Beskrivelse
LZCap AU (3'Acm) er en cap1-analog. Produktet anvendes til transkription med den indledende sekvens på 5'AU3', og den naturlige cap1-struktur er produceret ved Cap1-transkriptionsafdækning. Sammenlignet med Cap0 produceret ved traditionel capping-metode, gør cap1-strukturen produceret af CapAU (3'Acm) det muligt for SaRNA at have højere aktivitet og translationseffektivitet in vivo.
amerikansk patent godkendt.
Komponenter
Kat nr. | Navn | Størrelse |
10685 | LZCap AU (3'Acm) (100mM) | 100 μL |
1 ml |
Produktdetaljer
Molekylær formel | C34H47N13O25P4 (fri syre) |
Molekylvægt | 1161,71 (fri syre) |
Koncentration | 100 ± 3 mM |
Renhed | HPLC ≥95 % |
LZCap® DNA skabelon design
LZCap®AU(3'Acm) er egnet til AG-initierede sekvenser. Som vist i figuren nedenfor kan T7-promotoren (understreget) efterfulgt af AG-sekvensen effektivt initiere transkription.
Protokol
1. Tø komponenter påkrævet til eksperimentet på is.
2. Se følgende reaktionssystem for at konfigurere transkriptionssystemet ved stuetemperatur.
Modificeret N1-Me-pUTP kan bruges i stedet for vildtype UTP. Den modificerede N1-Me-pUTP reducerer immunogeniciteten af mRNA. Henovcom kan også levere modificeret nukleotid N1-Me-pUTP (Kat. nr.: HN1002).
Bemærkninger:
1) LZCap®AU(3'Acm) er egnet til T7-promotor-transkriptionsvektor med 5 'AU 3'-initierede sekvenser, som skal tages i betragtning ved konstruktion af vektoren.
2) De reagenser, forbrugsstoffer og beholdere, der blev brugt i eksperimentet, er fri for RNase-kontamination.
3) Det anbefales at bruge en lineariseret DNA-skabelon til transkription.
4) Når modificerede nukleotider blev anvendt i stedet for vildtype nukleotider, var den endelige koncentration af reaktionen uændret.
5) Hvis PCR-produktet anvendes som transkriptionsinitierings-DNA-skabelon, kan mængden af DNA-skabelon reduceres med det halve.
3. Bland den forberedte reaktionsopløsning, centrifuger kortvarigt og inkuber ved 37°C i 2-3 timer. Hvis transskriptionslængden er mindre end 100nt, øges reaktionstiden til 4-8 timer.
Generel sikkerhedsprofil
Resultat og Konklusion | |
Cytotoksicitet Prøve | Ingen cytotoksicitet var observeret med de modificeret nukleosid i flere celle linjer |
Polymerase Hæmning Studere | De modificeret nukleosid er ingen en inhibitor heller ikke -en substrat af human RNA og DNA polymeraser og er derfor ikke integreret til de genom |
Ames Prøve* | Ingen genotoksicitet var observeret i de Ames prøve |
Opbevaring
Dette produkt kan opbevares ved -25~-15 ℃ i to år.
Forholdsregler
- For din sikkerhed og sundhed skal du bære personlige værnemidler (PPE), såsom laboratoriefrakker og engangshandsker, når du arbejder med dette produkt.
- Kun til forskningsbrug.
F&Q
1. Hvordan designer du LZCap?
Enzymer har en relativt "specifik" genkendelse af substrater. Derfor, når vi designer en ny hættestruktur, har vi på den ene side brug for nye strukturelle modifikationer til patentformål, men på den anden side stræber vi efter at bevare ligheden med naturlige/kendte strukturer så meget som muligt. Den naturlige struktur har en ribose 3' OH, som kan modificeres (f.eks. methylering). Baseret på denne betragtning valgte vi at tilføje et carbon ved 3'-positionen for patentnyhed, efterfulgt af en NH for at efterligne hydrogenbindingen af OH og derefter en acetylgruppe for at reducere NH's basicitet og forbedre dens hydrogenbindingsevne. Aktiviteten af LzCap er bedre end methylated naturlig kasket, muligvis på grund af øget hydrogenbinding. Sammenlignet med methyl- og methoxygrupperne kan acetylaminogruppen også øge van der Waals interaktioner mellem substratet (cap) og den initierende faktor (enzym).
2. Er acetylaminogruppen stabil?
Acetylaminogruppen er allerede tilstrækkelig stabil. Det er meget mere stabilt end den 7-methylerede position og phosphodiesterbindingen, som er de mindst stabile dele af hætten.
Kontakt os venligst for flere detaljer om LZCap-licensen.
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.