MolPure^TM Magnetisk Universal Viral DNA / RNA Kit er velegnet til at ekstrahere viral nukleinsyre fra fuldblod eller cellefri kropsvæskeprøver (såsom serum, plasma, cerebrospinalvæske, næse-/svælgpodning, alveolær skyllevæske osv.). Denne metode anvender magnetisk perlerensningsteknologi uden giftig phenol-chloroform-ekstraktion, sikker, ikke-giftig og hurtig. De resulterende produkter kan bruges direkte til PCR, qPCR, anden generations sekventering og andre eksperimenter. Med det automatiske ekstraktionsinstrument af den magnetiske perlemetode kan høj-throughput-ekstraktion af nukleinsyre realiseres.

Produkt Iinformation

Komponenter

Bulet Version

Færdigpakket Version

Opbevaring

Del I: Opbevares ved stuetemperatur, transporteres ved stuetemperatur, med en holdbarhed på 1 år.

Del II: For komponent 18521-G (Protease K), opbevares ved 2~8℃, transporteres ved stuetemperatur.

Noter

1．De forskellige buffere i dette sæt indeholder guanidiniumsalte. For din sikkerhed og sundhed skal du bære en laboratoriefrakke

og engangshandsker under drift. Håndteres i overensstemmelse med standard sikkerhedsforanstaltninger for at undgå kontakt med hud, øjne og slimhinder. I tilfælde af kontakt, skyl straks grundigt med vand og søg læge.

2.Hvis der sker udfældning i opløsningen, skal den opvarmes i et 30°C vandbad, indtil bundfaldet er

helt opløst før brug.

3．Hvis den magnetiske perlesuspension er frosset, må den ikke bruges.

4.De forskellige buffere i dette sæt indeholder guanidiniumsalte. Må ikke behandles med oxiderende desinfektionsmidler som f.eks

som natriumhypoklorit, da dette kan frigive giftige gasser. De skal håndteres som medicinsk affald.

5.Under eluering kan der være resterende magnetiske perler. Når du aspirerer prøver, så prøv at undgå at inhalere

magnetiske perler.

Instruktioner

1. Anvendelige prøvetyper: fuldblod, serum, plasma, cerebrospinalvæske, næse-/pharyngeale podninger,

bronkoalveolær skyllevæske og andre prøver.

2. Prøveopbevaring og -transport: Prøver kan bruges med det samme til testning eller opbevares ved -70°C eller

lavere for fremtidig test med en holdbarhed på 6 måneder. Undgå gentagen frysning og optøning. Prøver skal transporteres ved hjælp af kølekædelogistik.

3. Krav til nedfrysning og optøning: Hurtig nedfrysning og hurtig optøning for at undgå gentagne cyklusser.

Driftstrin

Opløsningen blev kontrolleret for udfældning, og om de magnetiske perler kunne resuspenderes før eksperimenterne.

Manuel Extraktion

1. Overfør 200-300 μL af prøven til et 1,5 mL centrifugerør, tilsæt 600 μL lysisbindende væske,

20 μL protease K og 20 μL magnetisk perlesuspension, hvorefter vortexbland i 30 sekunder ved høj hastighed. Inkuber ved 50°C under omrystning i 5-7 minutter; hvis inkubatoren ikke har en rystefunktion, vortex tre gange under inkubationen, hver i 15 sekunder.

2. Overfør til et 1,5 mL magnetisk stativ til magnetisk adskillelse, indtil opløsningen er klar og gennemsigtig, aspirér derefter og kasser opløsningen.

3. Tilsæt 700 μL vaskeopløsning A, vortex i 10 sekunder for at sprede de magnetiske perler, overfør derefter til det magnetiske stativ til magnetisk adskillelse, indtil opløsningen er klar, og aspirér og kassér opløsningen.

4. Tilsæt 700 μL vaskeopløsning B, vortex i 10 sekunder for at sprede de magnetiske perler, overfør derefter til det magnetiske stativ til magnetisk adskillelse, indtil opløsningen er klar, og aspirér og kassér opløsningen.

5. Gentag trin 4 med yderligere 700 μL vaskeopløsning B.

6. Centrifuger kort for at opsamle dråber på rørvæggen, overfør til det magnetiske stativ, indtil det er klart, aspirér og kassér den resterende væske. Lufttør i 3-5 minutter.

Bemærk: Ethanolrester kan hæmme efterfølgende enzymatiske reaktioner, så sørg for, at ethanol fordamper fuldstændigt under tørring. Tør ikke for længe for at undgå at påvirke den efterfølgende eluering.

7. Tilsæt 50-100 μL elueringsvæske, vortex ved høj hastighed i 2-3 minutter for at sprede de magnetiske perler. Inkuber ved 60°C i 5 minutter, vortex derefter ved høj hastighed i 60 sekunder.

8. Centrifuger kort for at opsamle dråber på rørets hætte ind i røret, overfør til det magnetiske stativ, indtil de magnetiske perler er fuldstændigt adsorberet, og overfør derefter forsigtigt væsken til et nyt centrifugerør for at opnå nukleinsyreopløsningen.

9. Nukleinsyreopløsningen kan opbevares ved -20°C på kort sigt eller -80°C i lang tid.

Automatiseret Extraktion

Yeasen AP-96N automatisk nukleinsyreekstraktions- og oprensningsinstrument (for flere typer instrumenter, kontakt venligst teknisk support)

1. Før eksperimentet, forpakke dyb hulplade med kraftoscillation flere gange for at undgå væskerester på tætningsmembranen. Opløsningen blev kontrolleret for udfældning, og om de magnetiske perler kunne resuspenderes.

2. Placer hver 96-brønds plade i nukleinsyreekstraktionsinstrumentet i rækkefølge, og anbring den 96-dybe huls magnetiske stanghylster.

Position 1: kløv bindepladen

Position 2: skyllebræt

Position 3: vask + magnetisk perleplade

Position 4: vaskeplade

Position 6: elueringsplade

3. Tilsæt 200-300 µL af prøven og 20 µL protease K til lysisbindingspladebrøndene.

4. Kør følgende procedure. Efter proceduren overføres eluatet fra elueringspladen til et nyt centrifugerør. Løsningen kan placeres i -20 ℃ til korttidsopbevaring og -80 ℃ til langtidsopbevaring.

AP-96N kanal nukleinsyreekstraktionsinstrumentprogram