Beskrivelse
HifairTM Lyo-klar jeg Multiplex One Step RT-qPCR Kit(UDG plus) er et multipleks kvantitativt PCR-kit baseret på RNA som skabelon. I forbindelse med forsøget blev der udført revers transkription og kvantitativ PCR i samme rør, hvilket forenklede den eksperimentelle operation og reducerede risikoen for kontaminering.De unikt buffer- og enzymdesign sikrer, at det kan bruges til fremstilling og produktdesign af et-trins RT-qPCR-lyofiliserede reaktionssystemer.
I dette kit blev den første streng cDNA syntetiseret effektivt af varmeresistent HifairTM Omvendt transkriptase og kvantitativt amplificeret af UniconTM HotStart Taq DNA-polymerase. Sættet indeholder hovedsageligt optimeret lyofiliserbar buffer, enzymblanding osv. Derudover tilføjes de faktorer, der effektivt kan hæmme den uspecifikke PCR-amplifikation og forbedre amplifikationseffektiviteten af flere qPCR-reaktioner, som kan sikre amplifikationseffektiviteten og udføre op til multipel amplifikationsreaktion.
Dette sæt er udstyret med lyoprotektant der kan bruges til lyofilisering.
Specifikationer
| Komponenter nr. | 16645ES60 / 16645ES80 / 16645ES92 |
| Størrelse | 100 T / 1000 T / 10.000 T |
Komponenter
| Navn | 16645ES60 (100T) | 16645ES80 (1.000T) | 16645ES92 (10.000 T) | |
| 16645-EN | 4×HifairTM Lyo-buffer | 600 μL | 6 ml | 60 ml |
| 16645-B | HifairTM Lyo-enzymblanding | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
| 16645-C | Lyobeskyttelsesmiddel | 800 μL | 8 ml | 80 ml |
Opbevaring
De produkt skal opbevares ved -25℃ ~ -15℃ i 1 år. Det bør undgå gentagen frysning og optøning.
Instruktioner
1. Reaktionssammensætning:
| Komponenter | Bind (μL) | Endelig koncentration |
| 4×HifairTM Lyo-buffer | 6 | 1× |
| HifairTM Lyo-enzymblanding | 1 | - |
| Lyobeskyttelsesmiddel | 8 | - |
| Primerblanding (10 μM) | 1 | |
| Probe Mix (10 μM) | 0,5 | 0,05-0,5 μM |
| Skabelon RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | til 25 | - |
Note:Sørg for at blande godt før brug, undgå for store bobler forårsaget af voldsomme vibrationer.
2. Optimeret cykelprotokol
(1) Standard forstærkningsprocedure
| Reaktionsstadie | Temperatur | Tid | Cyklus | |
| 1 | Omvendt transskription | 50°C-en | 1 | |
| 2 | Indledende denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikationsreaktion | 95°C |
| 45 cyklusser |
| 60°Cb | 30 sekc |
(2) Hurtigt forstærkningsprogram
|
| Reaktionsstadie | Temperatur | Tid | Cyklus |
| 1 | Omvendt transskription | 50°C-en | 2 min | 1 |
| 2 | Indledende denaturering | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Amplifikationsreaktion | 95°C |
| 45 cyklusser |
| 60°Cb | 13 sekc |
Note:
a) Omvendt transskription: Temperaturen kan vælges mellem 42°C eller 50°C i 10-15 minutter.
b) Amplifikationsreaktion: Temperaturen justeres i henhold til Tm-værdien af de designede primere.
c) Fluorescenssignalopsamling: Indstil venligst den eksperimentelle procedure i overensstemmelse med kravene i instrumentmanualen.
3. Anvendelse udstyr
Udstyr med Rox:ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™
Udstyr med Low Rox:ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 og 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™
Udstyr uden Rox:
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s; Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0, Lightcycler® 96
Termo Videnskabelig PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR
Noter
Bær venligst det nødvendige PPE, såsom laboratoriefrakke og handsker, for at sikre dit helbred og sikkerhed!
Brug venligst RNasefri forbrugsstoffer for eksperimentet.
Dette produkt er til forskning kun brug!
Lyofiliseringsprocedure
Dette kit kan bruges direkte til lyofilisering, eller du kan yderligere udforske hjælpestoffer til forskellige primere på dette grundlag.Standardlyofiliseringsproceduren for dette reagens er som følger:
| Behandle | temperatur | indstille tid | varighed | Vakuum mbar |
| prælyofilisering | -45℃ | 10 min | 60 min | —— |
| Indledende frysetørringsfase | -45 ℃ | 10 min | 60 min | 0,01 mbar |
| -40 ℃ | 10 min | 900 min | 0,01 mbar | |
| -35 ℃ | 10 min | 60 min | 0,01 mbar | |
| -30 ℃ | 20 min | 60 min | 0,01 mbar | |
| -20 ℃ | 20 min | 60 min | 0,01 mbar | |
| 0 ℃ | 20 min | 60 min | 0.01 mbar | |
| tryk opbygget test | ||||
| Analytisk tørringsfase | 5 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar |
| 10 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar | |
| 15 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar | |
| 20 ℃ | 10 min | 20 min | 0,01 mbar | |
| 25 ℃ | 10 min | 240 min | 0,01 mbar | |
| trykopbygget test | ||||
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.