Beskrivelse
Ribonuclease R (RNase R) fra E. coli, er en magnesiumafhængig 3′→5′ exoribonuclease, der kan fordøjer alle lineære RNA'er, men fordøjer ikke lariat- eller cirkulære RNA-strukturer. De fleste cellulære RNA'er vil blive fordøjet fuldstændigt af RNase R, med undtagelse af tRNA'er, 5S RNA og intronlariater. RNase R bruges til berigelse af circRNA'er i biologiske prøver, identifikation af introniske lariatsekvenser, identifikation af exoniske circRNA'er, undersøgelse af alternativ splejsning.
Funktioner
Garanteret effektivitet og kvalitet med ISO 13485-certificering.
Tilgængelig i bulk eller skræddersyede konfigurationer.
Nedbryder effektivt lineært RNA, samtidig med at lariatløkker og cirkulære RNA'er bevares.
Selektiv fordøjelse af lineære RNA'er øger isoleringen af cirkulære RNA'er til proteinproduktion eller intronisk cDNA-bibliotekskonstruktion.
Tilbyder GMP-Grade RNAse R (14615)
Specifikationer
Kilde | En rekombinant E. coli stamme, der bærer RNAse R-genet fra E. coli |
Optimal temperatur | 37℃ |
Opbevaringsbuffer | 50 mM Tris-HCl, 100 mM NaCl, 0,1 mM EDTA, 0,1 % Triton® X-100, 1 mM DTT, 50 % glycerol, pH 7,5 ved 25℃ |
Enhedsdefinition | En enhed omdanner 1 μg poly-r(A) til syreopløselige nukleotider på 10 minutter ved 37°C i 20 mM Tris-HCl (pH 8,0), 100 mM KCl og 0,1 mM MgCl2. |
Anvendelse
RNase R tjener som en fundamental komponent i cirkulær RNA-syntese (circRNA). CircRNA lover at forbedre farmaceutisk stabilitet og biostabilitet. Med deres kovalent lukkede strukturer modstår circRNA'er RNA-exonukleaser. [1,2] RNase R finder udbredt anvendelse i forskellige undersøgelser, herunder alternativ splejsning, intron-cDNA-produktion og isolering af splejsningsmellemprodukter og lariater.
Komponenter
Komponenter nr. | Navn | 14606ES72 | 14606ES86 | 14606ES92 |
14606-A | RNase R (20 U/μL) | 12,5 μL | 125 μL | 500 μL |
14606-B | 10×RNase R reaktionsbuffer | 250 μL | 3 x 1 ml | 10 ml |
Opbevaring
Dette produkt skal opbevares ved -25~-15 ℃ i 2 år.
Instruktioner
Forbered følgende reaktionssystem i et sterilt mikrocentrifugerør
komponent | Bind |
10×RNase R reaktionsbuffer | 2 μL |
RNA prøve | 1 μg |
RNase R (20 U/μL) | 2-4 U |
RNase-fri ddH2O | Op til 20 μL |
Inkuber ved 37 ℃ i 10 - 30 minutter.
Figurer
Figur 1: Lineære RNA-molekyler kan fordøjes af Yeasen RNAse R.
Figur 2: CircRNA kan ikke fordøjes af Yeasen RNAse R.
Noter
- Aktiviteten af RNase R kræver 0,1-1,0 mM Mg2+;
- Med forøgelsen af RNA kan reaktionstiden forlænges, og enzymmængden kan øges passende;
- EDTA-indholdet i RNA-prøver kan påvirke aktiviteten af RNase R.
- Inkuber ved 70 ℃ i 10 minutter kan inaktivere enzymet.
Reference
- Qu L, Yi Z, Shen Y, et al. Cirkulære RNA-vacciner mod SARS-CoV-2 og nye varianter. Celle. 2022;185(10):1728-1744.e16. doi:10.1016/j.cell.2022.03.044
- Chen L, Wang C, Sun H, et al. Den bioinformatiske værktøjskasse til opdagelse og analyse af circRNA. Kort Bioinform. 2021;22(2):1706-1728. doi:10.1093/bib/bbaa001
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.