El ácido nucleico es la base de toda la investigación en biología molecular. Además, la calidad del ácido nucleico extraído es también uno de los factores clave que determinan el éxito o el fracaso de los experimentos posteriores. Al desarrollar reactivos de extracción de ácidos nucleicos, además de los componentes químicos convencionales, algunos ácidos nucleicos o enzimas de moléculas pequeñas pueden mejorar en gran medida la eficiencia de la extracción o eliminar la interferencia de sustancias no deseadas y convertirse en componentes importantes en la extracción de ácidos nucleicos.
Sobre sustancias auxiliares para la precipitación de ácidos nucleicos
ARN transportador
- Concepto y función de ARN transportador
El ARN transportador, también conocido como agente de precipitación de ácidos nucleicos en chino, en el proceso de extracción de ácidos nucleicos, los tubos de centrífuga utilizados para la extracción están hechos principalmente de polipropileno. Hay electricidad estática en la pared del tubo, que adsorberá los ácidos nucleicos. El uso de ARN transportador en el proceso de extracción y purificación puede ayudar a los ácidos nucleicos a eliminar el efecto electrostático, garantizar que los ácidos nucleicos puedan adsorberse bien en la columna de purificación, mejorar la eficiencia de elución y, por lo tanto, lograr la recuperación de ácidos nucleicos en la muestra tanto como sea posible.
- Tipos comunes de ARN transportador
Como sustancia auxiliar para la precipitación de ácidos nucleicos, el ARN transportador tiene múltiples tipos, como la sal de potasio PolyA, el ARN total de E. coli, el ARN total de levadura, el ARNt, etc.
- Problemas comunes en el uso de ARN transportador
¿Se puede seguir utilizando el ARN transportador después de haberlo dejado a temperatura ambiente durante un tiempo? ¿La degradación del ARN transportador afecta su uso? ¿El ARN transportador afecta a los experimentos posteriores?
El ARN portador se disuelve en un protector de ARN. El ARN portador líquido tiene poco impacto cuando se coloca a 37 °C o a temperatura ambiente durante un período corto (dentro de los 7 días). Básicamente, el ARN portador es un fragmento en el rango de 500 nt a 1000 nt. Una ligera degradación no afecta el uso normal. Para aplicaciones posteriores, como PCR cuantitativa fluorescente, el ARN portador no tiene efecto en el valor Ct. Para aplicaciones posteriores, como NGS, se puede agregar según las necesidades reales.
- Introducción del producto ARN transportador
El ARN transportador de Yeasen es ARN derivado de levadura. No contiene enzimas DNasa o RNasa residuales, y el contenido residual de proteína y ADN es extremadamente bajo. Se puede utilizar en experimentos como la extracción de ácidos nucleicos virales y la extracción de trazas de ADN. Los ácidos nucleicos extraídos se pueden utilizar en experimentos posteriores como RT-PCR y RT-qPCR. El producto está disponible en formulaciones líquidas y en polvo liofilizado para un uso directo conveniente, transporte a larga distancia y almacenamiento.
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
ARN transportador, 6 μg/μL | 19701ES | 1 ml / 5 ml / 100 ml | Conservado entre -25 y -15 °C. La vida útil es de 2 años. |
Polvo de ARN transportador, 216 μg/tubo | 19703ES | 1 tubo / 100 tubos / 1000 tubos | Conservado a temperatura ambiente.La vida útil es de 2 años. |
19704ES | 1 tubo / 100 tubos / 1000 tubos | Conservado a temperatura ambiente.La vida útil es de 2 años. |
Solución de acrilamida lineal
- Concepto y función de la solución lineal de acrilamida
La acrilamida lineal, con el nombre en inglés Linear Acrylamide (Poliacrilamida Lineal, abreviado como LPA), es un coprecipitante que ayuda a precipitar los ácidos nucleicos durante el proceso de purificación de ácidos nucleicos.
