Hifair™ AdvanceFast One-step RT-gDNA Digestion SuperMix til qPCR repræsenterer en forbedret iteration af Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix til qPCR (gDNA Digester Plus). Det er designet til at opfylde kravene til at udføre både revers transkription og genomfjernelsesreaktioner i et enkelt rør. Desuden strømliner det reaktionsprocessen, reducerer reaktionstiden betydeligt og øger udbyttet af det omvendte transkriptionsprodukt. 4×Hifair® AdvanceFast One-Step RT SuperMix omfatter alle væsentlige reagenser til den omvendte transkriptionsreaktion. Under reaktionen skal du blot supplere den med gDNA Remover Mix, skabelon-RNA og vand for effektivt at syntetisere den indledende streng af cDNA og samtidig eliminere genomisk DNA-kontamination. Dette produkt er velegnet til omvendt transkription af indviklede RNA-skabeloner og viser sig meget effektivt til omvendt transkription, der involverer ringe skabelonmængder og gener med lavt kopieringsniveau.

Det omvendte transkriptionsprodukt, der genereres af dette særlige produkt, er fuldt ud kompatibelt med både de probe-baserede og farvestof-baserede qPCR-metoder. Til probebaseret qPCR anbefaler vi at bruge Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR-mastermix (Cat#11211), mens Hieff UNICON® Universal Blue qPCR SYBR Green Master Mix (Cat#11184) til farvestofbaseret qPCR er det anbefalede valg til højtydende genekspressionsanalyse.

Det er dog vigtigt at bemærke, at det omvendte transkriptionsprodukt, der produceres af dette produkt, ikke er egnet til efterfølgende anvendelser, såsom amplifikation af lange fragmenter. Hvis du har brug for effektiv revers transkription til disse formål, anbefaler vi at bruge Hifair® AdvanceFast 1st Strand cDNA Synthesis Kit (kat#11149, kat#11150).

Funktioner

• 5 min RT

• Integreret RT- og gDNA-fordøjelse i ét rør

Ansøgninger

• RT-qPCR
  
• Antisense RNA syntese

Specifikationer

Komponenter

Forsendelse og opbevaring

Produktet sendes med tøris og kan opbevares ved -15℃ ~ -25℃ i 12 måneder.

Brugsanvisning

Tø 11151-A/B/C-komponenterne på is, omrør forsigtigt og bland hver reagenskomponent grundigt. Saml derefter følgende komponenter i et RNase-frit rør:

Tabel 1: Reaktionsforberedelse

*Vi foreslår ikke at overstige 2 μg som den samlede RNA-inputmængde. I tilfælde af lav ekspressionsoverflod af målgenet kan den totale RNA-input øges op til maksimalt 5 μg.

Tabel 2: Reaktionsprotokoller

*Denne proces omfatter både revers transkription og gDNA-fordøjelse.

Revers transkriptionsproduktet er velegnet til øjeblikkelig brug i qPCR-reaktioner eller kan opbevares ved -20°C i en kort periode. Til forlænget opbevaring anbefaler vi at uddele og opbevare det ved -80°C for at forhindre flere fryse-optøningscyklusser.

Forholdsregler:

1. Alle procedurer bør udføres på is, med største omhu for at forhindre RNase-kontamination.

2. Sørg for din sikkerhed og velvære ved at bære en laboratoriefrakke og engangshandsker.

3. Dette produkt er udelukkende beregnet til videnskabelige forskningsformål og bør ikke bruges på anden måde.