold) foder ingredienser: indeholder 10 % saccharose, 10 % svinefedt, 5 % kolesterol

Højt fedtindhold og højt sukkerindhold feeds var lavet ved kombinere grundlæggende rotte foder med saccharose, kondenseret svinefedt og æg æggeblomme i de følgende masseforhold: 18 % spæk, 20 % saccharose, 3 % æggeblomme og 59 % basisfoder.

② Forberedelse af STZ opløsningsmiddel - natrium citrat buffer

Forberedelse af Flydende EN og Flydende B: Veje 2,1 g af citronsyre syre (FW:210.14) og tilføje det til 100 ml af dobbeltdestilleret vand at lave Væske A. Vejer 2,94 g af natriumcitrat (FW:294.10) og tilsæt det til 100mL dobbeltdestilleret vand at lave væske B.

Forberedelse af natrium citrat buffer: Blande EN og B flydende i -en bestemt del (1:1,32 eller 1:1), pH måler til bestemme de pH-værdi, juster pH-værdien til 4,2-4,5, det vil sige den nødvendige natriumcitratbuffer.

1.4 Forberedelse før indsprøjtning

Før forberedelse STZ indsprøjtning, STZ frysetørret pulver var placeret i -en tørre steriliseret hætteglas, indpakket eksternt med aluminium folie eller stanniol, forkølet i en is bad med natrium citrat buffer, og bragte til dyr værelse til backup.

Note: Efter fjernelse de STZ frysetørret pulver fra -20°C køleskab, forlade det tør og beskyttet fra lys kl værelse temperatur i ca 10 min at tillade det til at tø op helt (meget vigtigt).

1.5 Forberedelse af injektionsopløsning

Rotter var vejes og blod glukose koncentrationer var målt efter natten over faste (ingen vand). Rotter var grupperet for at forberede STZ-injektionen i henhold til antallet af dyr og den dosis, der skal injiceres. Opløs STZ ved 1 % koncentration (w/V), filtrer og steriliser, idet man husker på, at STZ er fuldstændig opløst.

Opmærksomhed:

①STZ er ustabil og let til inaktivere, de tilbage reagens efter hurtig vejning stadig kræver tørring og lys beskyttelse, og det anbefales at pakke det ind med tørt aluminiumsfolie (eller stanniol) papir.

②Hvis du er ikke dygtige i indsprøjtning, gør ikke opløse de STZ på en tid, og det er anbefales at du opløse de STZ i grupper, såsom 10 eller 15 rotter/gruppe, afhængigt af dit færdighedsniveau.

③Den STZ kan også være vejes på forhånd og udleveres i de påkrævet beløb for dyregruppering.

1.6 Injektion

Injicer intraperitonealt eller kaudal vene i henhold til dyrets fastende kropsvægt.Hvis injektionsoperationen teknik er ikke dygtig, to grupper skulle være injiceret skiftevis, og de indsprøjtning skulle være afsluttet inden for 30 minutter. Bemærk: De fleste af injektionerne kræver hurtig injektion.

Opmærksomhed:

Type I diabetes model: rottedosis 70-65mg/kg

Type II diabetiker model: Rotter fodres med høj sukker og høj fedt til 1-2 måneder var behandlet med STZ på -en dosis på 25-40 mg/kg.

1.7 Efter indsprøjtning

Efter injektionen af ​​STZ skal dyrene have nok vand og mad (diabetikeres grundlæggende livsegenskaber rotter), og de sengetøj behov til være ændret daglig til holde de bur tørre. Når fodring, tage omsorg til undgå stærk sollys. Sterilisere så ofte som muligt.

Note: Efter STZ modellering, udsving i tilsyneladende blod glukose niveauer vise 3 tidsmæssigt faser, forbigående hyperglykæmi (1- 2 timer), forbigående hypoglykæmi (6-10 timer) og vedvarende hyperglykæmi (>72 timer). Insulin og glukose skal være passende suppleret.

