1、Kerneenzymmateriale-Taq DNA-polymerase

Som udvidelsen af ​​applikationstestfelter og stigningen i markedsefterspørgsel kan vildtype Taq DNA-polymerase ikke længere fuldt ud opfylde kravene. Yeasens ZymeEditor™-enzymmodifikationsplatform har omfattende og retningsbestemt modificeret Taq DNA-polymerase for at imødekomme forskellige applikationsbehov, og lancerer en serie af hot-start Taq DNA-polymeraser, der er velegnede til forblandede, inhibitor-resistente, ultra-rene og andre applikationer.

• Overlegen stabilitet: Formuleret til en komplet forblandingsopløsning indeholdende primere og prober, efter behandling ved 37°C i 7 dage, er der ingen ændring i lavkoncentrationsdetektion.

Figur 1: Ved at bruge HBV-nukleinsyre som skabelon blev en komplet qPCR-forblandingsopløsning fremstillet med 10726ES, og alle komponenter undtagen skabelonen blev testet for accelereret stabilitet ved 37°C i 7 dage. Resultaterne viste, at der ikke var nogen signifikante ændringer i Ct-værdier og fluorescensværdier ved høje, mellemstore og lave koncentrationer, hvilket indikerer, at forblandingsopløsningen fremstillet med 10726ES har stabil ydeevne.

• Lav værts-gDNA-rest: Resterende E. coli genomisk DNA er mindre end 0,5 kopier pr. 100 U.

Figur 2: Lineært område af E. coli genomisk DNA: 30 fg/μL til 300 pg/μL, med en korrelationskoefficient R2 på 0,9999. (B) Resterende E. coli genomisk DNA i tre batcher af Hieff UCF.ME® Sensitive Taq DNA-polymerase er mindre end 0,5 kopier pr. 100 U.

2、Kerneenzymmateriale-omvendt transkriptase

Som en af ​​nøglekomponenterne i RT-qPCR-reaktionen skal revers transkriptase have hurtigere revers transkriptionshastighed, højere synteseudbytte og bedre varmebestandighed. For at opnå revers transkriptase mere velegnet til RT-qPCR har Yeasen Biotech udviklet Hifair®-serien af ​​reverse transkriptaser baseret på M-MLV gennem genetisk modifikation.Disse enzymer har lavere RNaseH-aktivitet, højere termisk stabilitet og stærkere kontinuerlige synteseevner.

• Det kan modstå reaktionstemperaturen på 58 ℃ og er velegnet til omvendt transkription af komplekse RNA-skabeloner

Figur 3: Hifair® V revers transkriptase og det importerede mærke T* revers transkriptase blev inkuberet ved 55°C og 58°C i 30 minutter for at påvise resterende enzymaktivitet. Resultaterne viser, at Hifair® V Reverse Transcriptase bevarer 70 % aktivitet efter inkubation ved 58°C i 30 minutter, hvilket væsentligt overstiger det importerede mærke.

• Overlegen detektionshastighed i RT-qPCR sammenlignet med andre mærker med et detektionsområde på 1 pg til 1 μg

Figur 4: Ved at bruge 293T-celle-total-RNA i koncentrationer fra 1 pg til 1 μg (7 gradienter) som skabelon, blev revers transkription udført ved hjælp af Hifair® V et-trins RT-gDNA-fordøjelse SuperMix til qPCR (Cat#11142), V* og T*. Det resulterende cDNA blev derefter udsat for qPCR til kvantitativ analyse. Resultaterne indikerer, at følsomheden af ​​11142ES kan nå 1 pg, med en detektionshastighed, der er bedre end konkurrerende produkters.

3、Andre enzymer og enzymhæmmere: RNase-hæmmer, UDG-enzym

Yeasen Biotech tilbyder en række enzymer og enzymhæmmere, der er blevet valideret til IVD industrielle applikationer, herunder RNase-hæmmere og UDG-enzymer, hvilket giver et rigt udvalg af højkvalitets råmaterialeløsninger til udvikling og produktion af en bred vifte af in vitro-diagnostiske produkter. Disse enzymrelaterede produkter anvendes i vid udstrækning til beskyttelse af molekylære detektionsmålprodukter.