- Características de la solución de acrilamida lineal
Es un portador neutro y de origen no biológico, por lo que no contiene potencial contaminación por ácidos nucleicos o nucleasas.
No interferirá con las lecturas de A260/A280 y no inhibirá las actividades de la polimerasa y las endonucleasas de restricción.
Es compatible con otras aplicaciones posteriores de biología molecular como PCR y digestión enzimática.
Puede ayudar a precipitar ADN y ARN (incluidos oligonucleótidos) en cantidades de picogramos o superiores. La longitud de fragmento recuperable es superior a 20 nucleótidos y se pueden utilizar tanto ácidos nucleicos monocatenarios como bicatenarios.
- Introducción del producto
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
Solución de acrilamida lineal (5 mg/ml) | 10408ES | 1 ml | Almacenado a 4 °C. La vida útil es de 3 años. |
Enzima auxiliar de extracción de ácidos nucleicos
ARNasa A
- Concepto y función de la ARNasa A
La ribonucleasa A (RNasa A), como endorribonucleasa, degrada específicamente los residuos de citosina (C) o uracilo (U) en el ARN monocatenario. La aplicación más común de la ribonucleasa A (RNasa A) es eliminar el ARN durante la preparación del ADN plasmídico o del ADN genómico. Además, este producto también se puede utilizar en experimentos de biología molecular, como ensayos de protección de la ARNasa y análisis de secuencias de ARN.
- Características de la ARNasa A
La ARNasa A se obtiene del páncreas bovino. No hay contaminación de la endonucleasa y la exonucleasa desoxirribonucleasa. Se puede utilizar directamente sin precalentamiento y es resistente a entornos de alta temperatura.
- Introducción del producto
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
ARNasa A (100 mg/ml) | 10406ES | 1 ml | Conservado a -20°C. La vida útil es de 2 años. |
ARNasa A (10 mg/ml) | 10405ES | 1 ml | Conservado a temperatura ambiente.La vida útil es de 1 años. |
10407ES | 100 mg/1 g | Conservado a temperatura ambiente.La vida útil es de 2 años. |
Desoxirribonucleasa I (DNasa I)
La desoxirribonucleasa I (DNasa I), una endonucleasa presente en diversas células y tejidos, ataca y escinde el enlace fosfodiéster adyacente a las pirimidinas, lo que produce polinucleótidos con un grupo fosfato en el extremo 5' y un grupo hidroxilo en el extremo 3'. El producto de digestión mínimo promedio es un polímero de tetranucleótidos. La DNasa puede catalizar diversas formas de ADN, como el ADN monocatenario, el ADN bicatenario e incluso la cromatina (cuya tasa de escisión se ve afectada por las histonas). En experimentos de biología molecular, a menudo se utiliza para eliminar ADN de las proteínas o para introducir cortes en el ADN para insertar bases marcadas en el ADN.
2. Características de la DNasa I
El rango de trabajo óptimo de la DNasa I es pH 7-8, y su actividad depende del Ca2+ y puede ser activado por iones metálicos divalentes como Co2+, Mn2+, Zinc2+, etc. 5 mM Ca2+ puede proteger la enzima de ser hidrolizada. En presencia de Mg2+, esta enzima puede reconocer y cortar aleatoriamente cualquier sitio en cualquier cadena de ADN; mientras que en presencia de Mn2+Puede reconocer ambas cadenas de ADN simultáneamente y cortar casi en el mismo sitio.
