Fig. 1. Desarrollo del modelo de colitis ulcerosa DSS

doCaracterísticas del modelo UC construido por Servicio de Seguridad Nacional

Se pueden inducir múltiples síntomas agudos o crónicos de CU, como: diarrea, heces con aspecto mucoso, sangre oculta en heces, heces con sangre, pérdida de peso, disminución de la actividad y mal color del pelaje, por diferentes dosis de DSS.

Tabla 1 Características histológicas del modelo de colitis DSS

Categoría del modelo de colitis del DSS	modelo de colitis aguda	Modelo de colitis en fase crónica
cambios histológicos	Hiperemia del colon, edema, acortamiento, fragilidad, aumento de la relación peso-longitud.	colon significativamente acortado
	Úlceras de colon de diversos grados	Engrosamiento de la mucosa, linfadenopatía
	Edema de la mucosa, pérdida de células caliciformes, hinchazón y destrucción de las criptas.	pérdida de células caliciformes, pérdida de criptas
	Diferentes grados de infiltración de células inflamatorias en la mucosa y submucosa, daño de las células epiteliales.	Pólipos adenomatosos y cambios tumorales en un pequeño número de animales

Ventajas del modelo DSS UC

1. Los protocolos son fáciles de implementar.
2. El modelo DSS UC se asemeja mucho a los síntomas de CU humanos con una alta repetibilidad.
3. Se pueden inducir varios síntomas característicos mediante el control de la dosis administrada de DSS, que fue única para el modelo DSS UC.
4. El modelo DSS UC se puede generar con una variedad de animales modelo ampliamente utilizados, como ratones, ratas, peces cebra, cerdos, moscas de la fruta, etc.
5. Se puede crear un modelo de cáncer asociado a colitis inducida por EII (CAC) con el uso combinado de azoximetano (AOM).

Ejemplo de construcción de modelo DSS UC

1. Ratones modelo（Haga clic para más detalles）

1) Ratones BALB/c, hembra, 6-8 semanas, 25 g;

2) Agua potable estéril con 3% DSS y filtro con membrana de 0,22 μm;

3) Se administró DSS durante 7 días;

4) Inflamación, como la del colon. Se observaron edema y congestión después de la tinción HE.

Fig.2 Resultados de la tinción HE de secciones de colitis aguda con DSS ^[1]

2. Modelo de pez cebra（Haga clic para más detalles）

1) Los embriones de pez cebra se obtuvieron del desove natural y se criaron hasta 1 día después de la fertilización (dpf) en una incubadora a 28ºC.5℃ en agua recirculante (60 μg/mL de sales marinas instantáneas) y suplementado con azul de metileno hasta 1 dpf;
2) Después de 1 dpf, utilice medio de cultivo de embriones E3 sin azul de metileno para cultivar hasta 3 dpf;
3) Prepare una solución de almacenamiento DSS al 10 % con medio E3;
4) Diluir DSS con medio de cultivo hasta la dosis máxima no letal (referencia de concentración de DSS: 0,5%);
5）Los peces cebra fueron tratados con 0,5 % DSS desde los 3 dpf hasta los 6 dpf, y los índices fueron.

Fig.3 El DSS induce una respuesta inflamatoria en el hígado del pez cebra ^[2]

3. Modelo de cerdo（Haga clic para más detalles）

1) Lechones Yorkshire a la edad de 4-5 días;

2) Dosis de DSS: 1,25 g/kg, ingesta oral durante 5 días;

3) Se observó una mayor tasa de captación de D-manitol.

Fig.4 La concentración de D-manitol inducida por DSS en lechones fue mayor que en el grupo de control. ^[3]

4. Modelo de Drosophila（Haga clic para más detalles）

1) Drosophila, hembra, 5-10 días;

2) Alimentación medio Se preparó con una solución de sacarosa al 5% que contenía 3% de DSS y 25 μg/mL bleomicina;

3) La Drosophila se cultivó a 29°C durante tres días con cambio diario del frasco de cultivo;

4) El DSS indujo la proliferación de células precursoras de ISC y tuvo un efecto letal en la drosophila.

Fig.5 DSS induce la proliferación de células precursoras de ISC en Drosophila ^[4] .

5.CCáncer asociado a olitisHaga clic para más detalles）

1) Ratones BALB/c, machos, de 7 semanas de edad;
2) El primer día, pesar y marcar a los ratones. Inyectarles por vía intraperitoneal 10 mg/kg de solución de AOM.
3) Llene el bebedero de las jaulas de los ratones con agua. Calcule entre 7 y 10 ml de agua por ratón por día. Alimentación durante una semana.
4) Reemplazar el agua potable con 2,5% DSS durante una semana;
5) Alimentar con agua potable regular durante dos semanas;
6) Repita los pasos 3 y 4 3 veces.

Figura 6 Diagrama esquemático del CAC inducida por AOM/DSS ^[5] .

Criterios de evaluación del modelo

1. Índice de actividad de la enfermedad ( Puntuación DAI )

El modelo se evaluó con múltiples parámetros incluyendo peso corporal, viscosidad fecal y sangre oculta, a través de los cuales se genera el DAI general.