RNase inhibitor:Yeasen udtrykker og oprenser rekombinante muse/svine RNase-hæmmere i en opløselig form i E. coli, som bredt kan inhibere forskellige typer af RNaser (RNase A, B, C) uden at undertrykke aktiviteten af ​​polymeraser. Disse inhibitorer er blevet valideret til udbredt anvendelse i flere applikationer såsom RT-PCR/qPCR, RNA-seq, cDNA-kloning og bibliotekskonstruktion. Ud over konventionelle RNase-hæmmere har Yeasen også udviklet RNase-hæmmere behandlet med UCF.ME® ultra-low-rest-teknologien, som har lavere værtsrester og er velegnede til applikationer med strengere krav til baggrundsbakterier, hvilket hjælper med at løse baggrundsbakteriel interferens i patogendetektion og øge nøjagtigheden af ​​detektion.

Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG enzym):Uracil-DNA-glycosylase (UDG-enzym), når det bruges sammen med dUTP, kan etablere et PCR-kontamineringsforebyggelsessystem. Yishengs termolabile enzym med lavt UDG kan undgå den resterende aktivitet af konventionelle UDG-enzymer efter inaktivering, hvilket kan forårsage nedbrydning af dU-holdige amplifikationsprodukter ved stuetemperatur. Det forhindrer også falske positiver i PCR-resultater forårsaget af baggrundsbakterier til stede i molekylære enzymer. Dette er afgørende for nøjagtigt at identificere infektiøse patogener og hjælpe med den kliniske diagnose af infektioner og smitsomme sygdomme.

Taq DNA polymerase antistof:Uspecifik amplifikation er et af de største problemer, der væsentligt påvirker PCR's ydeevne, og hotstart-teknologi kan effektivt reducere uspecifik amplifikation. Hotstart-enzymet modificeret med antistoffer har en høj forseglingseffektivitet og fremragende ydeevne, idet det er stabilt ved stuetemperatur med en hurtig frigivelseshastighed af enzymaktivitet.Det dobbelte antistof-hotstart-Taq-enzym udviklet af Yisheng Biotech forsegler ikke kun Taq-enzymets 5'→3'-polymeraseaktivitet, men forsegler samtidig 5'→3'-exonukleaseaktiviteten. Denne dobbelte tilgang forhindrer effektivt uspecifik amplifikation forårsaget af fejlparring eller primerdimere og forhindrer også generering af uspecifikke signaler på grund af nedbrydning af prober eller primere, hvorved reagensernes stabilitet forbedres dobbelt.

4、Universal High-Performance One tube qPCR Master Mix

Yeasen Biotech tilbyder qPCR-reagenser af høj kvalitet med højtydende hot-start Taq-polymerase parret med et optimeret buffersystem. Virksomheden leverer en række produkter, herunder universelle masterblandinger, alt-i-én masterblandinger, genotypemasterblandinger og frysetørrede masterblandinger. Disse reagenser er kendetegnet ved deres brugervenlighed, høje følsomhed og stærke stabilitet, som accelererer udviklingen af ​​dine molekylære diagnostiske produkter.

• god alsidighed：Det er velegnet til flere typer af multiple primere og prober (mere end 40 forskellige typer mål er blevet verificeret), og har fremragende amplifikationsydelse;
• l Super fuld præmix stabilitet: stabil ved 37 ℃ i 14 dage, 4 ℃ i 28 dage, gentagen frysning og optøning 50 gange;

• Høj sensitivitet og god specificitet: følsomheden kan detektere 0,25 kopi/μL, og specificiteten af ​​48 huller har ingen negativ top;
• Support hurtigt program:kompatibel med hurtigt program, 30min kan give resultater;
• dUP/UDG anti-forureningssystem: dUTP/UDG anti-forureningssystem er indført for effektivt at forhindre aerosolforurening;
• Multi-platform og multi-system applikation: Bio-Rad CFX96, ABI Q5, 7500, Slan, Tianlong osv.

Figur 5: Baseret på stabilitetsundersøgelsen af ​​det færdigblandede alt-i-en reagens blev 16710ES behandlet på tre forskellige måder (4°C, 37°C og fryse-tø-cyklusser). Forsøgsgrupperne blev behandlet ved henholdsvis 4°C og 37°C i 7 dage og udsat for 50 fryse-tø-cyklusser, mens kontrolgruppen (opbevaret ved -20°C) blev evalueret for stabilitet under fire multipleks-amplifikationssystemer (Gruppe 1, 2 og 4 er quadruplex-gruppe-amplifikationssystem er et, og triplex-gruppe 3-amplifikationssystem). Resultaterne viste, at afvigelsen af ​​Ct-værdier (ΔCt) mellem forsøgs- og kontrolgrupperne var inden for ±0,5, og fluorescensværdiafvigelsen var inden for 15 %, hvilket beviser, at Yeasens alt-i-en forblandede reagens besidder fremragende stabilitet i multipleks amplifikation.

