Rekombinant ekspression i Escherichia coli er et relativt simpelt og omkostningseffektivt middel til at producere nogle proteiner og plasmid-DNA. Under processen med produktproduktion ved hjælp af Escherichia coli er der stor mulighed for kontaminering af værtscelleproteiner (HCP'er) fra Escherichia coli, hvilket kan reducere effektiviteten af ​​terapeutiske lægemidler og forårsage uønsket toksicitet eller immunrespons. Derfor er det under produktion og oprensning af terapeutiske lægemidler til mennesker eller dyr nødvendigt at minimere indholdet af denne urenhed så meget som muligt.

ELISA er en enkel, meget følsom og objektiv metode til påvisning af HCP'er. Dette sæt bruger det eksperimentelle princip med dobbelt-antistof sandwich enzym-linked immunoassay (ELISA) til at påvise den resterende mængde af E.coli HCP. For at påvise E.coli HCP-rester tilsættes E.coli HCP-standarden og prøven, der skal testes, til enzymmærket, der er præcoatet med anti-E.coli HCP-antistofplade (36712-A). Tilsæt derefter fortyndet biotin-mærket E.coli HCP-detektionsantistof (36712-C), og tilsæt til sidst Streptavidin-HRP (SA-HRP) (36712-D) for at danne antistof+antigen+antistof ‐Biotin+ SA‐HRP-kompleks. Efter vask af pladen tilsættes TMB-farvefremkalderopløsning (36712-G) for at fremkalde farve. TMB blev transformeret fra farveløst til blåt under katalyse af HRP-enzym og til sidst transformeret til gult under virkningen af ​​stopopløsning (36712-H). Den gule nuance er positivt korreleret med mængden af ​​E.coli HCP påvist i prøven. Dette kit kan bruges til at optimere rensningsprocessen af ​​biologiske produkter, kontrollere urenheder i mellemprocessen og detektere frigivelse af slutprodukter.

Komponenter