Beskrivelse
Rekombinant TEV-protease (rTEV-protease) er en rekombinant protease modificeret og oprenset ved gensplejsning, som ikke kun opretholder den funktionelle aktivitet af naturlig TEV-protease, men også viser stærkere stabilitet og specificitet over et bredt temperaturområde. rTEV Protease er et almindeligt værktøjsenzym til at skære affinitetsmærker på fusionsprotein. Den er specifik for de syv aminosyresekvenser EXXYXQ↓(G/S), og skærestedet er mellem glutamin og glycin/serin. Den almindeligt anvendte syv aminosyresekvens er Glu-Asn-Leu-Tyr-Phe-Gln↓- Gly. rTEV Protease er optimalt aktiv ved pH 7,0, 30°C, men er aktiv over et bredt område af pH 6,0-8,5 og temperaturer 4-30°C (se tabel 1), hvilket tillader valget af reaktionsbetingelser at være fleksibelt afhængigt af målproteinet. Derudover er den 6×Hans mærke af N-terminal kan også bruges til at fjerne rTEV-protease af Ni-NTA-harpiks for at oprense målproteinet.
Produktet er optimeret på basis af 20403ES, og sammenlignet med 20403ES har det højere renhed, stærkere aktivitet og lavere E. coli gDNA-rest, som er velegnet til anvendelse med højere krav til enzymrenhed, aktivitet og rest.
Funktioner
Høj spaltningseffektivitet: Proteinmærket fjernes mere grundigt.
Lavt resterende vært gDNA: Reducer effektivt risikoen for introduktion af eksogene stofrester.
Ansøgninger
Fjernelse af fusion tags
Specifikationer
| Enhedsdefinition | Mængden af enzym, der kræves for at skære >85% af de 3 μg substrat i en 1×rTEV-buffer (50 mM Tris, pH 8,0, 0,1 mM EDTA, 1 mM DTT) ved 30oC i 1 time blev defineret som en aktivitetsenhed |
| Protein renhed | ≥95 % |
| Kilde | Udtrykt i E. coli |
Komponenter
| Komponenter nr. | Navn | 20427ES80 | 20427ES10 | 20427ES50 |
| 20427-EN | rTEV-protease (5 U/μL) | 200 μL | 2×1 ml | 10 ml |
| 20427-B | rTEV-buffer (10×) | 600 μL | 6 ml | 30 ml |
Forsendelse og opbevaring
rTEV Protease, opbevaret ved -25~-15oC i 6 måneder; Gem på -85~-65oC i 1 år.
rTEV-buffer, lagret ved -25~-15oC i 1 år.
Bemærk: Det anbefales at opbevare hver komponent separat, når du modtager varerne eller bruger den første gang for at undgå gentagen frysning og optøning.
Figurer
Figur 1. Verifikation af spaltningsaktivitet af UCF.METM rTEV Protease
Bemærk: Brug af et fusionsprotein (3 μg) copnår UCF.METM rTEV Protease-spaltningssted som substrat, UCF.METM rTEV-protease blev tilsat ved henholdsvis 10, 5 og 3 U. Reaktionen blev udført ved 30°C oC i 1 time, og spaltningseffekten blev påvist ved agarosegelelektroforese. Resultaterne viste, at når mængden af UCF.METM rTEV-protease var mere end 3 U, den kunne spalte substratet effektivt med en spaltningseffektivitet på >90%.
Dokumenter:
Sikkerhedsdatablad
Manualer
Betaling og sikkerhed
Dine betalingsoplysninger behandles sikkert. Vi gemmer ikke kreditkortoplysninger og har heller ikke adgang til dine kreditkortoplysninger.
Forespørgsel
Du kan også lide
FAQ
Produktet er kun til forskningsformål og er ikke beregnet til terapeutisk eller diagnostisk brug hos mennesker eller dyr. Produkter og indhold er beskyttet af patenter, varemærker og ophavsrettigheder ejet af Yeasen Biotechnology. Varemærkesymboler angiver oprindelseslandet, ikke nødvendigvis registrering i alle regioner.
Visse applikationer kan kræve yderligere tredjeparts intellektuelle ejendomsrettigheder.
Yeasen er dedikeret til etisk videnskab og mener, at vores forskning bør adressere kritiske spørgsmål og samtidig sikre sikkerhed og etiske standarder.