2.Indikatorer for vurderer de modellering effekt af STZ-induceret diabetes modellering

De følge indikatorer var talt i sammenligning med de kontrollere gruppe:

1. Generelle indikatorer: fænomen af overdreven drikker, spise og vandladning, og vægt tab;
2. Andre indikatorer: faste blod glukose, faste serum insulin niveau, serum insulin niveau, insulin følsomhed, glukose tolerance og så videre;
3. Serumbiokemiske indikatorer: T-cho, TG, HDL-C, LDL-C, CR, BUN, Alt osv.
4. Patologiske skred: histopatologisk dias af de bugspytkirtlen

3.Forklaring af de årsager for de fiasko af de STZ-induceret diabetes model

1. 1. kvaliteten af ​​STZ er den nøglen, den renhed af STZ for modellering skal være ikke mindre end 98 % (HPLC-test).
2. 2. STZ-fejl: bør opbevares tørt, undgå fugt. Undgå langvarig placering af pulveret ved stuetemperatur. Opløst STZis meget ustabil, med -en halveringstid af 15 minutter på neutral  Betale opmærksomhed til opløse STZ med surt pH, helst i en is bad.
3. Om eller ej intraperitoneal injektion er sprøjtes ind i tarmene og andre organer.

Hvis de model er ikke op til standard, det er anbefales at, hvis de model er ikke op til standard, det skulle være geninjiceres for en anden 3 dage.

4. Forklaring af de årsager af STZ-induceret høj dødelighed i mus/rotter

4.1.De rotter vægt er også lav;

4.2. Nok drikke vand skal være garanteret (utilstrækkelig drikke vand kan nemt føre til døde rotter).

4.3. Højt blodsukker og lavt blodsukker vil forårsage døde rotter, undgå at døde rotter kan injiceres af insulin eller midlertidigt sukker tilskud, to måder: ① Almindeligvis høj blod sukker. Insulin tilskud metode, supplement nogle medium virkende insulin. Giv for eksempel Novolin N eller NPH (neutralt fiskeprotein zink insulin), 2-3 enheder hver gang, efter 3-5 dage, den generelle dødeligheden for rotter vil være lav; ②sukkertilskudsmetode, efter fastende rotter, har injektionen været i en hypoglykæmisk tilstand, kan støbning af 4 timer efter den intraperitoneale injektion af 20% glucose undgås på grund af injektion af hypoglykæmi død af rotter;

4.4. Forhindre dyr fra drab hver andre. Mangel af mad og utilstrækkelig vand levere vilje rive hver andre bortset og nippe på deres egen slags, så mad og vand bør tilføres i tilstrækkelige mængder, helst på to måder.

4.5.Forebygge infektion. Diabetiker rotter urinere -en masse, de sengetøj er fugtig og behov til være ændret ofte, så diabetiker rotter er mere tilbøjelige til infektioner end andre rotter, især urinvejsinfektioner og abdominale infektioner. Før og efter invasiv operationer såsom intraperitoneal injektion, subkutan injektion og blodsukkeropsamling, bør man være opmærksom på sterilisering. For eksempel, tetracyclin (eller gentamycin oftalmisk salve) kan være anvendt lokalt til behandle de sår til forhindre infektion efter hver blodsukkeropsamling.

5. Faktorer påvirker diabetes modellering

De faktorer, der påvirker diabetessygdomsmodellering, omfatter kvaliteten af ​​STZ-modelleringsreagenser, dyrenes tilstand og administration metode. Blandt dem, de vigtigste ejendomme af de reagenser er renhed, stabilitet, opløselighed egenskaber, osv. De dyrs tilstand omfatter hovedsageligt genetisk baggrund, han- og hunkøn, køn, kropsvægt, fodermiljø, kost struktur osv., og administrationsmåden omfatter administrationstid, administrationsinterval og administrationsvej. Differentierede faktorer medfører differentierede modelleringseffekter.

