El cultivo celular es la piedra angular de muchas aplicaciones de investigación, desde el desarrollo de fármacos hasta la terapia génica. Sin embargo, mantener cultivos saludables y proliferantes puede ser un desafío sin el enfoque y las herramientas adecuadas. Ya sea que sea un científico experimentado o que sea nuevo en el cultivo celular, optimizar cada paso del proceso puede marcar la diferencia. En esta guía, le guiaremos a través de cinco consejos esenciales para garantizar que sus cultivos celulares prosperen, desde la digestión hasta la prevención de la contaminación.
1. Perfeccionando la digestión celular
La digestión celular es un paso crucial en los experimentos de cultivo celular, ya que facilita el desprendimiento de las células de la superficie del cultivo y su separación en una suspensión unicelular para el subcultivo y los análisis posteriores. La elección de la enzima de digestión adecuada puede mejorar la eficiencia de la separación celular, reducir el daño celular y garantizar un progreso experimental sin problemas. Para ayudarlo a seleccionar la enzima de digestión más adecuada para sus necesidades, hemos compilado una guía sobre varios productos enzimáticos de uso común y sus características. Puede elegir el producto más apropiado según el tipo de célula, los requisitos experimentales y las aplicaciones posteriores.
Enzimas digestivas comunes
- Tripsina (utilizada para hidrolizar proteínas intercelulares)
- Tripsina recombinante (libre de contaminación de origen animal, adecuada para aplicaciones biofarmacéuticas)
- Colagenasa (utilizada para degradar las fibras de colágeno, ideal para la digestión de tejidos)
- Tripsina compuesta (como Accutase, que conserva mejor los antígenos de la superficie celular)
- Alternativas a la tripsina (como TrypLE™, perfecta para cultivos de células sin suero)
- Dispasa II (para separar diversos tejidos y células).
Cada enzima tiene sus aplicaciones y ventajas únicas, y seleccionar la correcta puede mejorar significativamente la eficiencia experimental y la calidad de sus resultados.
| Nombre del producto | Número de gato | Especificación |
| PerfCel™l Tripsina-EDTA (0,25%), No Rojo fenol | 40123ES60 | 100 ml |
| Célula de rendimiento™ Tripsina sin EDTA (0,25 %), sin rojo fenol | 40124ES60 | 100 ml |
| Célula de rendimiento™ Tripsina (0,25%), rojo fenol | 40126ES60 | 100 ml |
| Célula de rendimiento™ Tripsina-EDTA (0.25%), rojo fenol | 40127ES60 | 100 ml |
| Tripsina 1:250 (polvo) | 40101ES25 | 25 gramos |
| Célula de rendimiento™ Tripsina recombinante（polvo） | 40512ES10/60 | 10 mg/100 mg |
| 20416ES60 | 100 micrasgramo | |
| Enzima PerfCel Tryzyme™ Express (1X), rojo fenol | 40134ES60 | 100 ml |
| Enzima PerfCel Tryzyme™ Express (1X), No Rojo fenol | 40135ES60 | 100 ml |
| Solución de disociación celular ACCUTASE | 40506ES60 | 100 ml |
| Dispasa II | 40104ES60/80 | 100 mg/1 g |
2. Creación del entorno de cultivo ideal
Un cultivo saludable comienza con el entorno adecuado, que incluye una temperatura y un pH adecuados y un medio óptimo para el tipo de célula. Yeasen ofrece una gama de medios de cultivo celular que están específicamente formulados para sustentar una variedad de líneas celulares, proporcionándoles los nutrientes esenciales y los factores de crecimiento que necesitan.
Cultivo de células sin suero Ha surgido como una tecnología fundamental en la investigación biológica, garantizando repetibilidad, consistencia y estándares éticos. Los cultivos celulares tradicionales se basan en suero bovino fetal (FBS), lo que genera variabilidad en los resultados experimentales y riesgos éticos relacionados con el origen animal. Para abordar estos desafíos, muchos investigadores están optando cada vez más por medios de cultivo sin suero.
En la investigación inmunológica, cultivo de linfocitos desempeña un papel crucial, especialmente en los campos de la respuesta inmunitaria, el desarrollo de vacunas y la inmunoterapia contra el cáncer. Como componentes centrales del sistema inmunitario, los linfocitos requieren condiciones de cultivo específicas para proliferar y activarse in vitro. Yeasen proporciona medios de cultivo diseñados específicamente para la proliferación y activación de linfocitos, que pueden simular con precisión las respuestas inmunitarias in vivo y ayudar a los investigadores a obtener datos más fiables en la activación de células T, la producción de anticuerpos y la investigación inmunológica celular.