Tabla 2 Reglas de puntuación del DAI

puntaje	Porcentaje de pérdida de peso	consistencia de las heces	sangre oculta en heces
0	0	normal	Negativo
1	1-5%	heces blandas	azul claro
2	5-10%	heces mucoides	azul
3	10-20%	heces blandas	azul oscuro
4	>20%	\	heces con sangre

2. Puntuación de cambio histológico

Los puntajes se asignaron para los indicadores anteriores en función de los cambios histológicos, excluyendo la formación de ganglios linfáticos, para el modelo de colitis aguda. Los reactivos de tinción HE utilizados son Cat#60524ES60.

Tabla 3 Puntuación de cambio histológico

puntaje	Úlcera(s)	Cambios epiteliales	infiltrado inflamatorio	ganglio(s) linfático(s)
0	0	normal	ninguno	ninguno
1	1	pérdida de células caliciformes	Infiltración de pericripta	1
2	2	pérdida de células caliciformes	Infiltración de la muscularis mucosae	2
3	3	eliminación de cripta	Infiltración general de la muscularis mucosa, engrosamiento de la mucosa.	3
4	>3	Pérdida extensa de criptas o regeneración polipoide	invasión de la submucosa	>3

3. Colon longitud

La longitud acortada del colon fue un fenotipo obvio para el modelo de colitis crónica, mientras que se pueden detectar cambios similares el día 8 para el modelo de colitis aguda.

4.Resumen

Se recomiendan experimentos preliminares para utilizar el modelo animal DSS UC con un control apropiado. Los requisitos mínimos son de 8 a 10 animales por grupo.

Enlaces a este recurso

1) Xiaona Gao, et al. Revista de Bioquímica Nutricional 83 (2020) 108438.
2）Jing Ma, et al. Acuicultura y pesca (2021) 548–557.
3）Connie J. Kim, et al. Revista de bioquímica nutricional 21 (2010) 468–475.
4）Fangfang Ren, et al.PNAS.2010.107 (49) 21064-21069.
5）Jia-Rong Huang, et al. Fronteras en farmacología. 2020.11:586885.

Caso de éxito de modelado con Yeasen DSS

Se generan modelos exitosos de colitis aguda con Yeasen DSS (Cat#60316ES, MW: 36000~50000) en 7 días con un fenotipo prominente como se muestra en la siguiente tabla.

Tabla 4 Construcción de diferentes tipos de modelos de enteritis con DSS

Modelo	Muestras de modelado	Plan de modelado	Resultados del modelado	Utilizar evaluación
colitis aguda	Ratones BALB/c, hembras, 6-8 semanas, 25 g	Beber libremente entre un 3% y un 5% de DSS durante 7 días consecutivos	Apareció el día 5, la longitud del colon se acortó, la tinción HE y la inflamación eran evidentes.	La velocidad de moldeo es rápida y el tiempo es corto. Consistente con las características del modelo de colitis aguda.
	Ratones C57BL/6, machos, 8 semanas, 20 g	3%-5% DSS por sonda, administración continua	Se presenta el día 5, acortamiento del colon, pérdida de peso, sangre en las heces, diarrea.	Alta tasa de moho y corta duración. Consistente con las características del modelo de colitis aguda.
colitis crónica	Ratón C57BL/6, macho, 8 semanas, 22 g	1-2% DSS por sonda, administración continua	Aparece el día 40, acortamiento del colon, pérdida de peso, sangre en las heces, diarrea.	Alta tasa de moldeo. Consistente con las características del modelo de colitis crónica.
cáncer de colon	Ratón C57BL/6, macho, 8 semanas, 21 g	1%-2% DSS ad libitum durante 5 días durante 3 semanas	14 semanas con longitud de colon acortada, pérdida de peso, tinción HE e inflamación evidente	Alta tasa de moldeo. Consistente con las características del modelo de cáncer de colon.

FAQ

Independientemente del modelo de colitis aguda por DSS o del modelo de colitis crónica por DSS, la gravedad y el éxito de la enteritis están relacionados con la especie de ratón (diferentes antecedentes genéticos), la concentración de DSS y el ciclo de dosificación.

Tabla 5 Problemas comunes del modelado de colitis por DSS

Posibles problemas	posible razón	Solución sugerida
Alta mortalidad en ratones	Concentración de DSS demasiado alta	Disminuir la concentración de DSS administrada
Ratones sin síntomas de enteritis o con síntomas leves	Concentración de DSS demasiado baja	Aumentar la concentración de dosis de DSS; disminuir el intervalo entre ciclos (10-14 días)
En el mismo grupo de ratones, los síntomas de enteritis varían mucho	tapa de botella obstruida	Revise diariamente el bebedero del ratón

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PAGproducto norteamo	AArtículo norteocre oscuro	Especificación
Sal sódica de sulfato de dextrano (DSS), grado de colitis, peso molecular: 36 000 ~ 50 000	60316ES25/60/76/80	25 g/100 g/500 g/1 kg
Azoximetano (OMA)	60751ES03/08/10	1 mg/5 mg/10 mg
MolPure® Kit de ADN de heces	18820ES08/50/70	5 toneladas/50 T/200 yo
MolPure® Kit de ADN de heces y suelos Mag48 FA	18528ES48	48T
MolPure®Kit de ADN de suelo y heces de Mag	18526ES20/50/70	20 T/50 T/200 yo
Kit de tinción de hematoxilina y eosina	60524ES60	2 x 100 ml
Kit de prueba de sangre oculta en heces y orina	60403ES60	100 toneladas
Solución de tinción con ácido peryódico de Schiff (AB-PAS) de azul alcián	60534ES50/60	6×50 ml/6×100 ml/

PAGArtículos publicados con nuestros reactivos

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