Descripción
Hifair™ Ⅲ 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix for qPCR (gDNA Digester Plus) es una premezcla reajustable desarrollada en base a la transcriptasa inversa Hifair™Ⅲ. En comparación con la transcriptasa inversa Hifair™ Ⅱ, la transcriptasa inversa Hifair™ Ⅲ tiene una estabilidad térmica significativamente mayor y puede soportar temperaturas de reacción de hasta 60 ℃, y es adecuada para la transcripción inversa de plantillas de ARN con estructuras secundarias complejas. Al mismo tiempo, la enzima mejora la afinidad con las plantillas, lo que es ideal para la transcripción inversa de una pequeña cantidad de plantillas y genes con bajo número de copias.
La premezcla contiene 5×gDNA Digester Mix y 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus. 5×gDNA Digester Mix puede eliminar la contaminación residual del ADN genómico en las plantillas de ARN para garantizar resultados de seguimiento más confiables. 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix Plus contiene todos los componentes necesarios para la transcriptasa inversa (tampón, dNTP, Hifair™ Ⅲ Se añaden la transcriptasa inversa, el inhibidor de la ARNasa, los cebadores aleatorios/mezcla de cebadores oligo (dT)18), la plantilla de ARN y H2O sin ARNasa a la transcripción inversa, y el digestor de ADNg se termina simultáneamente para garantizar la integridad del ADNc.
El producto es adecuado para la detección RT-QPCR de dos pasos, especialmente optimizado para qPCR, mezcla de cebadores aleatorios/oligo (dT)18 optimizada proporcionalmente, lo que permite iniciar la síntesis de ADNc a partir de todas las regiones de transcripción de ARN con la misma eficiencia de transcripción inversa. La autenticidad y repetibilidad de los resultados de qPCR están garantizadas al máximo. El producto de transcripción inversa es compatible con el método SYBR Green y el método de sonda TaqMan qPCR, Hifair™ Mezcla maestra verde qPCR SYBR de UNICON™, mezcla maestra verde qPCR SYBR de Hifair™ o Hifair™ La mezcla maestra de sonda TaqMan para qPCR se puede seleccionar según fines experimentales y se utiliza en combinación para realizar análisis de expresión genética de alto rendimiento.
Características
- Transcripción inversa de alto rendimiento
- Aumentar la temperatura de reacción: el ADNc de primera cadena se puede sintetizar en un rango de temperatura de 55 a 60 °C.
- Eliminación eficiente de residuos genómicos
- Amplio rango de detección lineal
Aplicaciones
- Construcción de una biblioteca de ADNc
- Síntesis de ARN antisentido
Presupuesto
| Tipo de producto final | ADNc (primera cadena) |
| Método de PCR | PCR en tiempo real |
| Tipo de reactivo | Transcripción inversa |
| Tipo de muestra | ARN |
| Temperatura óptima de reacción | 55 ℃-60 ℃ |
| Transcriptasa inversa | M-MLV |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 11141ES10 (10T) | 11141ES60 (100 toneladas) |
| 11141-A | H libre de ARNasa2Oh | 1 ml | 2×1 ml |
| 11141-B | Mezcla de digestor de 5 gDNA | 30 μl | 300 μL |
| 11141-C | 4×Hifair™ Ⅲ SuperMix plus | 50 μl | 500 μL |
Envío y almacenamiento
El producto se envía con hielo seco y se puede almacenar a una temperatura de -15℃ a -25℃ durante 18 meses.
Cifras
Figura 1.Excelente eficiencia de transcripción inversa, adecuada para genes con diferentes abundancias de expresión con diferentes contenidos de GC
Figura 2. Rango de ensayo lineal ARN total 10 pg~5 μg
Figura 3. Eliminación eficiente de residuos genómicos
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