6. De STZ modellering metode ideer sorteret ud

Standardisering af de påvirke faktorer er -en garanti af opnår de modellering formål og modelleringsstabilitet. Teoretisk set, alle dyremodellering eksperimenter kræver foreksperimentering.

I tilfælde af STZ-induceret diabetesmodel, bør dosis af STZ henvise til resultaterne af fortestene og forsøge ikke at blindt følg doseringen i litteraturen eller andre til at bruge direkte, som den gennemsnitlige vægt af rotter og fastende (lav glukosetilstand) modstand, længden af ​​fasten, tidspunktet for injektioner, såvel som den tidligere fodringsproces, tidspunktet for glukose måling, og så på, er anderledes, og det er de mest videnskabelig til bestemme de dosering målinger i overensstemmelse med deres egne forsøgsmus gennem fortestene. Den mest videnskabelige måde er at bestemme doseringen af ​​lægemidlet ved præ-testning.

7.Høj Modellering Succes Sats STZ Brug Retningslinier

STZ bevarelse, opløsning, udlevering og andet forholdsregler vedr bruge, se de officiel hjemmeside af relevante reagenser.

8. Produkter

Høj succesrate: renhed ≥98 % (HPLC bestemmelse); stabil kvalitet, omkostningseffektiv, spot forsyning, eftersalg garanti.

Produktnavn	Katalognummer	Specifikation
Streptozocin	60256ES60/76	100/500 mg
Streptozocin	60256ES80	1g
Citronsyre, Monohydrat Citronsyre Monohydrat	60347ES25	25 g
Citronsyre trinatriumsalt, dihydrat	60348ES25	25 g

(For mere information på de bruge af STZ støbning, behage check de særlig artikel på yeasen hjemmeside)

Produkt Linje Udgivet Artikler (delvis)

[1] Li, , Dong, J., Xiao, H., Zhang, S., Wang, B., Cui, M., & Fan, S. Gut kommensal afledt baldriansyre beskytter mod strålingsskader. Tarmmikrober,.2020 .1-18. IF=10,245

[2] Wang Y, Jia M, Yan X, et al. Øget neutrofil gelatinase-associeret lipocalin (NGAL) fremmer ombygning af luftvejene ved kronisk obstruktiv lungesygdom[J]. Clinical Science, 2017, 131(11): 1147-1159. IF=6,124

[3] Su J, Sun H, Meng Q, et  Forbedret blodsuspensibilitet og laseraktiveret tumorspecifik medikamentfrigivelse af theranostiske mesoporøse silicananopartikler ved funktionalisering med erytrocytmembraner[J]. Theranostics, 2017, 7(3): 523. IF=11.556

[4] Wu J, Lv Q, He J, et al. MicroRNA-188 undertrykker G 1/S-overgang ved at målrette mod flere cyclin/CDK-komplekser [J]. Cell Communication and Signaling, 2014, 12(1): 66. IF=5.712

[5] ZhangT Q, Wang J  Shoot Regenerative Capacity Assays in Arabidopsis and Tobacco [J]. Plantecellen, 2015. IF=10,69

[6] YaoC, Ni Z, Gong C, et  Rocaglamid øger NK-cellemedieret drab af ikke-småcellede lungecancerceller ved at hæmme autofagi[J]. Autophagy, 2018, 14(10): 1831-1844. HVIS=16.016

[7] FanH, Chen W, Zhu J, et  Toosendanin lindrer dextransulfat natrium-induceret colitis ved at hæmme M1 makrofagpolarisering og regulere NLRP3 inflammasom og Nrf2/HO-1 signalering[J]. International immunopharmacology, 2019, 76: 105909. IF=4,932

[8] Gao X, Fan W, Tan L, et al. Sojaisoflavoner forbedrer eksperimentel colitis ved at målrette ERα/NLRP3-inflammasomveje[J]. The Journal of Nutritional Biochemistry, 2020, 83. IF=6,048

Reumatoid arthritis modellering

Reumatoid arthritis (RA) er en kronisk inflammatorisk ledsygdom karakteriseret ved vedvarende synovitis, systemisk inflammation, ledsaget af knogle- og bruskerosion, som i sidste ende kan føre til ledankylering og deformitet.

