Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (High Rox) er en præ-løsning til 2x realtids kvantitativ PCR-amplifikation, med høj fluorescensintensitet, høj sensitivitet og specificitet og højt amplifikationsudbytte. Kernekomponenten, Hieff UNICON™ Taq DNA-polymerase, er varmstartet ved antistofmetode, som effektivt kan hæmme uspecifik amplifikation forårsaget af primer-annealing under prøveforberedelse. Samtidig tilføjer formlen faktorer til at forbedre amplifikationseffektiviteten af ​​PCR-reaktionen og facilitatorer for at udligne amplifikationen af ​​gener med forskellige GC-indhold (30~70%), så den kvantitative PCR kan opnå et godt lineært forhold i en bred vifte af kvantitative regioner. Produktet anvender den blandede farveændringsreaktion af forskellige farvestoffer til at overvåge pipetteringsprocessen, hvilket effektivt reducerer forekomsten af ​​pipeteringsfejl.

Funktioner

Pipetteringssporing: Reducer risikoen for mistede/tilføjelsesfejl

Fremragende forstærkning: God linearitet over et bredt lineært område

Høj præcision: Kan præcist skelne skabeloner med en 2-fold koncentrationsforskel

God repeterbarhed: Lille variabilitet mellem brønde i replikatbrønde, hvilket resulterer i bedre repeterbarhed

Stabilt og pålideligt: ​​Reaktionssystemet kan opbevares ved stuetemperatur i 24 timer, og produktet forbliver upåvirket efter 20 fryse-tø-cyklusser

Ansøgninger

Analyse af genekspressionsforskel

Absolut kvantitativ analyse

Specifikationer

Komponenter

Forsendelse og opbevaring

Dette produkt bør opbevares ved -25~-15 ℃ i 1 år.

Figurer

Figur 1. Pålidelige resultater kan opnås inden for det dynamiske område.

Ved at bruge 2 µL plasmidskabeloner med en gradient på 10^1-10^7 blev de relaterede gener amplificeret. Hieff UNICON™ ColorGPS master mix kan effektivt detektere et skabelonmængdeområde på 7 størrelsesordener, hvilket opnår god linearitet inden for et bredt lineært område.

Figur2. Kan nøjagtigt skelne skabelonkoncentrationsforskelle på 2 gange.

Ved at anvende 2 µL plasmid fortyndet i en 2-fold gradient som skabelonen blev de relaterede gener amplificeret. Hieff UNICON™ ColorGPS-mastermix kan nøjagtigt løse skabelonkoncentrationsforskelle.

Figur3. Lille variabilitet mellem brønde observeres, hvilket viser bedre repeterbarhed.

Ved at bruge snesevis af kopier af plasmid som skabelon blev amplifikation udført med forskellige fluorescerende kvantitative reagenser i overensstemmelse med procedurerne specificeret i deres respektive instruktionsmanualer. SD-værdierne indikerer, at sammenlignet med andre revers transkriptionsreagenser har det nye produkt mindre forskelle mellem replikatbrønde og bedre repeterbarhed.

Figur4. Mere fleksibel, velegnet til standard eller hurtige procedurer.

I standardproceduren er denatureringstiden og forlængelsestiden sat til henholdsvis 10 sekunder og 30 sekunder, mens denatureringstiden og forlængelsestiden i den hurtige procedure er sat til henholdsvis 3 sekunder og 10 sekunder for at detektere Ct-værdierne svarende til 10 målgener.Resultaterne viser, at Ct-værdierne opnået med det nye produkt i både standard- og hurtige procedurer har en stærk sammenhæng, og det nye produkt kan opnå gode resultater ved brug af den hurtige procedure.

Figur5. Efter at reaktionssystemet er fremstillet, kan det forblive stabilt ved stuetemperatur i 24 timer.

Ved at bruge forskellige gener fra mus, humane 293-celler og Arabidopsis thaliana som mål, blev det efter klargøring af reaktionssystemet anbragt i mørke ved forskellige temperaturer i 24 timer før påvisning. Sammenlignet med øjeblikkelig behandling overstiger detektionsforskellen for forskellige gener ikke 0,5 Ct, hvilket indikerer, at stabile resultater også kan opnås med langvarige operationer.

Dokumenter:

Manualer

11190_Manuel_Ver.EN20241218.pdf