Akut pancreatitis (AP) er en almindelig akut abdominal tilstand i klinisk praksis med kompleks ætiologi og en dødelighed på 5 % til 10 %. Dødeligheden for svær AP kan nå op på 20% til 30%. Patogenesen er endnu ikke fuldt ud forstået, og der er ingen specifikke behandlingsmetoder. Nuværende metoder til at skabe levende AP-dyremodeller omfatter bugspytkirtelkanalligation, duodenal loop lukning, bugspytkirtelgaldegangpunkturinjektion, subkapsulær pancreasinjektion, pancreaticobiliær injektion kombineret med intravenøs infusion og intraperitoneal injektion af caerulein kombineret med lipopolysaccharid.
Caerulein er et gastrisk regulatorisk molekyle, der funktionelt og sammensætningsmæssigt ligner cholecystokinin (CCK). Det stimulerer overdreven sekretion af pancreas-acinære celler, hvilket forårsager en adskillelsesforstyrrelse af intracellulært trypsinogen og lysosomale hydrolaser. Aktivering sker på en cathepsin B-afhængig måde, og aktiviteten af bugspytkirtelenzymer kan yderligere føre til proenzymaktivering, hvilket forårsager en række proteaseaktiviteter, der fører til cellulær skade. Den inflammatoriske reaktion forårsaget af selvfordøjelse af bugspytkirtelvæv rekrutterer inflammatoriske celler og frigiver inflammatoriske faktorer, som yderligere kan forårsage alvorlige lokale eller endda systemiske inflammatoriske reaktioner.
Figur 1. Caeruleins kemiske struktur (CAS NO.17650-98-5)
Denne model er med succes blevet anvendt på rotter, mus, hunde og syriske hamstere etc, og er velegnet til at studere nedsat autofagi, patologisk calciumsignalering og ER-stress, hvor AP er karakteriseret ved variation i mængden af caerulein, ved at justere antallet af injektioner, hvilket resulterer i forskelle i sværhedsgrad.
Protokol for Caerulein-induceret AP-model
Fremstilling af ceruleinopløsning
Opløs 1 mg caerulein i 1 ml saltvand. Steriliser med 0,22 μm membranfilter og opbevares ved -20°C. Optø før brug og fortynd med saltvand til 5 μg/mL eller 10 μg/mL arbejdsopløsning.
Forberedelse af dyr
Caerulein kan inducere AP i de fleste dyr, hovedsageligt brugt i gnavere (såsom rotter og mus).
Lægemiddeladministration
AP induceret af caerulein er for det meste ødematøs type, som mest bruges i undersøgelsen af mild AP (MAP) og konvertering af MAP til SAP. Til SAP-forskning kombineres caerulein ofte med andre forbindelser for at opnå øget sværhedsgrad af AP, for eksempel lipopolysaccharid (LPS).
Dyrene blev fastet, men kunne drikke frit 12 timer før operationen. Intraperitoneal injektion med Caerulein (20-100 μg/kg, sædvanligvis 50 μg/kg) hver time i 7 timer, efterfulgt af én injektion på 10 mg/kg LPS.
Model evaluering
1）Serumamylase- og lipaseaktiviteter steg.
2）Forhøjet NO-koncentration i serum.
3) Pancreaspatologi: pancreasvævsødem med vakuoler, inflammatorisk celleinfiltration, periduktal og fokal acinar celle nekrose.
4） Øget ekspression af inflammatoriske faktorer i serum og bugspytkirtelvæv.
Model fordele
Metoden er enkel, nem at kopiere, god repeterbarhed, ikke-invasiv.
ENansøgningssag(Kat#60321ES Caerulein)
Figur 2. AP-model relaterede resultater i Balb / c mus (PMID: 35339899, HVIS: 5.736)
Balb/c-mus blev intraperitonealt injiceret med 50 μg/kg caerulein (Yeasen, Cat#60321ES) syv gange med 1-times intervaller, og LPS (10 mg/kg) blev administreret samtidigt med den sidste dosis for at inducere SAP. Pancreas H&E billeder og histologisk scoring (b) samt serumniveauer af amylase (c), IL-6 (d) og ALT (e) blev evalueret.
Figur 3. Resultater af AP-model korrelation i Kunming mus (PMID: 27579473, IF: 4.096)
Kunming-hunmus blev intraperitonealt injiceret med 50 μg/kg caerulein (Yeasen, Cat#60321ES) fire gange med 1-times intervaller for at inducere AP. Niveauer af amylase, lipase og TNFα i serum (A), og pancreas H&E billeder og histologisk scoring (C) blev vurderet.
Bestillingsinformation
| Produktnavn | Kat# | Specifikation |
| 60321ES03 | 1 mg | |
| LPS, fra Escherichia coli O55:B5 | 60747ES08/10 | 5 mg/10 mg |
| LPS, fra Escherichia coli O111:B4 | 60748ES08/10 | 5 mg/10 mg |