Freunds Adjuvans blev opfundet af Jules Freund i 40'erne af det 20. århundrede, som er en antigenemulsion, der blander en lige stor mængde antigenvandopløsning med en olie og derefter tilsætter en emulgator for at lave vand-i-olie, som er den mest almindeligt anvendte adjuvans i dyreforsøg. Freunds adjuvans er opdelt i Complete Freunds adjuvans (CFA) indeholdende Mycobacterium tuberculosis og Incomplete Freunds adjuvans (IFA) uden Mycobacterium tuberculosis, som hovedsageligt bruges til at inducere kollagen-induceret arthritis CIA-model og adjuvans-induceret arthritis.

1. Kollagen-induceret arthritis (CIA) modelleringstrin (kun til reference)

1) Forbered relevante reagenser, vær opmærksom på opsætning af forsøgsgruppen og kontrolgruppen.

2) Bovin type 2 kollagen (CII.) blev opløst i iseddikesyreopløsning ved en koncentration på 2 mg/ml ved 4°C natten over.

3) Freunds ufuldstændige adjuvans blev suppleret med inaktiveret Mycobacterium tuberculosis i en koncentration på 2-5 mg/ml for at fremstille Freunds komplette adjuvans. Koncentrationen af ​​Mycobacterium tuberculosis i 60718ES Freunds komplette adjuvans leveret af Yisheng Biotech var mindre end 10 mg/ml.

4) Bovin collagen type 2 (CII.) eddikesyreopløsning blandes med en lige stor mængde af Freunds komplette adjuvans og emulgeres.

5) Subkutan injektion af 0,1-0,2 ml på bagsiden af ​​hver forsøgsmus.

6) Efter 3 uger blev den samme mængde Fund inkomplet adjuvans blandet med bovin collagen type 2 (CII.) eddikesyreopløsning og emulgeret, og hver mus blev injiceret subkutant ved halebunden i i alt 0,1-0,2 ml.

7) Patologisk undersøgelse: mus i forsøgsgruppen og kontrolgruppen blev fjernet, 4% formaldehyd blev fikseret i mere end 48 timer, 5% nitrat afkalket i 2 timer, xylen infiltreret og paraffin indlejret. Snit blev lavet, HE-farvning og observeret med konventionel lysmikroskopi.

2. Adjuvans-induceret arthritis (AA) modelleringstrin (kun til reference)

1) Forbered relevante reagenser, vær opmærksom på opsætning af forsøgsgruppen og kontrolgruppen.

2) Observationsjournal: Generelt, 7-12 dage efter den anden immunisering, har mere end 80 % af musene gigtsymptomer.I henhold til rødme, hævelse og aktivitet af musenes leddele blev de kliniske symptomer graderet, og observationsregistreringerne blev observeret før forsøget og henholdsvis 3., 5., 7. og 12. dag efter forsøget, og karakterklassifikationsreferencen er som følger:

Karakterindeks	Symptom
0	Aktiviteten er normal, ingen tegn på erytem og hævelse
1	Normal aktivitet, rødme af huden, men ingen væsentlig hævelse
2	Aktiviteten er let påvirket, og der er rødme og hævelse i poter og fødder eller knæled
3	Aktiviteten påvirkes, og poterne, tæerne eller knæene er let deforme, røde og hævede
4	Nedsat bevægelse, alvorlig rødme og hævelse af tæer eller knæ på fødderne, kløer, tæer eller knæ og stivhed eller deformitet

3) Musemåling: Volumenet af bagbensled på mus før og efter eksperimentet blev målt ved hjælp af en museklofods volumenmåler, og volumenet af knæleddene på bagbenene på hver mus blev målt under ca. 5 mm, gentaget tre gange, gennemsnitsværdien blev registreret, og testen blev udført en gang hver tredje dag.

