Beskrivelse
CRISPR/Cas9 er en teknik, hvor RNA-dirigeret Cas-nuklease foretager specifikke DNA-modifikationer til målrettede gener, som er en erhvervet immunforsvarsmekanisme udviklet af bakterier og arkæbakterier som reaktion på angreb fra fager og fremmede plasmider. I dette system ledes Cas9-nukleasen med kunstigt optimeret enkelt guide-RNA (sgRNA) til at skære dobbeltstrenget DNA (dsDNA) på målstedet, hvilket forårsager DNA-brud. DNA repareres med den ikke-homologe endesammenføjning eller Homologi-styrede reparationsmekanisme in vivo, hvilket resulterer i rammeskift-mutation, udskiftning eller deletion af gener.
HifairTM Precision sgRNA Synthesis Kit bruger en T7 RNA-polymeraseblanding til effektivt at transskribere spCas9 sgRNA. Sættet indeholder en specifik sekvens, der genkendes af Cas9-proteinet og fungerer som et stillads. En del af sekvensen kan delvist overlappes med den målspecifikke sekvens designet af brugeren. De komplementære strenge fyldes med DNA-polymerase for at generere dsDNA-skabeloner til transkription. Ved at bruge dets medfølgende reagens og brugerdesignede specifikke DNA-sekvenser kan sættet opnå 20-100 μg funktionelt sgRNA inden for 4 timer i en enkelt rørreaktion.
Funktioner
Højt synteseudbytte: I en enkeltrørsreaktion over 4 timer kan udbyttet af sgRNA nå 20 - 100 μg.
Bredt anvendelsesområde: Høje udbytter kan opnås for forskellige typer sgRNA.
Høj renhed: Det syntetiserede sgRNA har et enkelt bånd.
Høj aktivitet: Det syntetiserede sgRNA kan effektivt lede Cas9 til at spalte mål-DNA'et.
Ansøgninger
CRISPR/Cas-genredigering
Komponenter
| Komponenter nr. | Navn | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
| 11355-A | 10×sgRNA enzymblanding | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-B | 10×sgRNA reaktionsbuffer | 10 μL | 50 μL | 100 μL | 200 μL |
| 11355-C | 2×Canace Enzyme Mix | 62,5 μL | 312.5 μL | 625 μL | 1,25 ml |
| 11355-D | Stillads skabelon | 6,25 μL | 31,25 μL | 62,5 μL | 125 μL |
| 11355-E | NTP'er (25 mM hver) | 40 μL | 200 μL | 400 μL | 800 μL |
| 11355-F | Kontrol sgRNA Oligo (10 μM) | 2 μL | 10 μL | 20 μL | 40 μL |
Forsendelse og opbevaring
Dette produkt bør opbevares ved -25 ~ -15oC for 2 år.
Figurer
Figur 1.Syntesemængden af sgRNA på forskellige tidspunkter
Figur 2.Synteseudbyttet af sgRNA med forskellige sekvenser
Figur 3.Renheden af syntetiseret sgRNA (bestemt af Agilent 2100)
Figur 4.Spaltningseffektivitetsdiagrammet for sgRNA
Dokumenter:
Sikkerhedsdatablad
Manualer
11355_Manual_Ver.DA20240710.pdf
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.