Introducción a los anticuerpos de etiqueta
Los anticuerpos de etiqueta se utilizan para la detección y purificación de secuencias de etiqueta en varios vectores de expresión comerciales para analizar y determinar los niveles de expresión y las funciones de las proteínas objetivo. El principio detrás de su uso es la reacción antígeno-anticuerpo, donde estos anticuerpos de etiqueta pueden unirse específicamente a las proteínas fusionadas con la etiqueta correspondiente. A continuación, se incluye una breve lista de algunas etiquetas de proteínas comunes adecuadas para su uso con anticuerpos de etiqueta:
Tabla 1. Introducción a diferentes etiquetas de proteínas
| Etiqueta | Secuencia | Características | Escenarios aplicables |
| Bandera | Dime, dime | 1. Pequeño peso molecular, no cambia la función de la proteína de fusión, más hidrófila que etiquetas similares; 2. Contiene el sitio de reconocimiento de enteroquinasa (DDDDK), que es conveniente para la eliminación de etiquetas cuando se fusiona en el extremo N de la proteína objetivo. | Adecuado para la purificación y detección de proteínas de fusión de bajo nivel de expresión en sistemas de expresión eucariotas. |
| JA | YPYDVPDYA | Derivado del determinante del antígeno de superficie de hemaglutinina del virus de la influenza; evitar su uso en experimentos relacionados con células apoptóticas. | Adecuado para la purificación y detección de proteínas. |
| Mi c | Glu-Gln-Lys-Leu-Ile-Ser-Glu-Glu-Asp-Leu | Derivado del protooncogén humano Myc; evitar su uso en experimentos relacionados con células humanas. | Generalmente no se utiliza para la purificación de proteínas, es adecuado para la detección. |
Los productos de purificación por afinidad de anticuerpos con etiquetas de Yeasen están elaborados a partir de anticuerpos monoclonales IgG de ratón de alta calidad como materia prima. A través de un proceso llamado "acoplamiento covalente", estos anticuerpos se acoplan de manera direccional y eficiente a matrices de agarosa o a las superficies de nanoperlas magnéticas. Esto no solo reduce la unión de proteínas no específicas, sino que también logra una mayor carga de anticuerpos en el medio. Además, proporciona productos de purificación de anticuerpos con etiquetas adecuados para diversos requisitos de purificación, incluidas diferentes resinas de purificación de anticuerpos con etiquetas y perlas inmunomagnéticas, lo que facilita la purificación de proteínas etiquetadas y los experimentos de inmunoprecipitación mediante métodos manuales o automatizados.
Guía de selección de productos de purificación de anticuerpos con etiqueta Yeasen
| Serie de productos | Serie de resinas purificadoras | Serie de perlas inmunomagnéticas | |||||
| Número de producto | 20584ES | 20586ES | 20587ES | 20565ES | 20566ES | 20567ES | 20564ES |
| Nombre del producto | Perlas magnéticas anti-HA | Perlas anti-MycMag | |||||
| Ligandos | Anticuerpos monoclonales IgG de ratón de alta calidad | Anticuerpos monoclonales de ratón anti-GFP/Flag/HA/Myc de alta calidad | |||||
| Capacidad de unión de proteínas | ≥1,1 mg de proteína de fusión marcada con bandera/ml de gel ≥1,5 mg de proteína de fusión marcada con HA/ml de gel ≥0,9 mg de proteína de fusión marcada con Myc/ml de gel | ≥0,8 mg de proteína de fusión marcada con GFP/mg rosario ≥0,6 mg de proteína de fusión marcada con bandera/mg de perlas ≥0,4 mg de proteína de fusión marcada con HA/mg de perlas ≥0,5 mg de proteína de fusión marcada con Myc/mg rosario
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| Matriz | Gel de agarosa reticulado al 4% | Perlas magnéticas a base de sílice | |||||
| Tamaño de partícula | 45-165 µm | 200 nm | |||||
| Ventajas | Baja unión no específica, alta capacidad | Alta pureza, alta capacidad, alta especificidad, uso conveniente con rejilla magnética. | |||||
| Aplicaciones recomendadas | Purificación por afinidad de proteínas de fusión marcadas a cualquier escala, inmunoprecipitación (IP) | Inmunoprecipitación (IP), Co-inmunoprecipitación (COIP) | |||||
Datos de prueba
1. Prueba de comparación de purificación entre el gel de afinidad anti-bandera de Yeasen (20584ES) y la marca S*.
Figura 1. Comparación de gel anti-bandera de Yeasen (a) vs. Brand S* (b) Imagen de gel de prueba
M: Marcador de proteína; 1: Lisado precolumna de proteínas Flag-N, M, C; 2: Permeado postcolumna de proteínas Flag-N, M, C; 3: Elución (elución a pH 2,7); 4: Elución (elución a pH 12)
2. Las flechas en la figura a continuación indican las proteínas marcadas como objetivo, y las tres bandas de arriba a abajo después de hervir las perlas magnéticas directamente son BSA, la cadena pesada del anticuerpo y la cadena ligera del anticuerpo.
Cifra 2. Purificación de proteínas marcadas con bandera mediante perlas magnéticas anti-Flag
1: lisado de E. coli que contiene proteína marcada con Flag 10 μL; 2: sobrenadante después de la incubación de lisado de E. coli que contiene proteína marcada con Flag con perlas magnéticas 10 μL; 3: ebullición directa de proteína marcada con Flag con perlas magnéticas anti-Flag 10 μL; 4: ebullición directa de perlas magnéticas anti-Flag; 5: marcador
3.
Cifra 3. Purificación de proteínas marcadas con GFP mediante perlas magnéticas anti-GFP
1: lisado de E. coli que contiene proteína marcada con GFP 10 μL; 2: sobrenadante después de la incubación de lisado de E. coli que contiene proteína marcada con GFP con perlas magnéticas 10 μL; 3: ebullición directa de proteína marcada con GFP con perlas magnéticas anti-GFP 10 μL; 4: ebullición directa de perlas magnéticas anti-GFP; 5: marcador
Información del producto
| Nombre del producto | Número de producto | Especificación |
| 20584ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20586ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20587ES03/08/25 | 1 ml/5 ml/25 ml | |
| 20565ES03/08 | 1 ml/5 ml | |
| Perlas magnéticas anti-HA | 20566ES03/08 | 1 ml/5 ml |
| Perlas magnéticas anti-Myc | 20567ES03/08 | 1 ml/5 ml |
| 20564ES03/08 | 1 ml/5 ml |