Además, cultivo de organoides representa otro avance importante en la tecnología de cultivo celular. Los organoides son estructuras celulares tridimensionales que pueden simular tejidos humanos y funciones de órganos in vitro, lo que proporciona una nueva plataforma de investigación para el modelado de enfermedades, la detección de fármacos y la medicina regenerativa. La estructura tridimensional de los organoides replica mejor la complejidad y las funciones fisiológicas de los órganos humanos y se ha convertido en una herramienta importante para estudiar el desarrollo de los órganos, los mecanismos de las enfermedades y las respuestas terapéuticas.
| Nombre del producto | Número de gato | Especificación |
| Medio de cultivo de células de insectos CelCulSF™（Sin suero） | 40140ES | 1000 ml |
| Medio de cultivo celular CelCulSF™ 293（Sin suero） | 40141ES | 1000 ml |
| Medio de cultivo de linfocitos CelCulSF™（Sin suero） | 40142ES | 1000 ml |
| Medio de cultivo de células de hibridoma CelCulSF™（Sin suero） | 40143ES | 1000 ml |
| Célula madre mesenquimal CelCulSF（MSC）Medio de cultivo（Sin suero） | 40144ES | 500 ml |
| Medio de cultivo celular adherente CelCulSF™（Reducido en suero） | 40145ES | 1000 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides intestinales (ratón) | 41426ES60/76 | 100/500 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides para cáncer intestinal (humano) | 41427ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides de cáncer gástrico (humano) | 41428ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides para cáncer de hígado (humano) | 41429ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides para cáncer de mama (humano) | 41430ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides para cáncer de pulmón (humano) | 41431ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Esofágico Medio de crecimiento de organoides cancerosos (humanos) | 41432ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Cebrary® Medio de crecimiento de organoides para cáncer de ovario (humano) | 41433ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
| Medio de crecimiento de organoides para cáncer de páncreas Cebrary® (humano) | 41434ES50/60/76 | 50/100/500 ml |
3.Transfección eficiente para una expresión genética de alta calidad
La transfección celular es una técnica crucial en la investigación biomédica, que permite la introducción de ácidos nucleicos exógenos (como ADN, ARNm, ARNi y miARN) en las células para la expresión génica, el silenciamiento o los estudios funcionales. Con diversos tipos de células y ácidos nucleicos, la selección del reactivo de transfección adecuado es esencial para el éxito de los experimentos.
Reactivos de transfección química, incluidos Formulaciones a base de liposomas, PEI y fosfato de calcio, cada uno ofrece ventajas únicas. Yeasen Biology ha desarrollado una línea de productos diversa y optimizada para diversas aplicaciones de transfección, incluida la transfección de alta eficiencia para ADN, ARNi, miARN y ARNm, con éxito verificado en más de 40 líneas celulares. Estos reactivos ofrecen una alta eficiencia de transfección, amplios escenarios de aplicación y productos de calidad GMP para producción comercial, lo que garantiza resultados confiables y efectivos en investigación y aplicaciones industriales.
| Número de gato | Nombre del producto | Ácido nucleico | Solicitud |
| 40802ES | ADN | Reactivo de transfección de liposomas de alto rendimiento | |
| 40804ES | Vuelta al cole | Mejorar la capacidad de infección lentiviral. | |
| 40806ES | Reactivo de transfección de ARNi/miARN in vitro Hieff Trans® | ARNi, ARNmi, ASO | Reactivos de transfección específicos de siRNA y miRNA con alta eficiencia de eliminación. |
| 40808ES | ADN, ARNi, miARN | Reactivo de transfección de liposomas mejorado que puede realizar transfecciones de ADN y ARN en varios tipos de células, y aún muestra buenos efectos en células difíciles de transfectar. | |
| 40809ES | ARNm | Reactivo de transfección específico de ARNm con alta eficiencia de transfección en una variedad de tipos de células. | |
| 40815ES | ADN | Ampliamente aplicable para la expresión de proteínas y el empaquetamiento viral (forma de polvo). | |
| 40816ES | Polietilenimina lineal (PEI) M de Hieff Trans®W40000（lisis rápida） | ADN | |
| 40820ES | ADN | Reactivos de transfección dedicados para el empaquetamiento viral, capaces de lograr mayores rendimientos para el empaquetamiento viral de AAV y LV | |
| 40821ES | ADN | ||
| 40823ES | ADN | La más alta eficiencia de transfección. Especialmente adecuado para la producción de AAV en cultivos en suspensión, con rendimientos más altos. |
4. Criopreservación de células para uso a largo plazo
La congelación de células es una técnica crucial para la conservación a largo plazo de las células, que sirve para prevenir la contaminación, mantener la consistencia experimental, facilitar el envío y establecer bancos de células. Los principales riesgos durante la congelación incluyen: Formación de cristales de hielo y daños en la solución.Para mitigar estos riesgos, es esencial emplear protocolos de congelación lenta y descongelación rápida. Los crioprotectores como el glicerol o el dimetilsulfóxido (DMSO) se utilizan habitualmente para reducir la formación de cristales de hielo y el estrés osmótico.
