Beskrivelse
Hieff™ Alsidighed T4 DNA Ligase er en variant af T4 DNA Ligase. Dette enzym er velegnet til at katalysere ligeringsreaktionen mellem sammenhængende eller stumpendede molekyler. Det er et enkelt-enzymprodukt designet til at forbinde DNA-fragmenter og adaptere under bibliotekets forberedelsesprocessen i næste generations sekventering (NGS). The Hieff® Alsidighed T4 DNA Ligase er blevet omfattende valideret gennem high-throughput sekventering og udviser enestående kvalitet.
Feature
- Høj troskab
- Termotolerant
Lær mere om den alsidige T4 DNA-ligaseudvikling
Specifikationer
| Kilde | Rekombinant E. coli |
| Opbevaringsbuffer | 50 mM Tris-HC1.100 mM KC1,0,1 mM EDTA, 1 mM DTT, 50 % glycerol, pH 7,5士0,2 @25℃ |
| Enhedsdefinition | I et ligeringsreaktionssystem på 20 μL er den enzymmængde, der kræves for at katalysere ligeringen af mere end 50 % af DNA-fragmenterne, når 6 μg λDNA-Hind III reageres ved 16°C i 30 minutter, defineret som 1 aktivitetsenhed (U). |
Komponenter
| Komponenter | Navn | 12996ES60 60KU | 12996ES62 600KU |
| 12996-A | Hieff® Alsidig T4 DNA Ligase (600 U/µL) | 100 μL | 1000 μL |
| 12996-B | 10×T4 DNA Ligase buffer | 500 μL | 3×1500 μL |
Opbevaring
Dette produkt skal opbevares ved -25~-15 ℃ i 2 år.
Figur
Efterlad venligst en besked for at forespørge om præstationssammenligningsdata mellem dette enzym og andre termostabile og konventionelle T4 DNA-ligaser i topklasse.
Noter
1. Arbejd venligst med laboratoriefrakker og engangshandsker，for din sikkerhed.
2. Hvis der forekommer en lille mængde nedbør i bufferen, er det et normalt fænomen. Venligst vend og bland bufferen grundigt før brug.
3. Dette produkt er kun til forskningsbrug.
Protokol
1. De nuværende almindelige DNA-biblioteksforberedelseskit, der anvender den ligeringsbaserede metode, kræver typisk ikke oprensningstrin efter endereparation og A-tailing. DNA-fragmenterne udsættes direkte for adaptorligering uden oprensning. Dette sæt er kompatibelt med mainstream kommercielt tilgængelige endereparations- og A-tailing-systemer til sømløs adapterligering.
Sæt følgende reaktion op i et mikrocentrifugerør på is, bland forsigtigt ved pipettering eller omrystning, Centrifuger kort og opvarm inaktiver ved 20°C i 15 minutter.
Tabel 1. Reaktionssystem til adapterligering
| Komponent | Bind(μL） | Slutkoncentration |
| dA-hale DNA | 60 | 1× |
| 10×T4 DNA Ligase buffer | 10 | 0,1 μM-0.5 μM |
| 50 % PEG6000 | 12* | 1 ng -400 ng |
| DNA adapter | 5** |
|
| 3~5*** |
| |
| Nukleasefrit vand | op til 100 | - |
【Note】*50 % PEG6000-løsningen er ikke inkluderet i sættet, du skal selv forberede den
**Se venligst tabel 2 for mængde af adapter.
***Mængden af T4 DNA Ligase kan tilsættes efter behov med 3-5 μL.
2. Koncentrationen af adapteren påvirker direkte ligeringseffektiviteten og biblioteksudbyttet. Overdreven brug af adaptere kan resultere i flere adapterdimere, mens lavt forbrug kan påvirke forbindelseseffektiviteten og biblioteksproduktionen. Tabel 2 viser den anbefalede adaptermængde for forskellige mængder input-DNA.
Tabel 2. Den anbefalede adaptermængde for 100 pg-1 μg input-DNA
| Indtast DNA | Koncentration |
| 0,1 ng | |
| 1 ng | 0,5 μM |
| 10 ng | 1 μM |
| 25 ng | 2 μM |
| 100 ng~1000 ng | 10 μM |
【Note】:Mængden af adapter kan justeres efter kravene i tabellen ovenfor.
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.