Beskrivelse
Det Uracil-specifikke udskæringsreagens (benævnt BRUGER) er en enzymcocktail bestående af Uracil DNA Glycosylase (UDG) og endonuklease VIII (Endo VIII). Det er i stand til at generere enkeltnukleotidhuller specifikt ved uracil-lokationer. UDG letter spaltningen af uracilbasen, hvilket resulterer i dannelsen af et AP-sted (apurin/apyrimidin-sted), mens integriteten af phosphodiester-sukker-phosphat-rygraden opretholdes. Endonukleaseaktiviteten af Endo VIII spalter phosphodiesterbonends ved både 3" og 5" ender af apurinstedet, hvorved deoxyribosesukkeret frigives, der mangler en base.
Funktioner
Ingen resterende nukleaser eller RNaser
Høj udskæringseffektivitet
Ansøgninger
RNA-streng-specifik bibliotekskonstruktion
Uracil-specifik excision-medieret kloning (USER-LIC)
DNA-samling, såsom samling af TALE-monomerer
Seriel konstruktion af flere cDNA-biblioteker fra enkeltceller
Specifikationer
Koncentration | 1 U/µL |
Enhed Definition | En Enhed er defineret som mængden af enzym, der kræves for at nicke et 34-mer dobbeltstrenget oligonukleotid indeholdende en enkelt uracilbase i en 10 μL reaktionssystem ved 37°C i 15 minutter, hvilket svarer til spaltningen af 10 pmol af substratet. |
jeginaktivering Cbetingelser | 75℃, 10 min |
Komponenter
Komponent nr. | Navn | 14537ES50 | 14537ES72 |
14537-A | Uracil-specifikt udskæringsreagens (1 U/μL) | 50 μL | 250 μL |
14537-B | 10×Uracil-specifik excisionsreagens Reaktionsbuffer | 1.25 ml | 1.25 ml |
Forsendelse og opbevaring
Produkterne skal opbevares på -25℃ ~ -15℃ for 1 år.
Figurer
Figur 1. Sammenligning af excision effekter
Bemærk: 10 pmol dobbeltstrenget DNA indeholdende dUTP blev skåret ud ved hjælp af Yeasens USER-enzym og et sammenligneligt produkt fra leverandør A. Resultaterne fra agarosegelelektroforese viste, at udskæringseffekterne af Yeasens USER-enzym var i overensstemmelse med dem fra leverandør A.
Figur2. Sammenligning af koloniantal for USER-LIC kloning
Bemærk: Et 600 bp DNA-fragment blev ligeret ved hjælp af Yeasens USER-enzym og et sammenligneligt produkt fra leverandør A for at konstruere en vektor, som derefter blev transformeret til E. coli og kultiveret. Antallet af kolonier på dyrkningspladen blev observeret, og resultaterne indikerede, at USER-LIC-kloningseffektiviteten ved brug af Yeasens USER-enzym var overlegen i forhold til leverandør A.
Dokumenter:
Sikkerhedsdatablad
Manualer
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.