Beskrivelse
Hifair™ Superior Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG Plus) er et multipleks kvantitativt PCR-kit baseret på RNA som skabelon. I forbindelse med forsøget blev der udført revers transkription og kvantitativ PCR i samme rør, hvilket forenklede den eksperimentelle operation og reducerede risikoen for kontaminering.
I dette kit blev den første streng cDNA syntetiseret effektivt af varmeresistent Hifair™ Omvendt transkriptase og kvantitativt amplificeret af UNICON™ HotStart Taq DNA-polymerase. Sættet indeholder hovedsageligt optimeret MP-buffer, enzymblanding. Bufferopløsningen indeholder allerede Mg2+ og dNTP Mix. Derudover tilføjes de faktorer, der effektivt kan hæmme den ikke-specifikke PCR-amplifikation og forbedre amplifikationseffektiviteten af flere qPCR-reaktioner, hvilket kan sikre amplifikationseffektiviteten og udføre op til multiple amplifikationsreaktioner. dUTP/UDG-systemet blev tilføjet for effektivt at forhindre risikoen for aerosolkontamination.
Feature
Funktioner
1. Ggod alsidighed: Det er velegnet til qPCR-amplifikation og påvisning af nukleinsyrer fra patogene mikroorganismer, humane genomer, planter og andre arter.
2. Høj følsomhed: Det omhyggeligt optimerede buffersystem forbedrer detektionsfølsomheden af skabeloner med lav koncentration op til 250 kopier/ml.
3. dUP/UDG system: dUTP/varmelabilt UDG anti-forureningssystem introduceres for at nedbryde aerosolforurening af produkter effektivt, reducere falsk positiv og sikre autentiske resultater.
4. Støtteing hurtigt program: kompatibel med 40min hurtigt program.
5. Super stabilitet: stabile ved 37 ℃ i 14 dage, gentagen frysning og optøning 10 gange.
Specifikationer
| Komponenter nr. | 16901ES60 / 16901ES80 / 16901ES92 |
| Størrelse | 100 T / 1000 T / 10.000 T |
Komponenter
| Navn | 16901ES60 (100T) | 16901ES80 (1.000T) | 16901ES92 (10.000 T) | |
| 16901-EN | 500 μL | 5 ml | 50 ml | |
| 16901-B | Hifair™ Enzym blanding | 100 μL | 1 ml | 10 ml |
Note: 1) 5×Hifair™ MP Buffer er forkortelsen for Hifair™ Superior Multiplex One Step RT-qPCR Probe Buffer, som inkluderer dNTP'er, dUTP, Mg2+, stabilisatorer og mere.
2) Hifair™ Enzym blanding hovedsagelig indeholder Hifair™ revers transkriptase, UNICON™ HotStart Taq DNA-polymererRNAseinhibitor, og UDGase og så videre.
Opbevaring
Produktet skal opbevares ved -25℃ ~ -15℃ i 1 år. Det bør undgå gentagen frysning og optøning.
Instruktioner
| Bind (μL) | Endelig koncentration | |
| 5×Hifair™ MP buffer | 5 | 1× |
| Hifair™ Enzym blanding | 1 | - |
| Primerblanding (10 μM) | 0,4 hver | 0,16 μM |
| Probe Mix (10 μM) | 0,2 hver | 0.08 μM |
| 1-5 | - | |
| RNase fri H2O | til 25 | - |
1. Reaktionssammensætning:
Note:Sørg for at blande godt før brug, undgå for store bobler forårsaget af voldsomme vibrationer.
-en) Primerkoncentration: Primer blanding inklusive multiplex primer, afhængig af situationen kan den optimale primerkoncentration være mellem 0,1 og 1,0 μM.
b) Probekoncentration: Probeblanding inklusive multiplex probemærkningsforskel fluorescerende gruppe, afhængigt af situationen kan den optimale probekoncentration være mellem 0,05 og 0.5 μM.
c) Skabelonfortynding: qPCR er meget følsom, og det anbefales at fortynde skabelonen. Kontrol-Ct-værdien er egnet mellem 20 og 35.
d) Systemforberedelse: un hoved med filterelement. Undgå krydskontaminering og aerosolkontamination.
2. Optimeret cykelprotokol
(1) Standard forstærkningsprocedure
| Reaktionsstadie | Temperatur | Tid | Cyklus | |
| 1 | Omvendt transskription | 50°C-en | 1 | |
| 2 | Indledende denaturering | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Amplifikationsreaktion | 95°C | 15 sek | 45 cyklusser |
| 60°Cb | 30 sekc |
Note:
a) Omvendt transskription: Temperaturen kan vælges 50°C eller 55°C i 10-15 minutter.
b) Amplifikationsreaktion: Temperaturen justeres i henhold til Tm-værdien af de designede primere.
c) Fluorescenssignalopsamling: Indstil venligst den eksperimentelle procedure i overensstemmelse med kravene i instrument manuel.
(2) Hurtigt forstærkningsprogram
|
| Reaktionsstadie | Temperatur | Tid | Cyklus |
| 1 | Omvendt transskription | 50°C | 5 min | 1 |
| 2 | Indledende denaturering | 95°C | 30 sek | 1 |
| 3 | Amplifikationsreaktion | 95°C | 5 sek | 45 cyklusser |
| 60°C | 20 sek |
Note:Hvis den faktiske qPCR-detektor understøtter hurtig amplifikation, skal du udføre en forhåndstest for at bekræfte.
3. Applikationsudstyr
ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Fast, StepOne™, StepOne Plus™，ABI 7500, 7500 Fast, ViiA™7, QuantStudio™ 3 og 5, QuantStudio™ 6,7,12k Flex；
Stratagene MX3000P™, MX3005P™, MX4000P™；
Bio-Rad CFX96™, CFX384™, iCycler iQ™, iQ™5, MyiQ™, MiniOpticon™, Opticon®, Opticon® 2, Chromo4™；
Eppendorf Mastercycler® ep realplex, realplex 2 s;
Qiagen Corbett Rotor-Gene® Q, Rotor-Gene® 3000, Rotor-Gene® 6000；
Roche Applied Science LightCycler® 480, LightCycler® 2.0; Lightcycler® 96；
Termo Videnskabelig PikoReal Cycler; Cepheid SmartCycler®; Illumina Eco qPCR; SLAN 96S, 96P.
Noter
Bær venligst det nødvendige PPE, såsom laboratoriefrakke og handsker, for at sikre din sundhed og sikkerhed!
Brug venligst RNasefri forbrugsstoffer for eksperimentet.
Dette produkt er til forskning kun brug!
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.