Descripción
2×Hieff™ HotStart PCR Genotyping Master Mix (With Dye) es una solución premezclada para PCR lista para usar que contiene Hieff™ HotStart Taq DNA Polymerase, dNTP y un sistema de tampón optimizado. Simplifica significativamente los procedimientos experimentales al requerir solo la adición de cebadores y plantilla para la amplificación, lo que permite operaciones de alto rendimiento y mejora la reproducibilidad de los resultados experimentales. Hieff™ HotStart Taq DNA Polymerase es una Taq DNA Polymerase termoestable modificada con ligando cuya actividad se modula con los cambios de temperatura. Su actividad enzimática se bloquea completamente a temperatura ambiente y se libera al calentar a 95 °C. La activación de Hieff™ HotStart DNA Polymerase requiere solo de 2 a 3 minutos y es compatible con los programas de PCR existentes. Este producto evita la amplificación no específica durante las etapas de preparación de la muestra y de ciclado de temperatura, lo que lo hace eficaz para los experimentos de genotipado.
Características
- Mezcla conveniente y lista para usar
- Termoestable: la vida media es de más de 40 minutos a 95 °C.
- Genera productos de PCR con salientes 3'-dA
Aplicaciones
- Genotipado de ratones
- PCR de arranque en caliente
Presupuesto
| Fidelidad (contra Taq) | 1 × |
| Arranque en caliente | No |
| Sobresalir | 3'-A |
| Polimerasa | Taq ADN polimerasa |
| Formato de reacción | SuperMix o mezcla maestra |
| Velocidad de reacción | Estándar |
| Tipo de producto | Mezcla maestra de PCR (2×) |
Componentes
| Nombre | 10108ES03 | 10108ES08 | 10108ES50 | 10108ES60 |
| 2× Mezcla maestra para genotipado PCR Hieff™ HotStart (con colorante) | 1 ml | 5 x 1 ml | 50 x 1 ml | 100×1 ml |
Cifra
Citado de" La supresión de hnRNPA1 promueve la metástasis del CPCNP y la EMT regulando el empalme alternativo del exón 9 de LAS1L, Frente. Oncol. , 23 de junio de 2022. Oncología molecular y celular, Volumen 12 - 2022"
Envío y almacenamiento
Envío en paquetes de hielo. Conservar a -20 °C. Vida útil de 2 años.
Reacción de PCR (50 μL)
| Componentes | Volumen. | Concentración. |
| DdH2Oh | hasta 50 microlitros | - |
| ADN | / | - |
| Cebador F (10 μM) | 2 μL | 0,4 μM |
| Cebador R (10 μM) | 2 μL | 0.4 μM |
| 2×Hief™ Mezcla maestra para genotipado de PCR HotStart (con colorante) | 25 μL | 1× |
| Tipo de ADN | Aporte |
| ADN genómico | 50 ng-100 ng |
| Plásmidos | 100 pg-20 ng |
| ADNc | 1-5 μL |
Ciclo de PCR
| Temperatura. | Tiempo | Ciclos |
| 95°C | 5 minutos | 1 |
| 95°C | 30 segundos | 35 |
| 50-60 °C | 30 segundos | |
| 72°C | 30 segundos/kb | |
| 72°C | 10 minutos | 1 |
[1] Han P, Cao P, Yue J, et al. La supresión de hnRNPA1 promueve la metástasis de CPCNP y la EMT mediante la regulación del empalme alternativo del exón 9 de LAS1L. Front Oncol. 2022;12:837248. Publicado el 23 de junio de 2022. doi:10.3389/fonc.2022.837248(SI:5.738)
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