Hifair^™ Advanced One Step RT-qPCR Kit er et kit til fluorescens kvantificering baseret på SYBR Green I farvestof. Ved hjælp af genspecifikke primere fuldføres revers transkription og qPCR-reaktioner i ét rør, hvilket eliminerer behovet for gentagne hætteåbninger og pipettering, hvilket i høj grad forbedrer assayeffektiviteten og reducerer risikoen for kontaminering. Til RNA-prøver anvender sættet varmebestandig Hifair^™ V Revers Transcriptase til effektiv cDNA-syntese og UNICON^™ HotStart Taq DNA-polymerase til kvantitativ amplifikation. Under det optimerede buffersystem kan sættets følsomhed være så høj som 0,1 pg for højt udtrykte mål og så høj som 1 pg for moderat udtrykte mål, og kittet er også velegnet til amplifikation og kvantificering af DNA-prøver. Sættet er velegnet til amplifikation og kvantificering af DNA-prøver. Det muliggør følsom påvisning og kvantificering af nukleinsyrer fra forskellige plante- og dyreprøver, celler og mikroorganismer.

Specifikationer

Komponenter

Opbevaring

Dette produkt skal opbevares ved -25~-15℃ væk fra lys for 1 år.

Instruktioner

1. Reaktion system konfiguration*****

* Low Rox-modeller og modeller uden Rox-korrektion er forberedt direkte i henhold til ovenstående reaktionssystem. Når du bruger High Rox-modellen, tilsæt Hieff™ SP High Rox til 2 x Hifair™ Advanced SG-buffer ved 1:250 v/v, bland godt og centrifuger. 2× Hifair^™ Avanceret SG-buffer med Hieff™ SP High Rox påvirker ikke brugen af ​​Low Rox- og No Rox-korrektionsmodellerne.

** Den endelige primerkoncentration var 0,2 μmol/L, som også kunne justeres mellem 0,1 og 1 μmol/L efter behov.

*** Reagenset er ekstremt følsomt med totalt RNA i intervallet 1 pg-1 μg, og test af humane prøver viste et optimalt input på 1 pg-100 ng, der kontrollerer for en samlet Ct-værdi i området 15-30 efter behov.

**** Det anbefales at bruge 20 μL eller 50 μL for at sikre validiteten og reproducerbarheden af ​​målgenamplifikation.

***** Forbered venligst i den ultra-rene bænk og brug nuklease-rester-frie spidser og reaktionsrør; spidser med filterpatroner anbefales. Undgå krydskontaminering og aerosolkontamination.

2）Reaktionsprogram

*Den omvendte transkriptionstemperatur kan vælges mellem 50-55°C i henhold til de eksperimentelle behov. For DNA-prøver kan revers transkriptionsprocessen udelades.

** I særlige tilfælde kan annealing/extension temperaturen justeres i henhold til primerens Tm-værdi, 60°C anbefales.

3）Gældende model

Instrumentmodeller, der ikke kræver Rox-kalibrering:

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Applied Science: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: PikoReal Cycler; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Low Rox anvendelige modeller:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 og 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

High Rox anvendelige modeller*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne, StepOne Plus.

* For High Rox-modeller skal du bemærke, at Hieff™ SP High Rox skal tilføjes proportionalt med 2 x Hifair^™ Advanced SG Buffer før brug.

Noter

1. Dette produkt er kun til forskningsbrug.
2. Brug venligst laboratoriefrakker og engangshandsker, for din sikkerhed.

Dokumenter:

Sikkerhedsdatablad

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-C-MSDS-HB230927.PDF

Manualer