Nukleinsyre tjener som grundlaget for al molekylærbiologisk forskning. Desuden er kvaliteten af ekstraheret nukleinsyre også en af nøglefaktorerne, der bestemmer succes eller fiasko af nedstrømseksperimenter. Ved udvikling af nukleinsyreekstraktionsreagenser kan nogle småmolekylære nukleinsyrer eller enzymer ud over konventionelle kemiske komponenter i høj grad forbedre ekstraktionseffektiviteten eller fjerne interferensen af ikke-målstoffer og blive vigtige komponenter i nukleinsyreekstraktion.

Om hjælpestoffer til nukleinsyreudfældning

Bærer-RNA

Koncept og funktion af Bærer-RNA

Bærer-RNA, også kendt som nukleinsyreudfældningshjælp på kinesisk. I nukleinsyreekstraktionsprocessen er centrifugerørene, der bruges til ekstraktion, for det meste lavet af polypropylen. Der er statisk elektricitet på rørvæggen, som vil adsorbere nukleinsyrer. Brug af Carrier RNA i ekstraktions- og oprensningsprocessen kan hjælpe nukleinsyrer med at fjerne den elektrostatiske effekt, sikre at nukleinsyrer kan adsorberes godt på oprensningssøjlen, forbedre elueringseffektiviteten og dermed opnå genvinding af nukleinsyrer i prøven så meget som muligt.

Almindelige typer af bærer-RNA

Som et hjælpestof til nukleinsyreudfældning har Carrier RNA flere typer, såsom PolyA kaliumsalt, totalt E. coli RNA, totalt gær RNA, tRNA osv.

Almindelige problemer ved brug af Bærer-RNA

Kan bærer-RNA stadig bruges efter at have været anbragt ved stuetemperatur i en periode? Påvirker nedbrydningen af bærer-RNA dets anvendelse? Påvirker Carrier RNA nedstrøms eksperimenter?
Bærer-RNA er opløst i et RNA-beskyttende middel. Det flydende bærer-RNA har ringe indflydelse, når det placeres ved 37°C eller stuetemperatur i en kort periode (inden for 7 dage). I det væsentlige er bærer-RNA et fragment i området fra 500 nt til 1000 nt. Lille nedbrydning påvirker ikke normal brug. Til nedstrømsapplikationer såsom fluorescerende kvantitativ PCR har Carrier RNA ingen effekt på Ct-værdien. Til downstream-applikationer såsom NGS, kan det tilføjes efter faktiske behov.

Produkt introduktion af Bærer-RNA

Yeasens Carrier RNA er RNA afledt af gær. Der er ingen resterende DNase eller RNase enzymer, og restindholdet af protein og DNA er ekstremt lavt. Det kan bruges i eksperimenter såsom viral nukleinsyreekstraktion og spor-DNA-ekstraktion. De ekstraherede nukleinsyrer kan bruges i efterfølgende eksperimenter såsom RT-PCR og RT-qPCR. Produktet er tilgængeligt i flydende og frysetørrede pulverformuleringer til bekvem direkte brug, langdistancetransport og opbevaring.

Produktnavn	Produkt Antal	Specifikation	Opbevaringsbetingelser og holdbarhed
Bærer-RNA, 6 μg/μL	19701ES	1 ml / 5 ml / 100 ml	Opbevares ved -25 til -15 °C. Holdbarheden er 2 år.
Carrier RNA Pulver, 216 μg/rør	19703ES	1 rør / 100 rør / 1000 rør	Opbevares ved stuetemperatur. Holdbarhed er 2 år.
Carrier RNA Pulver, 310 μg/rør	19704ES	1 rør / 100 rør / 1000 rør	Opbevares ved stuetemperatur. Holdbarheden er 2 år.

Lineær akrylamidopløsning

Koncept og funktion af lineær akrylamidopløsning

Lineær acrylamid, med det engelske navn Linear Acrylamide (Linear Polyacrylamide, forkortet som LPA), er et co-udfældningsmiddel, der hjælper med at udfælde nukleinsyrer under nukleinsyreoprensningsprocessen.

