Beskrivelse
LZCap GG (3'Acm) er en cap1-analog. Produktet anvendes til transkription med den indledende sekvens af 5'GG3', og den naturlige cap1-struktur er produceret ved Cap1-transkriptionsafdækning.
amerikansk patent godkendt.
Komponenter
| Kat nr. | Navn | Størrelse |
| 10686 | LZCap GG (3'Acm) (50mM) | 100 μL |
| 1 ml |
Produktdetaljer
| Molekylær formel | C35H48N16O25P4 (fri syre) |
| Molekylvægt | 1216,19 (fri syre) |
| Koncentration | 50±3 mM |
| Renhed | HPLC ≥95 % |
LZCap DNA skabelon Design
LZCap GG(3'Acm) er egnet for GG-initieret sekvenser. Som vist i figur nedenfor, den SP6 promotor (understreget) fulgte ved GG-sekvensen kan efeffektivt indlede transskription.
Protokol
1． Tø komponenter påkrævet til forsøgetgå ind på is.
2. Tilføje RNase frit vand og NTP'er til reaktionsrør.
3． Varme LZCap GG(3'Acm) alikvot for 15 min kl 60°C. Afkøles kl stuetemperatur for 5 min.
4. Tilføj straks LZCap GG(3'Acm) til rør og vortex til blande. Spin kort til samle flydende.
5. Tilføje 10x transskription Buffer og vortex.
6. Tilføje DNA skabelon and SP6 Enzym Blande.
7. Bland forberedt reaktionsopløsning, centrifugering kort, og inkuber kl 37°C for 2-3 timer. Hvis udskriften længde er mindre end 100 nt, øge reaktionstid til 4-8 h.
| Komponent | Bind (μL) | Slutkoncentration |
| RNase Gratis vand | Op til 20 μL | / |
| ATP (100mM) | 1 | 5mM |
| UTP (100 mm) | 1 | 5 mM |
| CTP (100 mM) | 1 | 5 mM |
| GTP (100 mm) | 0,2 | 1 mM |
| LZCap GG(3'Acm) (50 mm) | 1.6 | 4mM |
| 10×Transskription Buffer | 2 | 1 × |
| Lineær DNA | 1 μg | 50 ng/μL |
| SP6 Enzym Blande | 2 | / |
| Endelig bind | 20 μL | |
Noter:
1) De SP6 enzym blande vi anbefales til brugt er MEGAscript® Kit (AM1330).
2) LZCap GG(3'Acm) er velegnet til SP6-promotor-transkriptionsvektor med 5 'GG 3'-initierede sekvenser, hvilke har brug for overvejes, når vektoren konstrueres.
3) De reagenser, forbrugsvarer og containere brugt i de eksperiment er gratis of RNase forurening.
4) Det er anbefales til bruge en lineariseret DNA tempfor sent til transskription.
5) Når modificeret nukleotider var brugt i placere af vildtype nukleotider, de endelig koncentrattion af de reaktion var uændret.
6) Ændret N1-Mig-pUTP kan være brugt i placere af vildtype UTP. De modificeret N1-Mig-pUTP reducerer immunogenicitet af mRNA. Henovcom kan også give modificeret nukleotid N1-Mig-pUTP (Kat. Ingen.: HN1002).
7) Hvis PCR prokanal er brugt som transskriptionen indvielse DNA skabelon, de beløb af DNA skabelon kan være reduceret ved halv.
Opbevaring
Dette produkt kan opbevares ved -25~-15 ℃ i to år.
Forholdsregler
- For din sikkerhed og sundhed skal du bære personlige værnemidler (PPE), såsom laboratoriefrakker og engangshandsker, når du arbejder med dette produkt.
- Kun til forskningsbrug.
F&Q
1. Hvordan designer du LZCap?
Enzymer har en relativt "specifik" genkendelse af substrater. Derfor, når vi designer en ny hættestruktur, har vi på den ene side brug for nye strukturelle modifikationer til patentformål, men på den anden side stræber vi efter at bevare ligheden med naturlige/kendte strukturer så meget som muligt. Den naturlige struktur har en ribose 3' OH, som kan modificeres (f.eks. methylering). Baseret på denne betragtning valgte vi at tilføje et carbon ved 3'-positionen for patentnyhed, efterfulgt af en NH for at efterligne hydrogenbindingen af OH og derefter en acetylgruppe for at reducere NH's basicitet og forbedre dens hydrogenbindingsevne. Aktiviteten af LzCap er bedre end methylated naturlig kasket, muligvis på grund af øget hydrogenbinding. Sammenlignet med methyl- og methoxygrupperne kan acetylaminogruppen også øge van der Waals interaktioner mellem substratet (cap) og den initierende faktor (enzym).
2.Er acetylaminogruppen stabil?
Acetylaminogruppen er allerede tilstrækkelig stabil. Det er meget mere stabilt end den 7-methylerede position og phosphodiesterbindingen, som er de mindst stabile dele af hætten.
Kontakt os venligst for flere detaljer om LZCap-licensen.
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.