¿Aún te preocupa la baja eficiencia de la recombinación homóloga de fragmentos múltiples o superlargos y el pequeño número de colonias?

Aún así, para el portador o fragmento es más precioso, de bajo rendimiento, con el fin de ahorrar materias primas, el uso de un sistema pequeño de ligadura de baja concentración, pero la eficiencia de ligadura es baja y molesta.

Producto YEASEN: Eficiencia de ligadura significativamente mejorada, de baja concentración, con sistema pequeño y fragmentos ultralargos, alta tasa de clonación positiva, que le ayuda a completar fácilmente la ligadura.

Comparación de la clonación en un solo paso con los métodos tradicionales de clonación por restricción enzimática

Ventaja del producto

Orientación: Clonación de 1-7 fragmentos de ADN en un solo paso.

Simple: se pueden ligar múltiples fragmentos en un tubo.

Rápido: Ligadura más rápida en 5 min.

Alta eficiencia: Alta tasa de clonación positiva.

Sistema pequeño: el sistema de ligadura total puede ser tan bajo como 6 μL.

Sobrelongitud: superior a 25 kb (longitud del transportador + fragmento) para ligadura.

Actuación Mostrar

• Recombinación eficiente de un único fragmento de un sistema pequeño de 6 μL

Figura 1 10 ng de fragmentos individuales de bajo aporte fueron ligados en el estado de células receptivas sin reanimación del sistema pequeño de 6 μL.Los resultados mostraron que 10923ES tuvo un mejor rendimiento que los productos de la competencia, con una alta eficiencia de ligación, más colonias y una tasa positiva del 100%. AB: Placa de conversión reconstituida. La relación molar del portador (10 kb) al fragmento de inserción (1 kb) fue de 1:2. C: Identificación por PCR del fragmento de inserción. M: YEASEN 10505ES. Volumen del portador: 40 ng/6 μL Sistema de reacción, condiciones de reacción: 50℃, 15 min.

• Recombinación eficiente de múltiples fragmentos

Figura 2 Seis fragmentos (7,6 kb) ligados. Los resultados mostraron que 10923ES tuvo un mejor rendimiento que los productos de la competencia, con más colonias y una tasa positiva del 100%. AB: Placa de conversión reconstituida. La relación molar del portador (11,6 kb) al fragmento de inserción (7,6 kb) fue de 1:2. C: Identificación por PCR del fragmento de inserción. M: YEASEN 10505ES, longitud de PCR 2,6 kb. Volumen del portador: 200 ng/20 μL Sistema de reacción, condiciones de reacción: 50℃, 50 min.

• Recombinación eficiente de múltiples fragmentos en baja concentración

Figura 3 Ligar por separado los fragmentos cinco y seis de baja concentración. Los resultados mostraron que 10923ES exhibió conectividad estable a bajas concentraciones, con un alto recuento bacteriano y una tasa de positividad del 100%. AB: Placa de conversión recombinante. CD: Imagen de electroforesis de identificación por PCR de fragmento de inserción, M: YEASEN 10505ES, longitud de PCR 2,6 kb.

• Estabilidad del reactivo

Figura 4 Después de colocarlo a 37℃ durante 7 días, los resultados mostraron que 10923ES permaneció estable al unir los cinco y seis fragmentos en concentraciones bajas. AF: Placa de conversión recombinante. GH: Imagen de electroforesis de identificación por PCR de fragmento de inserción, M: YEASEN 10505ES, longitud de PCR 2,6 kb.

Caso de cliente

• Reorganización eficiente de pequeños sistemas

Fig. 5 10923ES se ligó a un solo fragmento en un Sistema de reacción pequeño de 10 μL, con una tasa positiva del 100%. A: Placa de conversión reconstituida. B: Identificación por PCR del fragmento insertado. Tamaño del transportador: 5631 pb; Tamaño del fragmento diana: 1384 pb.

Figura 6 10 μL de clon de mutación puntual y de unión de fragmentos únicos de sistema pequeño, tasa positiva del 100%. A y C: Placas de transformación por recombinación. B: Identificación por PCR de los fragmentos de inserción, las pistas 1-5 son colonia 1, colonia 2, control negativo, control positivo (genoma como plantilla), control positivo (fragmento purificado por PCR como plantilla). D: Electroforegrama de identificación por PCR de los fragmentos de inserción.

• Recombinación eficiente de fragmentos cortos de baja concentración

Fig. 7 10923ES conexión del fragmentos de baja concentraciónEn comparación con los productos de la competencia, el número de colonias fue alto y la tasa positiva (10/11) fue > 90,9%. AB: Placa de conversión reconstituida. C: Identificación por PCR del fragmento de inserción. Tamaño del transportador: 3000 pb; tamaño del fragmento diana: 441 pb.

• Ligadura multisegmento rápida y eficiente

Higo.8 10923ES ligadura de cuatro segmentos, alta GC y conexión de combinación de segmento corto, en comparación con la marca S, tiene un recuento bacteriano más alto de 10923ES y una tasa positiva del 100%. D: Tableta de conversión recombinante. E: Mapa de identificación de secuenciación de fragmentos insertados. F: La secuenciación de Sanger confirmó la conexión exitosa entre el vector y los fragmentos, y la secuenciación en el sitio de conexión fue correcta.

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Canal de pedidos 10923ES

Orientación del producto	norteamo	Arte.No	SEspecificaciones
Se unieron 1 a 7 fragmentos en un solo paso y la reacción de recombinación se completó en los 5 minutos más rápidos.	Clon de HieffMT. Kit de clonación en un solo paso Universal II	10923ES20/50	20 toneladas/50 toneladas

Rexaltado PAGproductos

Orientación del producto	norteamo	Arte.No	SEspecificaciones
PCR de alta fidelidad	2× Caña altaMT. Mezcla maestra de PCR AdvanceFast (con colorante)	10164ES03/08	1 ml/5 x 1 ml
Actualización rápida de PCR, puede ser PCR de colonias y adecuada para amplificación de plantillas complejas	2×HiefMT. Mezcla maestra para PCR Ultra-Rapid II HotStart	10167ES03/08	1 ml/5 x 1 ml