Yeasen ofrece dos soluciones de criopreservación especializadas: CellStore Freezing para células de mamíferos y Insect Cell Store Freezing para células de insectos. Ambos productos cuentan con fórmulas únicas que permiten la congelación directa a -70 °C sin procedimientos de enfriamiento complejos y brindan altas tasas de supervivencia celular al descongelarse, especialmente para células que son sensibles al DMSO o que tienden a aglutinarse. Estas soluciones no contienen componentes de suero ni proteínas, lo que garantiza que no haya contaminación de fuentes bovinas y son ideales para cultivos sin suero.
| Nombre del producto | Número de gato | Especificación |
| Congelación de células de mamíferos | 40128ES50 | 5 x 10 ml |
| Congelación de células de mamíferos | 40128ES60 | 100 ml |
| Célula de insecto Conservación Congelación | 40129ES50 | 5 x 10 ml |
| Célula de insecto Conservación Congelación | 40129ES60 | 100 ml |
| Medio de congelación de células sin suero | 40151ES | 50 ml/100 ml |
| Medio de congelación de células sin suero (sin DMSO) | 40152ES | 100 ml |
| Medio de congelación de células sin suero (para células madre) | 40153ES | 100 ml |
| Medio de congelación de células sin suero (para células madre, sin DMSO) | 40154ES | 100 ml |
5. Prevención de la contaminación para cultivos saludables
La contaminación es un problema frecuente en los cultivos celulares, que a menudo da lugar a resultados deficientes y a una pérdida de tiempo de investigación. Reconocer los distintos tipos de contaminación es esencial para una prevención y una remediación eficaces.
Célula común contaminantes
- Bacteria
- Hongos
- Micoplasma
- Protozoos
- motas negras
- Virus
- entre especies
Las medidas preventivas incluyen el uso de antibióticos, la desinfección regular del equipo, el cumplimiento de las técnicas estériles y el mantenimiento de las áreas de trabajo limpias. En caso de detectar contaminación, generalmente se recomienda desechar los cultivos afectados, a menos que sean raros o valiosos; en tales casos, se deben tomar medidas para eliminar el contaminante. Se recomienda establecer líneas celulares de respaldo o adquirir nuevos cultivos.En determinadas situaciones, los tratamientos especializados dirigidos a contaminantes específicos pueden ayudar a restaurar los cultivos celulares. Mantener una higiene adecuada, garantizar una separación estricta de los equipos y mantener un entorno estéril son fundamentales para prevenir la contaminación y garantizar el éxito de los experimentos con cultivos celulares.
| Tipo | Nombre del producto | Número de gato | Especificación |
| Antibacteriano | Penicilina-Estreptomicina (100×), Adecuado para cultivo celular | 60162ES76 | 100 ml |
| 60230ES07/60 | 3.2/100 gramos | ||
| Sal de sulfato de gentamicina | 60214ES03/08/25 | 1/5/25 gramos | |
| Metronidazol | 60223ES25/60 | 25/100 mg | |
| Antimicótico | Anfotericina B | 60238ES01/03 | 100 mg/1 g |
| Nistatina | 60219ES08 | 5 gramos | |
| 60231ES03/08 | 1/5 mg | ||
| Detección de micoplasma | 40601ES10/20 | 10/20 ensayos | |
| Kit de detección de micoplasma en un solo paso MycAway™ Plus-Color | 40612ES25/60 | 25/100 toneladas | |
| Eliminación de micoplasma | Mi cAway™ Spray (listo para usar) | 40605ES02/03/08 | 1/2/10×500 ml |
| Mi cAway™ Tratamiento (1000×) - Reactivo de eliminación de micoplasma | 40607ES03/08 | 1/5 ml | |
| Mi cAway™ Profiláctico (2000)×) - Reactivo de prevención de micoplasma | 40608ES03/08 | 1/5 ml | |
| 40609ES60 | 100 ml | ||
| 40610ES60 | 100 ml |
Conclusión
Optimizar los procesos de cultivo celular es fundamental para producir resultados confiables y reproducibles.Desde la selección de las enzimas adecuadas para la digestión hasta la prevención de la contaminación, cada paso del flujo de trabajo es importante. Al incorporar reactivos y técnicas de alta calidad de Yeasen, puede lograr cultivos celulares más saludables y productivos, lo que conduce a experimentos y resultados de investigación más exitosos.
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