5、Universal højtydende RT-qPCR Master Mix

Et-trins RT-qPCR-reagenser integrerer den overlegne ydeevne af revers transkriptase og hot-start enzymer, suppleret med et optimeret buffersystem, der muliggør hurtig og følsom detektion af enkeltcifrede kopiskabeloner. Valideret af forskellige kundemarkeder, herunder luftvejssygdomme, dyreepidemi og forskningssystemer, kan disse reagenser opfylde behovene i forskellige anvendelsesretninger.

• god alsidighed： Det er velegnet til qPCR-amplifikation og påvisning af nukleinsyrer fra patogene mikroorganismer, menneskelige genomer, planter og andre arter;
• Høj følsomhed：Det omhyggeligt optimerede buffersystem forbedrer detektionsfølsomheden af ​​skabeloner med lav koncentration op til 250 kopier/ml；
• dUP/UDG anti-forureningssystem：dUTP/varmelabilt UDG anti-forureningssystem introduceres for at nedbryde aerosolforurening af produkter effektivt, reducere falsk positiv og sikre autentiske resultater.
• Support hurtigt program: kompatibel med hurtigt program, 40min kan give resultater;
• Super stabilitet: stabil ved 37 ℃ i 14 dage, gentagen frysning og optøning 10 gange.

Evaluering af detektionsfølsomhed

Figur 6: Ved at bruge Yeasens RT-qPCR-præmix (16630ES) og et sammenligneligt produkt fra Leverandør-A blev påvisningen af ​​fire patogenmål udført samtidigt (Humant Parainfluenza Virus HPIV2, Human Parainfluenza Virus HPIV4, Respiratory Syncytial Virus HRVA og Rhinovirus RSVA). Resultaterne indikerede, at detektionsfølsomheden for 16630ES var højere end hos Leverandør-A.

Produktanbefaling

产品类型	产品名称	货号
PCR enzym serie	Hieff UNICON® Hotstart E-Taq DNA-polymerase, 5 U/μL	10726ES
	Hifair® V omvendt transkriptase (200 U/μL)	11300ES
	Uracil DNA Glycosylase (UDG/UNG), varmelabil, 1 U/μL	10303ES
	Murin RNase-hæmmer (40 U/µL)	10603ES
	dNTP-mix (25 mM hver)	10125ES
Ultra-ren PCR enkelt enzymserie med ultra-lav værtsrest	Hieff UCF.ME® Hotstart Sensitive Taq DNA-polymerase (5 U/μL)	14314ES
	Hifair UCF.ME® V omvendt transkriptase (200 U/μL)	14608ES
	UCF.ME® Uracil DNA Glycosylase(UDG/UNG), varmelabil, 1 U/μL	14466ES
	UCF.ME® murin RNase-hæmmer (40 U/µL)	14672ES
Lyo-Ready PCR monoenzym serie	Hieff UNICON® HotStart E-Taq DNA-polymerase, Glycerol-fri (5U/μL)	14316ES
	Hifair® V Reverse Transcriptase, Glycerolfri (600 U/μL)	11301ES
	Uracil DNA Glycosylase (UDG), varmelabil (1 U/μL, Glycerol-fri)	10707ES
	Murin RNase-hæmmer (200 U/µL, glycerolfri)	10703ES
RT-qPCR Master Mix	Hifair® C203P1 Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit（UDG Plus）	16630ES
	Hifair® V Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit（UDG Plus）	11899ES
	Hifair® Lyo Multiplex One Step RT-qPCR Kit	11831ES
qPCR Master Mix	Hieff Unicon® Universal TaqMan Pro U+ qPCR Mix（One Tube）	16710ES
	Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（UDG plus）	13891ES
	Hieff Unicon® Superpro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix（UDG plus）	11827ES
	Hieff Unicon® Purepro Ⅰ TaqMan qPCR Master Mix（UDG plus）	11853ES
	Hieff Unicon® Universal TaqMan Multiplex qPCR Master Mix（UDG plus）	11893ES