Beskrivelse
AapCas12b-nukleasen (også kendt som C2c1) er en DNA-endonuklease medieret af tracrRNA:crRNA (eller sgRNA), afledt af den termofile bakterie Alicyclobacillus acidophilus. I nærvær af en PAM (TTN)-sekvens ved det dobbeltstrengede mål-DNA (dsDNA), spalter det specifikt mål-dsDNA'et, hvilket forårsager dobbeltstrengsbrud og genererer klæbrige ender. AapCas12b kan specifikt spalte enkeltstrengede DNA-mål uafhængigt af PAM-sekvensen. Både dobbeltstrengede og enkeltstrengede DNA-mål kan aktivere trans-spaltningsaktiviteten af AapCas12b. Når AapCas12b-enzymet danner et ternært kompleks med sgRNA og mål-DNA, bliver det aktiveret for uspecifik ssDNA trans-spaltningsaktivitet, hvilket skærer enhver vilkårlig sekvens af ssDNA i systemet. Den optimale spaltningsreaktionstemperatur for AapCas12b er 60oC, hvilket gør den mere varmebestandig end AacCas12b, og mere velegnet til brug med LAMP til at udvikle isotermisk amplifikation/CRISPR-Cas detektionssystemer.
Funktioner
Bredt reaktionstemperaturområde: Udviser spaltningsaktivitet inden for temperaturområdet 37~65oC
Lav nukleaserester: Ingen resterende exonuklease, nickase eller RNase
Cis-spaltningsaktivitet: Meget effektiv spaltning af dobbeltstrenget DNA in vitro
Trans-spaltningsaktivitet: Høj trans-spaltningsaktivitet, velegnet til nukleinsyrepåvisning
Ansøgninger
CRISPR/Cas-genredigering
Diagnostik og detektion baseret på CRISPR/Cas-systemet
Andre detektionsapplikationer kombineret med isotermiske nukleinsyreamplifikationsteknologier (RPA og LAMP) osv.
Specifikationer
| Molekylvægt | 130 KDa |
| Koncentration | 10 µM |
| Renhed | >95 % (SDS-SIDE) |
| Enhedsdefinition | Mængden af Cas12b-enzym, der kræves for at spalte 1 pmol ssDNA-probe inden for 1 minut ved 60oC i et samlet reaktionsvolumen på 20 μL, der indeholder 1×reaktionsbuffer, er defineret som 1 U |
Komponenter
| Komponenter Ingen. | Navn | 14808ES65 | 14808ES80 |
| 14808-A | AapCas12b Nuclease (10 μM) | 100 μL | |
| 14808-B | 10×Reaktionsbuffer | 1 ml | 1 ml |
Skibping og opbevaring
Dette produkt bør opbevares ved -25 ~ -15oC i 2 år.
Figurer
Figur 1. Cis-spaltningsaktivitet verifikation af AapCas12b nuklease
Note: I en 20 μL-reaktionssystem indeholdende Target dsDNA med en PAM-sekvens, sgRNA, Cas12b og 1×reaktionsbuffer, blev blandingen inkuberet ved 60°CoC i 30 minutter og derefter inaktiveret ved 85°CoC i 5 minutter. Resultaterne af agarosegelelektroforese viste, at tre batcher af AapCas12b Nuclease alle var i stand til effektivt at spalte dsDNA'et med spaltningseffektivitet sammenlignelig med den for det importerede mærke T*.
Figur 2. AapCas12b Nuclease Trans-cleavage Activity Test Resultater
Note: I en 20 μL-reaktionssystem indeholdende Target dsDNA med en PAM-sekvens, sgRNA, Cas12b, Report ssDNA fluorescerende probe og 1×reaktionsbuffer, blev blandingen inkuberet ved 60°CoC i 1 time, og fluorescenssignalet blev opsamlet hvert 30. sekund. Resultaterne viste, at i nærværelse af Target DNA, sgRNA og Cas12b sammen kunne Report ssDNA fluorescerende probe spaltes og derved frigive fluorescenssignalet.
Dokumenter:
Sikkerhedsdatablad
Manualer
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.