HiActi™ Cytokiner valideret i dyrkede organoider

I 2021 vil organoider blive opført som et nøgleprojekt i den nationale nøgleforsknings- og udviklingsplan "14. femårsplan". Organoider er så varme, og måden at opnå dem på er også blevet fokus for opmærksomhed. Forskellige organoider kræver forskellige cytokiner under dyrkning. Ved at tilføje cytokiner, der fremmer eller hæmmer specifikke signalveje, kan stamceller fås til at differentiere til ønskede organoider. Den mest klassiske cytokinkulturprotokol i organoid kultur er WNER (henholdsvis: Wnt-3a, Noggin, EGF og R-Spondiner), og stignings- eller faldkombinationen af ​​disse 4 faktorer kan anvendes på næsten alle organoidkultureksperimenter.

Cytokiner, der almindeligvis anvendes i organoid kultur

R-Spodin 1

Fungere: R-Spodin 1 tilhører Rspo-familien af ​​Wnt-regulatorer, som omfatter 4 medlemmer, nemlig Rspo1-4. Denne familie er en mikromiljøfaktor, der fastholder voksne stamceller i flere organer. RSPO1 er et udskilt aktivatorprotein. Rspo-1 udtrykkes i visse områder af det udviklende centralnervesystem og findes også i binyrerne, æggestokkene, testiklerne, skjoldbruskkirtlen og luftrøret.

Som en aktivator af Wnt-signalvejen spiller Rspo1 en rolle i mange aspekter ved at forbedre Wnt-signalering. Det er et almindeligt anvendt vækstmedium til gastriske epitelorganoider, tyndtarms- og tyktarmsorganoider, leverorganoider, prostataorganoider, bugspytkirtelorganoider og brystorganoider. faktor.

Wnt-3a

Fungere: Wnt-3a tilhører Wnt-familien af ​​signalproteiner og spiller en vigtig rolle i at opretholde integriteten af ​​embryonale og voksne væv. Wnt-familien er meget konserveret og rig på cystein. Wnt'er medierer Wnt-signalvejen ved at binde til cellemembranreceptorer og/eller ved at binde til tilstødende cellemembranreceptorer. Wnt-signalvejen kan opdeles i kanonisk vej og ikke-kanonisk vej, man er involveret i den kanoniske signalvej medieret af β-catenin, herunder Wnt1, Wnt2, Wnt2b, Wnt3, Wnt3a, Wnt7a, Wnt8, Wnt8b og Wn; den anden er ikke ikke-kanoniske signalveje afhængig af β-catenin, herunder Wnt4, Wnt5a, Wnt6 og Wnt11. Som det mest repræsentative signalprotein i Wnt-familien er Wnt3a vidt distribueret og spiller en nøglerolle i reguleringen af ​​pleiotrope cellulære funktioner, herunder selvfornyelse, proliferation, differentiering og motilitet.

EGF

Fungere: EGF er en potent vækstfaktor, der stimulerer multipel epiteludvikling, angiogenese, hæmning af mavesyresekretion, fibroblastproliferation og kolonidannelse af epidermale celler i kultur. EGF er et grundlæggende medlem af EGF-familien, som også omfatter TGF-α, to regulatoriske proteiner (AR), β-celleprotein (BTC), epidermalt protein (EPR), heparinbindende EGF-lignende vækstfaktor (HB-EGF), Epiproteiner og neureguliner (NRG1-6). Fysiologisk findes EGF i forskellige kropsvæsker, herunder blod, mælk, urin, spyt, sæd, bugspytkirteljuice, cerebrospinalvæske og fostervand. EGF er en højaffinitetsligand for EGF-receptoren (ErbB). EGF binder og inducerer dimeriseringen af ​​EGF-receptoren, hvilket fører til aktivering af proteintyrosinkinasesignalvejen, hvorved EGF-familiesignalet transduceres.

Noggin

Fungere: Noggin kan hæmme TGF-β-familieligander og forhindre dem i at binde til tilsvarende receptorer.Noggin blev oprindeligt opdaget som en antagonist af BMP-4 og blev derefter vist at modulere aktiviteten af ​​andre BMP'er (BMP-2, 7, 13 og 14). Noggin er meget konserveret blandt hvirveldyr. Udskilte Noggin-proteiner regulerer aktiviteten af ​​knoglemorfogenetiske proteiner under udvikling. Rolle af BMP-signalantagonisten Noggin i udviklingen af ​​osteolytiske knoglemetastaser fra prostatacancer.

bFGF/FGF-2

Fungere: bFGF, et medlem af FGF-superfamilien af ​​mitogene proteiner. Det er en meget specifik kemotaktisk og mitogen faktor for mange celletyper og ser ud til at være involveret i ombygningen af ​​beskadiget væv, såsom heling af sår, vaskulær reparation, traumatisk hjerneskade. bFGF er en vigtig bestanddel af humant embryonalt stamcellekulturmedium. Endvidere er bFGF-proteinet et heparinbindende kationisk protein involveret i forskellige patologiske tilstande, herunder angiogenese og vækst af solide tumorer. Derfor betragtes bFGF som et mål for cancerkemoforebyggelse og terapeutiske strategier. bFGF bruges ofte som en vigtig komponent i cellekulturmedium, såsom humant embryonalt stamcellekulturmedium, serumfrit dyrkningssystem.

FGF-10

Fungere: Fibroblast vækstfaktor 10 (FGF-10) er en heparinbindende vækstfaktor, der tilhører FGF-familien. Proteiner af denne familie spiller en central rolle i prænatal udvikling, postnatal vækst og regenerering af forskellige væv ved at fremme celleproliferation og -differentiering. FGF-10 udskilles af mesenkymale celler og binder til ekstracellulær FGF-BP, FGF-10 binder og aktiverer fortrinsvis epitelial FGF R2 (IIIb) og interagerer svagt med FGF R1 (IIIb).

Qet kvalitetsstyringssystem af HiActi™ cytokin

Kvalitetsstyringssystem

• Certificeret efter ISO 13485:2016, cytokiner fremstilles gennem en fuldstændig lukket ultra-ren produktionsproces for at sikre renhed og stabilitet af proteiner.
• Overhold systemet med "Good Manufacturing Practice for Drugs"
• Har et certifikat for godkendelseskvalitet (COA)
• Aseptisk teknologi og sekundær steriliseringsfiltrering
• Farmaceutisk produkt råvareproduktion base

Kvalitetssikringsledelse

• Særlig person er ansvarlig for uddannelsessystemet for ledere
• Etabler udstyrsvedligeholdelse og kalibreringsprocedurer
• Råvare- og leverandørstyringssystem
• Fuldstændig batchproduktionsoptegnelser, batchinspektionsjournaler, emballagejournaler osv.
• Kvalitetsdokumenter er blevet revideret og inspiceret af QA
• Fuldfør batchproduktion og inspektionsoptegnelser
• Validering af analysemetoder

Kvalitetskontrolsystem

• Overhold den tredje generelle regel i 2020-udgaven af ​​Folkerepublikken Kinas farmakopé: kvalitetskontrol af råvarer og hjælpestoffer til fremstilling af biologiske produkter

Organoid kulturvalidering

Yeasen cytokiner er blevet verificeret på humane tumororganoider såsom lungekræft, livmoderhalskræft, ovariecancer, bugspytkirtelkræft og tarmkræft, og normale organoider såsom organoider i tyndtarmen hos mennesker og mus.

Relateret produktinformation