Karakteristika for lineær akrylamidopløsning

Det er en neutral bærer og af ikke-biologisk oprindelse. Derfor indeholder det ikke potentiel nukleinsyre- eller nukleasekontamination.

Det vil ikke interferere med A260/A280-aflæsninger og vil ikke hæmme polymerase- og restriktionsendonukleaseaktiviteter.

Det er kompatibelt med andre efterfølgende molekylærbiologiske anvendelser såsom PCR og enzymatisk fordøjelse.

Det kan hjælpe med at udfælde picogram-niveau eller over DNA og RNA (inklusive Oligo). Den genvindelige fragmentlængde er over 20 nukleotider, og både enkeltstrengede og dobbeltstrengede nukleinsyrer er anvendelige.

Produktintroduktion

Produktnavn	Produkt Antal	Specifikation	Opbevaringsbetingelser og holdbarhed
Lineær acrylamidopløsning (5 mg/ml)	10408ES	1 ml	Gemt på 4 °C. Holdbarheden er 3 år.

Hjælpeenzym til nukleinsyreekstraktion

RNase A

Koncept og funktion af RNase A

Ribonuklease A (RNase A), som en endoribonuklease, nedbryder specifikt cytosin (C) eller uracil (U) rester på enkeltstrenget RNA. Den mest almindelige anvendelse af ribonuklease A (RNase A) er at fjerne RNA under fremstillingen af plasmid-DNA eller genomisk DNA. Derudover kan dette produkt også bruges i molekylærbiologiske eksperimenter såsom RNase-beskyttelsesassays og RNA-sekvensanalyse.

Karakteristika for RNase A

RNase A er afledt fra bovin bugspytkirtel. Der er ingen kontaminering af endo- og exonuklease deoxyribonuclease. Den kan bruges direkte uden forvarmning og er modstandsdygtig overfor høje temperaturer.

Produktintroduktion

Produktnavn	Produkt Antal	Specifikation	Opbevaringsbetingelser og holdbarhed
RNase A (100 mg/ml)	10406ES	1 ml	Opbevares ved -20°C. Holdbarheden er 2 år.
RNase A (10 mg/ml)	10405ES	1 ml	Opbevares ved stuetemperatur.Holdbarheden er 1 år.
Ribonuklease A(RNase A), fra bovin bugspytkirtel	10407ES	100mg/1g	Opbevares ved stuetemperatur. Holdbarheden er 2 år.

Deoxyribonuklease I (DNase I)

1. Koncept og funktion af DNase I

Deoxyribonuclease I (DNase I), en endonuklease, der findes i forskellige celler og væv, målretter og spalter phosphodiesterbindingen ved siden af pyrimidiner, hvilket producerer polynukleotider med en phosphatgruppe i 5'-enden og en hydroxylgruppe i 3'-enden. Det gennemsnitlige minimumsfordøjelsesprodukt er en tetranukleotidpolymer. DNase kan katalysere forskellige former for DNA, såsom enkeltstrenget DNA, dobbeltstrenget DNA og endda kromatin (hvis spaltningshastighed er påvirket af histoner). I molekylærbiologiske eksperimenter bruges det ofte til at fjerne DNA fra proteiner eller til at indføre hak i DNA for at indsætte mærkede baser i DNA.

2. Karakteristika for DNase I

Det optimale arbejdsområde for DNase I er pH 7-8, og dets aktivitet afhænger af Ca²⁺ og kan aktiveres af divalente metalioner såsom Co²⁺, Mn²⁺Zn²⁺osv. 5 mM Ca²⁺ kan beskytte enzymet mod at blive hydrolyseret. I nærværelse af Mg²⁺, kan dette enzym tilfældigt genkende og skære ethvert sted på hver DNA-streng; mens i nærværelse af Mn²⁺, kan den genkende begge DNA-strenge samtidigt og skære på næsten samme sted.