4) Patologisk undersøgelse: mus i forsøgsgruppen og kontrolgruppen blev fjernet, 4% formaldehyd blev fikseret i mere end 48 timer, 5% nitrat blev afkalket i 2 timer, xylen blev infiltreret, og paraffin blev indlejret. Snit blev lavet, HE-farvning og observeret med konventionel lysmikroskopi.

3.Ofte stillede spørgsmål

Problemer, der kan opstå	Svar
Hvad er forskellen mellem 60718ES Freund's Complete Adjuvans (CFA) og 60719ES Freund's Incomplete Adjuvans (IFA)?	Freunds komplette adjuvans (CFA) indeholder varmedræbte, inaktiverede Mycobacterium tuberculosis baciller, der stimulerer et stærkt immunrespons; Freunds ufuldstændige adjuvans (IFA) mangler Mycobacterium tuberculosis og stimulerer et svagere immunrespons.
Hvad er den specifikke mængde BCG i 60718ES Freunds komplette adjuvans (CFA)?	BCG-indholdet er mindre end 10 mg/ml.
Hvordan vælger man Freunds komplette adjuvans (CFA) og Freunds ufuldstændige adjuvans (IFA) når det bruges til reumatoid arthritis dyremodellering?	Fordi rotter generelt er mere følsomme end mus, behandles mus generelt med CFA, og rotter kan også behandles med IFA, men CFA vil blive bedre brugt.

Relaterede produktanbefalinger

Klassificer	Produktnavn	Katalognummer	Specifikation
Reumatoid arthritis model	Komplet Freunds adjuvans (CFA)	60718ES	10 mL/5x10 mL
	Freunds ufuldstændige adjuvans (IFA)	60719ES	10 mL/5x10 mL

Hypertensiv modellering

Hypertension er karakteriseret ved forhøjet systemisk arterielt blodtryk (systolisk og/eller diastolisk blodtryk), som viser sig i systemisk arterielt blodtryk (systolisk blodtryk≥ 140 mmHg og/eller diastolisk blodtryk ≥90 mmHg), som er den mest almindelige kroniske sygdom og den vigtigste risikofaktor for hjerte-kar- og cerebrovaskulære sygdomme, og er ofte ledsaget af kliniske syndromer med funktionelle eller organiske skader på hjerte, nyre, hjerne og andre organer. Studiet af forebyggelse og behandling af hypertension er af stor praktisk betydning, og etableringen af ​​dyrehypertensionsmodel er en vigtig del af studiet af hypertension.

Dyrehypertensionsmodeller kan opdeles i genetisk relaterede modeller og ikke-genetisk relaterede modeller. Genetisk relaterede modeller inkluderer arvelige og gensplejsede dyremodeller, mens ikke-genetisk relaterede modeller generelt refererer til modeller induceret af miljømæssige, kirurgiske og lægemiddelfaktorer. Forskningsemnerne for modellering omfatter generelt grise, får, kaniner, hunde, mus og rotter osv., men de fleste af eksperimenterne er modelleret i mus og rotter, og de almindeligt anvendte dyrehypertensionsmodeller er SHR-modellen for spontane hypertensive rotter og den lægemiddelinducerede hypertensionsmodel.

1. Dyrearvelig hypertensionsmodel

1.1 SHR-model af spontant hypertensive rotter

Spontane hypertensive rotter, også kendt som SHR-rotter, har en forekomst af hypertension på næsten 100 % og er de mest udbredte dyremodeller. Normale rotters systoliske blodtryk er 110-120 mmHg, og blodtrykket hos SHR-rotter begynder at stige efter 4-6 ugers alderen, og blodtrykket er helt op til mere end 200 mmHg efter avl.

