Descripción
La ribonucleasa A (RNasa A) es un polipéptido monocatenario con cuatro enlaces disulfuro y un peso molecular aproximado de 13,7 kDa. La ARNasa A es una endoribonucleasa que degrada específicamente el ARN monocatenario en los residuos C y U. Específicamente, la escisión reconoce el enlace fosfodiéster formado por la 5'-ribosa de un nucleótido y el grupo fosfato en la 3'-ribosa del nucleótido de pirimidina adyacente, de modo que los fosfatos 2', 3' - cíclicos se hidrolizan a los fosfatos 3'-nucleósidos correspondientes (p. ej., pG-pG-pC-pA-pG se escinde por la ARNasa A para generar pG-pG-pCp y A-PG). La ARNasa A es la más activa en la escisión de ARN monocatenario. La concentración de trabajo recomendada es de 1-100 μ G/mL, compatible con varios sistemas de reacción. Se puede utilizar una baja concentración de sal (0-100 mM NaCl) para cortar ARN monocatenario, ARN bicatenario y cadenas de ARN formadas por hibridación ARN-ADN. Sin embargo, a altas concentraciones de sal (≥ 0,3 M), la ARNasa A solo corta específicamente el ARN monocatenario.
La ARNasa A se utiliza con mayor frecuencia para eliminar el ARN durante la preparación de ADN plasmídico o genómico. La actividad de la ARNasa durante el proceso de preparación puede afectar fácilmente la reacción. El método tradicional de ebullición en baño maría puede utilizarse para inactivar la actividad de la ARNasa. Este producto no contiene ARNasa ni proteasa, y no requiere tratamiento térmico previo. Además, también se puede utilizar en experimentos de biología molecular, como el análisis de protección de la ARNasa y el análisis de secuencias de ARN.
Este producto se presenta en solución a una concentración de 100 mg/mL. La concentración de trabajo recomendada es de 1 a 100 μg/mL, según el tipo de aplicación.
Características
Ribonucleasa A (RNasa A), del páncreas bovino
Actividad ≥80 Kunitz U/mg
No residuo de DNasa
Aplicaciones
ARNasas
Análisis del epitranscriptoma
Extracción y purificación de ADN genómico
Presupuesto
| Componentes No. | Nombre | 10406ES03 |
| 10406 | ARNasa A (100 mg/ml) | 1 ml |
Envío y almacenamiento
El producto debe almacenarse a -25 °C ~ -15 °C durante 2 años.
El tampón de conservación fue 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) y 50 % (V/V) de glicerol.
Cifras
Muestra 1 no tiene ARNasa A, muestra 2-4 han añadido 1 μl de la 100 mg/ml ARNasa A. Luego agregue 500 ng de ARN. Tras incubar a temperatura ambiente durante 5 minutos, añadir 1 μl de tampón de carga de ARN 10X. A continuación, cargar todas las muestras en un gel de agarosa con medio al 0,8 % de poro para electroforesis a 160 V durante 10 minutos.
Documentos:
Ficha de datos de seguridad
Manuales
10406_Manual_Ver. HB240703_ES.pdf
Citas y referencias:
[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. La inhibición de LDHA para inducir la liberación de eEF2 mejora la trombocitopoyesis. Blood. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)
[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Regulación traslacional de la respuesta de las plantas a altas temperaturas mediante una guanililtransferasa de ARNtHis de doble función en arroz. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)
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