Descripción
La ADNasa I es una endonucleasa que puede digerir ADN monocatenario y bicatenario para producir desoxinucleótidos simples u oligodesoxinucleótidos monocatenarios o bicatenarios. Puede hidrolizar el enlace fosfodiéster para producir monodesoxinucleótidos y oligodesoxinucleótidos que contienen grupos 5'-fosfato y grupos 3'-OH. El producto de digestión promedio es el politetranucleótido más pequeño. La ADNasa I puede catalizar muchas formas de ADN, como ADN monocatenario, ADN bicatenario e incluso cromatina (su tasa de corte se ve afectada por las histonas). El rango de pH óptimo es 7-8. La actividad de la ADNasa I depende del Ca2+ y puede ser activado por iones metálicos divalentes, como Co2+, Mn2+, Zinc2+, etc. 5 mM Ca2+ puede proteger la enzima de ser hidrolizada. En presencia de Mg2+, la enzima puede reconocer y cortar cualquier sitio en cualquier cadena de ADN al azar; y en presencia de Mn2+, puede reconocer dos hebras de ADN al mismo tiempo y cortar en casi el mismo sitio para formar extremos romos o extremos pegajosos con 1-2 nucleótidos que sobresalen. La ADNasa I se usa ampliamente en la preparación de ARN libre de ADN; eliminar el ADN molde después de la transcripción in vitro; preparar ARN libre de ADN antes de las reacciones de RT-PCR y RT-qPCR; combinar con la ADN polimerasa I para realizar el etiquetado de ADN a través de la translocación de mellas; construcción de bibliotecas de fragmentación de ADN.
Este producto se produce de acuerdo con los requisitos del proceso GMP y se proporciona en forma líquida.
Característica
- Endonucleasa específica de ADN
- Degrada el ADN bicatenario y monocatenario.
- Los productos son oligos cortos con 5'-fosfato y 3'-OH
Solicitud
- Eliminación de ADN genómico contaminante de muestras de ARN
- Degradación de plantillas de ADN en reacciones de transcripción
Especificación
| Fuente | Recombinante E. coli con gen DNasa I |
| Temperatura óptima | 37℃ |
| Búfer de almacenamiento | 10 mM de Tris-HCl, pH 7,6, 2 mM de CaCl2, 50% (v/v) Glicerol |
| Definición de unidad | La cantidad de enzima necesaria para degradar completamente 1 μg de ADN plasmídico en 10 minutos a 37 °C. (El tampón de reacción es: 10 mM Tris-HCl pH 7,6, 2,5 mM MgCl2, 0,5 mM de CaCl22, 1 μg de ADN plasmídico) |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 10611ES76 (500 U) | 10611ES84 (2.000 U) | 10611ES92 (10.000 U) |
| 10611 | Desoxirribonucleasa I (DNasa I) grado GMP (2 U/μL) | 250 μL | 1 ml | 5 ml |
Envío y almacenamiento
Los productos de grado GMP de desoxirribonucleasa I (DNasa I) se envían con hielo seco y pueden almacenarse a una temperatura entre -15 °C y -25 °C durante un año.
Cifras
Figura 1. La ADNasa I de YEASEN podría eliminar eficazmente la plantilla de ADN durante la transcripción, en comparación con las marcas de la competencia.
[1] Lu Z, Liu H, Song N, et al. METTL14 agrava la lesión de los podocitos y la progresión de la glomerulopatía a través de la regulación negativa de Sirt1 dependiente de N<sup>6</sup>-metiladenosina. Cell Death Dis. 2021;12(10):881. Publicado el 27 de septiembre de 2021. doi:10.1038/s41419-021-04156-y(IF:8.469)
[2] Yu Y, Wang Y, Zhang W, et al. Sustituto biomimético de periostio y hueso compuesto de matriz derivada de preosteoblastos e hidrogel para la reparación de defectos óseos segmentarios grandes. Acta Biomater. 2020;113:317-327. doi:10.1016/j.actbio.2020.06.030(IF:7.242)
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