Fordele: Forekomsten af ​​hypertension er høj, sygdomsforløbet er kort, og de patologiske ændringer i målorganerne under debut kan observeres.

Ulemper: Avlscyklussen er lang, fodringsforholdene stiller visse krav, og prisen er lidt dyrere end almindelige rotter.

1.2 SHRsp-model af slagtilfælde-tilbøjelige spontane hypertension-rotter

Rotter med spontan hypertension, også kendt som SHRsp-rotter, har en forekomst af hypertension på næsten 100 % og slagtilfælde på næsten 80 %. Blodtrykket hos SHRsp-rotter begyndte at stige efter 4-6 ugers alderen og kunne nå 200 mm Hg efter 10-15 ugers alderen.

Fordele: Forekomsten af ​​hypertension er tæt på 100 %, og forekomsten af ​​slagtilfælde er 80 %, hvilket er en ideel dyremodel til forskning i slagtilfælde.

Ulemper: lang dyrkningscyklus, besværlig genetisk avl, let at mutere, brud.

2. Lægemiddelinduceret hypertensionsmodel

2.1 Angiotensin II (AngII.) induktion

2.1.1 Eksperimentelle metoder (kun til reference)

Hanmus i alderen 8-12 uger blev injiceret med angiotensin II og normalt saltvand ved osmotisk pumpe subkutan injektion, og dosen af ​​AngII var generelt 100 ng/(kg·min) i 2-4 uger. Administrationstiden kan forkortes eller forlænges tilsvarende alt efter den aktuelle situation.

2.1.2 Eksperimentelle billeder (uddrag fra litteraturen)

Anvendelse 1: Angiotensin II. mus fodret med NaCl-opløsning i 28 dage, forsøgsgruppen sammenlignet med kontrolgruppen, steg blodtrykket betydeligt.

Fig.5 Ændringer i blodtryk og hjertefrekvens hos mus (A er systolisk blodtryk, B er gennemsnitligt blodtryk, C er diastolisk blodtryk, D er hjertefrekvens)

2.2 Deoxycorticosteronacetat (DOCA) induktion

Deoxycorticosteronacetat (DOCA) kan hæmme renin-angiotensin-systemet, hvilket resulterer i lav plasma-reninaktivitet, og derved mediere en stigning i blodtrykket, generelt ved at implantere en subkutan DOCA-depotpumpe eller injicere DOCA og tilføje NaCl-opløsning for at inducere dannelsen af ​​hypertension.

Den er hovedsageligt anvendelig til forskning i renin-angiotensin-systemet (RAS) og vand- og natriummetabolisme ved hypertension, og modellen kan få blodtrykket til at stige stabilt, og metoden er enkel.

2.2.1 Eksperimentelle metoder (kun til reference)

Den venstre nyre på 250-275 g normale hanrotter blev resekeret, og gummimediet lavet af DOCA og silicagel blev placeret under huden mellem skulderbladene på begge sider af rotten, eller efter at venstre nyre var fjernet, blev DOCA injiceret subkutant med 50 mg/(kg·d) pr. dag, og det skulle ikke drikkes med NaCl 1-opløsning fodringsprocessen, og rotternes blodtryk blev målt efter 3-5 ugers drift.

2.2.2 Eksperimentelle billeder (uddrag fra litteraturen)

Anvendelse 1: Efter at den unilaterale nyre var fjernet, blev DOCA tilsat, og resultaterne viste, at blodtrykket hos musene i kontrolgruppen var relativt konstant, men blodtrykket hos musene i forsøgsgruppen steg markant.