3. Produktintroduktion

Produktnavn	Produkt Antal	Specifikation	Opbevaringsbetingelser og holdbarhed
Deoxyribonuclease I(DNase I) fra bovin bugspytkirtel	10607ES	15 KU/10×15KU	Opbevares ved -20°C. Holdbarheden er 2 år.
Deoxyribonuclease I(DNase I) fra bovin bugspytkirtel	10608ES	25 mg/100 mg/1g	Opbevares ved -20°C. Holdbarheden er 2 år.

Proteinase K

1. Koncept og funktion af Proteinase K

Proteinase K (Proteinase K) er en serinprotease med en bred vifte af spaltningsaktiviteter. Dens relative molekylvægt er omkring 29,3 kDa, og den kan spalte de carboxylterminale peptidbindinger af alifatiske aminosyrer og aromatiske aminosyrer. Proteinase K har en bred vifte af applikationer og kan bruges i eksperimenter såsom forberedelse af kromosomalt DNA til pulseret felt gelelektroforese, Western blotting og fjernelse af nukleaser i DNA- og RNA-præparater. Denaturerende midler såsom SDS (1%) kan øge dets aktivitet.

2. Karakteristika for Proteinase K

Afledt af en genetisk rekombinant gærstamme.

Fri for RNase og DNase.

Aktiv og stabil i urinstof og SDS.

Aktiv i et bredt pH-område (pH 4,0 - 12,0), og det optimale pH-område er pH 7,5 - 9,0.

3.Produktintroduktion

Produktnavn	Produkt Antal	Specifikation	Opbevaringsbetingelser og holdbarhed
Proteinase K	10401ES	100mg/1g/5g/100g	Opbevares ved 4°C. Holdbarheden er 3 år.
Proteinase K-opløsning (20 mg/ml)	10412ES	1mL/10mL/25mL/500mL	Opbevares ved 4°C. Holdbarheden er 2 år.
Proteinase K-opløsning (20 mg/ml)	10410ES	1mL/10mL/25mL/500mL	Opbevares ved 4°C. Holdbarheden er 2 år.

RNA stabilisator

RNA-stabilisatoropløsning til dyre- og plantevæv

1. Funktion af RNA-stabilisatoropløsning til dyre- og plantevæv

RNaser er udbredt til stede i miljøet og vil med stor sandsynlighed nedbryde RNA'et i friskt indsamlede prøver af dyre- og plantevæv, blod, kropsvæsker osv. RNAsafe vævsstabilisatoren til dyre- og plantevæv (RNAsafe Tissue Stabilizer) er specielt udviklet til at stabilisere og beskytte RNA'et i indsamlede prøver. Som en ikke-toksisk opløsning kan den hurtigt trænge ind i væv og inaktivere endogene RNaser.

2. Karakteristika af RNA-stabilisatoropløsning til dyre- og plantevæv

Ekstremt nem at betjene: Bare skær frisk væv i vævsblokke af passende størrelse (≤0,5 cm) og nedsænk dem i 5 til 10 gange volumen af RNAsafe.

Lang stabiliseringsperiode: Væv/celler infiltreret med RNAsafe kan opbevares ved 37°C i 1 dag, ved stuetemperatur i 1 uge, ved 4°C i 4 uger og til langtidsopbevaring ved -20°C/-80°C.

Bred nedstrømskompatibilitet: Den er kompatibel med næsten alle RNA-isoleringsmetoder, såsom HieffTM Total RNA Extraction Reagent (katalognummer: 10606ES60), og næsten alle kommercielle RNA-ekstraktionssæt, inklusive centrifugalsøjleekstraktionsmetode og magnetisk perleoprensningsmetode.

Bred anvendelse af materialer: Det kan bruges til konservering af forskellige dyre- og plantevæv (såsom hjerne, hjerte, lever, bugspytkirtel, nyre, milt, testikler, muskler, stængler og blade af planter osv.), og også til gær, vævskulturceller osv.