Descripción
Hifair™ La Supermezcla de Síntesis de ADNc de 1.ª Hebra III para qPCR (gDNA Digester Plus) es una premezcla reajustada desarrollada con la transcriptasa inversa Hifair™ III. En comparación con la transcriptasa inversa Hifair™ II, la transcriptasa inversa Hifair™ III presenta una estabilidad térmica significativamente mayor y puede soportar temperaturas de reacción de hasta 60 °C. Además, es adecuada para la transcripción inversa de moldes de ARN con estructuras secundarias complejas. Además, la enzima mejora la afinidad con los moldes, lo que resulta ideal para la transcripción inversa de un número reducido de moldes y genes con bajo número de copias.
La premezcla contiene 5×gDNA Digester Mix y 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus. La mezcla digestora de ADNg 5×gDNA elimina la contaminación residual del ADN genómico en las plantillas de ARN para garantizar resultados de seguimiento más fiables. 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus contiene todos los componentes necesarios para la transcriptasa inversa (tampón, dNTP, Hifair™ Ⅲ Se añaden la transcriptasa inversa, el inhibidor de la ARNasa, la mezcla de cebadores aleatorios/oligo (dT)18, la plantilla de ARN y H2O sin ARNasa a la transcripción inversa y, simultáneamente, se termina el digestor de ADNg para garantizar la integridad del ADNc.
El producto es adecuado para la detección por RT-QPCR en dos pasos, está especialmente optimizado para qPCR y utiliza una mezcla de cebadores aleatorios/oligo (dT)18 proporcionalmente optimizada. Esto permite iniciar la síntesis de ADNc desde todas las regiones del transcrito de ARN con la misma eficiencia de transcripción inversa. La autenticidad y repetibilidad de los resultados de qPCR están garantizadas al máximo. Este producto de transcripción inversa es compatible con los métodos SYBR Green y TaqMan, y con Hifair™. Mezcla maestra UNICON™ qPCR SYBR Green, Mezcla maestra Hifair™ qPCR SYBR Green o Hifair™ La mezcla maestra de sondas qPCR TaqMan se puede seleccionar según fines experimentales y se utiliza en combinación para realizar análisis de expresión genética de alto rendimiento.
Características
- Transcripción inversa de alto rendimiento
- Aumentar la temperatura de reacción: el ADNc de primera cadena se puede sintetizar en un rango de temperatura de 55 a 60 °C.
- Eliminación eficiente de residuos genómicos
- Amplio rango de detección lineal
Aplicaciones
- Construcción de una biblioteca de ADNc
- Síntesis de ARN antisentido
Presupuesto
| Tipo de producto final | ADNc (primera cadena) |
| Método de PCR | RT-PCR |
| Tipo de reactivo | Transcripción inversa |
| Tipo de muestra | ARN |
| Temperatura óptima de reacción | 55℃-60℃ |
| Transcriptasa inversa | M-MLV |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100 toneladas) |
| 11141-A | H libre de ARNasa2Oh | 1 ml | 2×1 mL |
| 11141-B | Mezcla digestora de 5 gDNA | 30 μL | 300 μL |
| 11141-C | 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix plus | 50 μL | 500 μL |
Envío y almacenamiento
El producto se envía con hielo seco y se puede almacenar a una temperatura entre -15 °C y -25 °C durante 18 meses.
Cifras
Figura 1. Excelente eficiencia de transcripción inversa, adecuada para genes con diferentes abundancias de expresión y diferentes contenidos de GC.
Figura 2.Rango de ensayo lineal ARN total 5 pg ~ 5 μg
Figura 3. Eliminación eficiente de residuos genómicos
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