Beskrivelse
Produktbeskrivelse
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (With Dye) er en klar-til-brug 2x forblandet opløsning indeholdende Hieff Canace™ Plus High-Fidelity DNA-polymerase, dNTP'er og et optimeret buffersystem. Blandingen inkluderer to monoklonale antistoffer, der hæmmer polymeraseaktivitet og 3'→5'exonukleaseaktivitet ved stuetemperatur, hvilket muliggør meget specifik Hot Start PCR. Tilføjelsen af forlængelsesfaktorer muliggør amplifikation af lange fragmenter med målfragmenter op til 13 kb. Dette enzym udviser 5'→3'-DNA-polymeraseaktivitet og 3'→5'-exonukleaseaktivitet med en troværdighed på 83 gange den for Taq DNA-polymerase og 9 gange den for almindelig Pfu-DNA-polymerase. Det er velegnet til at amplificere komplekse skabeloner og producere stumpende PCR-produkter.
2×Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (With Dye) tilbyder fordele såsom enkelhed, høj følsomhed, stærk specificitet og fremragende stabilitet. Reaktionssystemet kræver kun tilføjelse af primere og skabelon, og en to-trins PCR-protokol kan bruges til at forenkle proceduren og spare tid. Produktet inkluderer elektroforesesporingsfarve, der tillader direkte påfyldning af PCR-produkter til gelanalyse. Derudover indeholder den et særligt beskyttelsesmiddel, der sikrer stabil aktivitet selv efter gentagne fryse-tø-cyklusser.
Specifikationer
| Cat.No. | 10154ES01 / 10154ES03 / 10154ES08 / 10154ES60 |
| Størrelse | 100 μL / 1 mL / 5 × 1 mL / 100 × 1 mL |
Opbevaring
Dette produkt skal opbevares ved -25~-15 ℃ til 1 år.
Instruktioner
1. Anbefalede PCR-reaktionssystemer.
| Komponenter | Bind(μL） | Finale koncentration |
| 2× Hieff Canace™ Plus PCR Master Mix (Med farvestof)* | 25 | 1× |
| Skabelon*** | x | - |
| Forward Primer(10 μmol/L）** | 2 | 0.4 μmol/L |
| Rnogensinde Primer(10 μmol/L）** | 2 | 0,4 μmol/L |
| ddH2O | Op til 50 | - |
*Den 1× endelige koncentration af blandingen indeholder 1 U/50 μL polymerase, 2 mmol/L Mg2+og 200 μmol/L dNTP'er.
**Den anbefalede slutkoncentration af primere i PCR-reaktionen er 0,2-1 μmol/L, med 0,4 μmol/L foretrukket.
***Anbefalede skabelonmængder for et 25 μL reaktionssystem:
| Skabelontype | Fragmentstørrelse (1 kb-10 kb) |
| Genomisk DNA | 50 ng-200 ng |
| Plasmid eller viralt DNA | 10 pg-20 ng |
| cDNA | 1-2,5 μL (ikke over 1/10 af det samlede PCR-volumen) |
2. Reaktionsprogram.
1)Totrinsprotokol (foretrukken):
| Cyklus trin | Temp. | Tid | Cykler |
| Indledende denaturering | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturering | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
| Forlængelse | 68℃ | 30 sek/kb | |
| Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
2)Tre-trins protokol (konventionel):
| Cyklus trin | Temp. | Tid | Cykler |
| Indledende denaturering* | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturering | 98℃ | 10 sek | 30-35 |
| Udglødning** | 60℃ | 20 sek | |
| Udvidelse*** | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
*Indledende denaturering: Anbefales ved 98°C i 3 minutter (5-10 minutter for skabeloner med høj GC).
**Udglødning: Anbefalet ved 60°C i 20 sekunder (justerbar mellem 10-30 sekunder). Langvarig udglødning kan forårsage udtværing på geler.
***Udvidelse: Anbefalet ved 72°C i 30 sek/kb (op til 60 sek/kb for komplekse skabeloner).
3)Gradient Annealing Protocol (anbefales til vanskelige mål):
| Cyklus trin | Temp. | Tid | Cykler |
| Indledende denaturering | 98℃ | 3 min | 1 |
| Denaturering | 98℃ | 10 sek | 15 (fald med 1°C pr. cyklus) |
| Gradientudglødning | 70-55°C | 20 sek | |
| Forlængelse | 72℃ | 30 sek/kb | |
| Denaturering | 98°C | 10 sek | 20 |
| Udglødning | 55°C | 20 sek | |
| Forlængelse | 72°C | 30 sek/kb | |
| Final extension | 72℃ | 5 min | 1 |
4）Karakteristika for forskellige PCR-protokoller:
| Protokoltype | Hastighed | Specificitet | PCR-udbytte | Detektionshastighed |
| To-trins | Hurtigste | Høj | Medium | Høj |
| Tre-trins | Medium | Medium | Højest | Medium |
| Gradientudglødning | Langsom | Høj | Medium | Høj |
Noter
1.Dette produkt er kun til forskningsbrug.
2. Arbejd venligst med laboratoriefrakker og engangshandsker，for din sikkerhed.
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.