La ribonucleasa A (RNasa A) es un polipéptido monocatenario que contiene cuatro enlaces disulfuro con un peso molecular de aproximadamente 13,7 kDa. La ARNasa A es una endorribonucleasa que degrada específicamente el ARN monocatenario en los residuos C y U. Específicamente, la escisión reconoce el enlace fosfodiéster formado por la 5'-ribosa de un nucleótido y el grupo fosfato en la 3'-ribosa del nucleótido de pirimidina adyacente, de modo que los fosfatos 2', 3' - cíclicos se hidrolizan a los fosfatos 3'-nucleósidos correspondientes (por ejemplo, pG-pG-pC-pA-pG es escindido por la ARNasa A para generar pG-pG-pCp y A-PG). La ARNasa A es la más activa en la escisión de ARN monocatenario. La concentración de trabajo recomendada es de 1-100 μ G/mL, compatible con varios sistemas de reacción. Se puede utilizar una concentración baja de sal (0-100 mM de NaCl) para cortar ARN monocatenario, ARN bicatenario y cadenas de ARN formadas por hibridación ARN-ADN. Sin embargo, a altas concentraciones de sal (≥ 0,3 M), la ARNasa A solo corta específicamente el ARN monocatenario.

La ARNasa A se utiliza con mayor frecuencia para eliminar el ARN durante la preparación del ADN plasmídico o del ADN genómico. El hecho de que la ADNasa esté activa o no durante el proceso de preparación puede afectar fácilmente la reacción. El método tradicional de hervir en un baño de agua se puede utilizar para inactivar la actividad de la ADNasa. Este producto no contiene ADNasa ni proteasa, y no requiere tratamiento térmico antes de su uso. Además, este producto también se puede utilizar en experimentos de biología molecular, como el análisis de protección de la ARNasa y el análisis de secuencias de ARN.

Este producto se presenta en forma de solución a una concentración de 100 mg/mL. La concentración de trabajo recomendada es de 1-100 μg/mL, según el tipo de aplicación.

Características

Ribonucleasa A (RNasa A), del páncreas bovino

Actividad ≥80 Kunitz U/mg

No Residuos de DNasa

Aplicaciones

ARNasas

Análisis del epitranscriptoma

Extracción y purificación de ADN genómico

Presupuesto

Envío y almacenamiento

El producto debe almacenarse a -25 °C ~ -15 °C durante 2 años.

El tampón de conservación fue 50 mM Tris-HCl (pH 7,4) y 50% (V/V) de glicerol.

Cifras

Muestra 1 no tiene ARNasa A,Muestra 2-4 han añadido 1 μl de la 100 mg/ml ARNasa A. Entonces undd 500 ng de ARN. Después de incubar a temperatura ambiente durante 5 minutos, añadir 1 μl de tampón de carga de ARN 10X. A continuación, cargar todas las muestras en un gel de agarosa de poro medio al 0,8 % para realizar la electroforesis a 160 V durante 10 minutos.

Documentos:

Hoja de datos de seguridad

10406ES-MSDS-HB240223.PDF

Manuales

10406_Manual_Ver. HB240703_ES.pdf

Citas y referencias:

[1] Chen Q, Xin M, Wang L, et al. La inhibición de LDHA para inducir la liberación de eEF2 mejora la trombocitopoyesis. Blood. 2022;139(19):2958-2971. doi:10.1182/blood.2022015620(IF:23.629)

[2] Chen K, Guo T, Li XM, et al. Regulación traslacional de la respuesta de las plantas a altas temperaturas por una guanililtransferasa de ARNtHis de doble función en el arroz. Mol Plant. 2019;12(8):1123-1142. doi:10.1016/j.molp.2019.04.012(IF:10.812)