Fig.6 Diagram over blodtryksændringer hos mus

2.3 N-nitro-L-arginin methylester (L-NAME)-induceret dyremodel for hypertension

L-NAME er en kompetitiv hæmmer af nitrogenoxidsyntase, et aktivt stof, der fremmer endotelfunktionen og sænker blodtrykket, når nitrogenoxid stiger. L-NAME, en kompetitiv hæmmer af nitrogenoxidsyntase, kan svække den vasodilaterende virkning af nitrogenoxid og føre til forekomsten af ​​hypertension. Derfor kan der etableres en dyremodel for hypertension forårsaget af langvarig NO-mangel, og modellens eksperimentelle forskningsobjekter ses mest hos rotter.

Den er hovedsageligt velegnet til undersøgelse af nitrogenoxidsystem og kardiovaskulært system ved hypertension, og modellen kan få blodtrykket til at stige stabilt og kontinuerligt, og metoden er enkel.

2.3.1 Eksperimentelle metoder (kun til reference)

Hanrotter i alderen 3-4 uger blev intraperitonealt injiceret (eller givet) med L-NAME ved 20-50 mg/(kg·d) og administreret en gang dagligt i 4 uger, og kontrolgruppen blev kun intraperitonealt injiceret (eller givet) med destilleret vand, og rotternes ændringer blev overvåget dagligt.

Efter forsøget blev kropsvægt, blodtryk, hjertefrekvens, serum biokemiske indekser og andre biokemiske indekser for forsøgsgruppen og kontrolgruppen målt.

2.3.2 Eksperimentelle tabeller og billeder (uddrag fra litteraturen)

Ansøgning 1: Efter tilmelding steg blodtrykket i modelgruppen gradvist med forlængelse af L-NAME indtagelsestiden og nåede standarden for hypertension ved 4. uge, som var signifikant højere end den tilsvarende kontrolgruppe.

Anvendelse 2: Hypertension blev dannet efter 4 ugers vanding hos rotter, hvilket var signifikant højere end hos rotter i den tilsvarende kontrolgruppe, og det vandige ekstrakt af kassiafrø kunne reducere trykket og forbedre nyrelæsioner.

2.4 Sammenligning af lægemiddelinducerede hypertensionsmodeller

Lægemiddelinduceret hypertensionsmodel	Angiotensin II. (AngⅡ）	Deoxycorticosteronacetat (DOCA）	N-Nitro-L-Arginin Methylester (L-NAVN)
Beskrivelse af metoden	Osmotisk pumpe subkutan injektion, AngII.dosis er generelt 100 ng/(kg·min)	Først blev den unilaterale nyre resekeret, og 50 mg/(kg·d) DOCA blev injiceret subkutant, og 1% NaCI-opløsning blev drukket på samme tid	Intraperitoneal injektion (eller sonde) af 20-50 mg/(kg·d) L-NAVN, såsom at drikke 1 % NaCI-opløsning, kan fremskynde støbning
Skimmel cyklus	2-4 uger	3-5 uger	4-5 uger
Applikationsscenarier	Forskning i oxidativ stressskader og RAS	RAS-relaterede undersøgelser og natriumvand Metabolismerelateret forskning	NO system, kardiovaskulært system-relateret forskning

Relaterede produktanbefalinger (oversigt)

Classificere	Produktnavn	Katalognummer	Sspecificering
Hypertension model	L-NAME hydrochlorid (L-NAME HCl)	52302ES	100 mg
	Angiotensin II menneske	54041ES	10 mg
	Deoxycorticosteronacetat	54344ES	50 mg/500 mg
Reumatoid arthritis model	Komplet Freunds adjuvans (CFA)	60718ES	10 mL/5x10 mL
	Freunds ufuldstændige adjuvans (IFA)	60719ES	10 mL/5x10 mL
Colitis model	ColitCare™ Dextran Sulfate Sodium Salt (DSS), Colitis Grade MW:36000~50000	60316ES	25 g/100 g/500 g/1 kg
Dyremodel for akut pancreatitis	Caerulein	60321ES	1 mg
Diabetisk sygdomsmodel	Streptozocin (STZ)	60256ES	100 mg/500 mg/1 g

For mere produkt detaljer og salgsfremmende prissætning behage kontakte salg