3. Introducción del producto
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
Desoxirribonucleasa I (DNasa I) del páncreas bovino | 10607ES | 15 KU/10×15 KU | Conservado a -20°C. La vida útil es de 2 años. |
Desoxirribonucleasa I (DNasa I) del páncreas bovino | 10608ES | 25 mg/100 mg/1 g | Conservado a -20°C. La vida útil es de 2 años. |
Proteinasa K
1. Concepto y función de la proteinasa K
La proteinasa K (proteinasa K) es una serina proteasa con una amplia gama de actividades de escisión. Su peso molecular relativo es de aproximadamente 29,3 kDa y puede escindir los enlaces peptídicos carboxilo-terminales de aminoácidos alifáticos y aromáticos. La proteinasa K tiene una amplia gama de aplicaciones y se puede utilizar en experimentos como la preparación de ADN cromosómico para electroforesis en gel de campo pulsado, transferencia Western y eliminación de nucleasas en preparaciones de ADN y ARN. Los agentes desnaturalizantes como SDS (1%) pueden aumentar su actividad.
2. Características de la proteinasa K
Derivado de una cepa de levadura genéticamente recombinante.
Libre de ARNasa y ADNasa.
Activo y estable en urea y SDS.
Activo en un amplio rango de pH (pH 4,0 - 12,0), y el rango de pH óptimo es pH 7,5 - 9,0.
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
10401ES | 100 mg/1 g/5 g/100 g | Conservado a 4°C. La vida útil es de 3 años. | |
Solución de proteinasa K (20 mg/ml) | 10412ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Conservado a 4°C. La vida útil es de 2 años. |
Solución de proteinasa K (20 mg/ml) | 10410ES | 1 ml/10 ml/25 ml/500 ml | Conservado a 4°C. La vida útil es de 2 años. |
Estabilizador de ARN
Solución estabilizadora de ARN para tejidos animales y vegetales
1. Función de la solución estabilizadora de ARN para tejidos animales y vegetales.
Las ARNasas están ampliamente presentes en el medio ambiente y es muy probable que degraden el ARN en muestras recién recolectadas de tejidos animales y vegetales, sangre, fluidos corporales, etc. El estabilizador de tejidos RNAsafe para tejidos animales y vegetales (RNAsafe Tissue Stabilizer) está especialmente desarrollado para estabilizar y proteger el ARN en muestras recolectadas. Como solución no tóxica, puede penetrar rápidamente en los tejidos e inactivar las ARNasas endógenas.
2. Características de la solución estabilizadora de ARN para tejidos animales y vegetales
Extremadamente fácil de operar: simplemente corte tejidos frescos en bloques de tejido de tamaño apropiado (≤0,5 cm) y sumérjalos en 5 a 10 veces el volumen de RNAsafe.
Largo período de estabilización: Los tejidos/células infiltrados con RNAsafe pueden almacenarse a 37 °C durante 1 día, a temperatura ambiente durante 1 semana, a 4 °C durante 4 semanas y para almacenamiento a largo plazo a -20 °C/-80 °C.
Amplia compatibilidad posterior: es compatible con casi todos los métodos de aislamiento de ARN, como el reactivo de extracción de ARN total HieffTM (número de catálogo: 10606ES60) y casi todos los kits de extracción de ARN comerciales, incluido el método de extracción en columna centrífuga y el método de purificación con perlas magnéticas.
Amplia aplicación de materiales: Se puede utilizar para la conservación de diversos tejidos animales y vegetales (como cerebro, corazón, hígado, páncreas, riñones, bazo, testículos, músculos, tallos y hojas de plantas, etc.), y también para levaduras, células de cultivo de tejidos, etc.
3. Introducción del producto
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
Estabilizador de tejidos RNAsafe RNAsafe | 10604ES60 | 100 ml | Conservado a temperatura ambiente. La vida útil es de 5 años. |
Productos relacionados
Nombre del producto | Producto Número | Especificación | Condiciones de almacenamiento y vida útil |
Lisozima | 10402ES | 5/50 gramo | Conservado a -20°C. La vida útil es de 3 años. |
Liticasa (10 U/μL) | 10403ES | 1500/3000/10000 U | Almacenado en -20°C. |
Caracolasa | 10404ES | 5/10 gramo | Conservado a 2-8°C. La vida útil es de 2 años. |
RNAsafe-ICE | 10605ES | 100 ml | Conservado a temperatura ambiente. La vida útil es de 2 años. |