Introducción del producto

La colagenasa es una clase de endonucleasas que pueden reconocer específicamente la secuencia Pro-X-Gly-Pro (que ocurre con frecuencia en el colágeno y rara vez se encuentra en otras proteínas) y escindir el enlace peptídico entre el aminoácido neutro (X) y la glicina (Gly) en esta secuencia, y puede hidrolizar el colágeno en el tejido conectivo.

Muchas proteasas son capaces de hidrolizar péptidos de colágeno monocatenarios y desnaturalizados, pero la colagenasa es la única proteasa que puede degradar fibras de colágeno naturales con una estructura superenrollada de tres cadenas, y se encuentra ampliamente en los tejidos conectivos, siendo la más potente de ellas la colagenasa "cruda" secretada por la bacteria anaeróbica Clostridium histolyticum.

La colagenasa de Yeasen se deriva de Clostridium histolyticum, que es un extracto "grueso" enzimático, que no solo contiene colagenasa que puede degradar el colágeno natural y las fibras reticulares, sino que también contiene algunas otras proteasas como polisacaridasas, lipasas, etc., que pueden hidrolizar eficazmente otras proteínas, polisacáridos y lípidos en la matriz extracelular del tejido conectivo y el tejido epitelial, por lo que es más adecuado para la digestión de tejidos.

En la actualidad, la colagenasa bacteriana en el mercado se divide principalmente en cinco tipos según la diferencia en la actividad de la colagenasa: colagenasa tipo I, tipo II, tipo III, tipo IV y tipo V.

Elección de colagenasa

Nombre del producto	Apariencia	Actividad enzimática	Ámbito de aplicación
Tipo I Colagenasa）	Polvo cristalino de color marrón o tostado	≥250 U/mg sólido	Contiene actividad (colagenasa, caseinasa, clostridios y tripsina) para el aislamiento de células de tejido epitelial, pulmonar, graso y suprarrenal.
Tipo II Colagenasa）	Polvo cristalino de color marrón o tostado	≥125 U/mg sólido	Contiene más actividad de clostridasa y es adecuado para el aislamiento de células de tejido de hígado, huesos, tiroides, corazón y glándulas salivales.
Tipo III Colagenasa）	Polvo cristalino de color marrón o tostado	≥100 U/mg sólido	Contiene una baja actividad proteolítica, lo que es eficaz para la parte de unión del tejido digestivo y se utiliza a menudo para la disociación de células de tejido de mamíferos.
Tipo IV Colagenasa）	Polvo cristalino de color marrón o tostado	≥125 CDU/mg sólido*	Contiene baja actividad de tripsina y se utiliza comúnmente en la preparación de células para la integridad de los islotes y receptores.
Tipo V Colagenasa）	Polvo cristalino de color marrón o tostado	≥125 CDU/mg sólido*	Contiene al menos 7 componentes de proteasa, que pueden utilizarse para el aislamiento del tejido de los islotes pancreáticos y la separación del tejido conectivo en células individuales.

*CDU = unidades de digestión de colágeno

Características del producto

1. Alta eficiencia de digestión: el extracto enzimático crudo de Clostridium histolyticum tiene una alta eficiencia de digestión para los tejidos.
2. Depende de activadores: la colagenasa necesita depender de la actividad de enzimas activadoras como los cationes divalentes como el Ca²⁺y Zn²⁺.
3. Afectados por inhibidores: los inhibidores de la colagenasa incluyen EDTA, EGTA, etc.; el segundo son los iones de metales pesados ​​(Hg²⁺, Plomo²⁺, Cd²⁺); También existen algunos agentes químicos como la cisteína, histidina, DTT, 2-mercaptoetanol, o-fenantrolina, etc., que también tienen efectos inhibidores sobre la colagenasa.
4. Fuerte resistencia a las interferencias: el colágeno no se verá afectado por el suero utilizado para cultivar células.

Precauciones de uso

1. Uso: Disolver en Hank's, Earle's u otras soluciones salinas equilibradas, la concentración de trabajo recomendada es 0,05% ~ 0,5% (p/v)
2. Temperatura de almacenamiento: 2-8°C
3. Sugerencias de uso:

(1) Para el estudio de la estructura y biosíntesis del colágeno, a menudo se utilizan preparaciones de colagenasa de mayor pureza y no se utilizan otras actividades proteolíticas.

(2) Para la disociación de tejidos, a menudo se utilizan preparaciones de colagenasa cruda, como elastasa, tripsina o papaína.

Preguntas frecuentes

1. Mala digestión durante el experimento.

(1) Si es causada por una actividad enzimática débil o por iones de calcio insuficientes, la colagenasa debe almacenarse a baja temperatura y en condiciones secas, y la solución de colagenasa debe congelarse después de la alícuota.

(2) Si es causado por una cantidad insuficiente de iones de calcio, la concentración de iones de calcio en la solución de colagenasa debe ser de 5 mM.

2. La muerte celular ocurre durante el uso

(1) Si hay un exceso de proteasa, se debe reducir el tiempo de contacto con la proteasa o se debe agregar albúmina o suero inactivado.

(2) Si el pH cambia, se debe utilizar un tampón (por ejemplo, HBSS); Verifique y reajuste su pH con frecuencia

(3) Si hay muy poco oxígeno, la solución digestiva debe ventilarse con aire estéril.

3. Las células resultaron dañadas durante el experimento.

Si es causado por demasiada proteasa, se debe reducir la cantidad de proteasa o se debe agregar albúmina o suero inactivado.

Realizar pedidos

Número de catálogo	Nombre del producto	Tamaño
40507ES60	Colagenasa I	100 mg, 1 g
40508ES60	Colagenasa II	100 mg, 1 g
40509ES60	Colagenasa III	100 mg
40510ES60	Colagenasa IV	100 mg, 1 g
40511ES60	Colagenasa V	100 mg

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