Descripción
Los microARN son una clase de ARN no codificante con una longitud de aproximadamente 22 nt, que desempeñan un papel importante en la regulación de la expresión génica en plantas y animales. Este kit utiliza el método de cola de poli(A) para realizar la transcripción inversa desde la primera cadena de miARN hasta el ADNc. El tampón de RT de miARN 2×Hifair™ del producto contiene todas las materias primas y los cebadores para la reacción de cola de poli(A) de miARN y la reacción de transcripción inversa. Una optimización cuidadosa garantiza que el proceso de modificación de poli(A) y el proceso de transcripción inversa se puedan realizar de manera simultánea y eficiente en el extremo 3' de miARN.
Se recomienda utilizar este producto junto con la mezcla maestra Hieff™ miRNA Universal qPCR SYBR de nuestra empresa (Cat. n.° 11171) para obtener resultados experimentales óptimos.
Características
- Tasa de detección de alta sensibilidad: se pueden detectar 10 pg de ARN
- Alta estabilidad del producto: permanece inalterado a 37 ℃ durante 7 días.
Solicitud
- El ADNc de primera cadena se sintetiza y se puede utilizar como plantilla parar RT-PCR y RT-qPCR en tiempo real.
Presupuesto
| Final producto tipo | ADNc (primera cadena) |
| Método de PCR | PCR en tiempo real |
| Formato de reacción | Fracción aislada |
| Tipo de muestra | miARN |
| Temperatura óptima de reacción | 37℃ |
| Contrarrestar transcriptasa | MMLV |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 11148ES50 (50 dientes) |
| 11148-A | Hifair™ Mezcla de enzimas de miRNA RT | 87,5 μl |
| 11148-B | 2×Hifair™ Tampón RT de miRNA | 250 μL |
| 11148-C | H libre de ARNasa2Oh | 10 ml |
| 11148-D | Cebador inverso universal (10 μmol/L) | 4 ml |
| 11148-E | Cebador directo U6 (10 μmol/L) | 500 μL |
| 11148-F | Imprimador inverso U6 (10 μmol/L) | 500 μL |
Almacenamiento
El producto debe almacenarse a -25 °C ~ -15 °C durante 1 año.
Cifras
Figura 1. Tasa de detección de alta sensibilidad: se pudieron detectar 10 pg de ARN.
El hsa-miR-let-7e-5p sintetizado (a) y el ARN total de células 293T (b) se utilizaron como plantillas y se diluyeron a los siguientes gradientes: 60 copias a 606 copias (6 gradientes) y 10 pg-100 ng (5 gradientes). Se detectó todo el ADNc del gradiente.
[1] Huang G, Chen J, Liu J, Zhang X, Duan H, Fang Q. El ciclo de retroalimentación MiR-935/HIF1α inhibe la proliferación y la invasividad del glioma. Onco Targets Ther. 2020;13:10817-10828. Publicado el 23 de octubre de 2020. doi:10.2147/OTT.S244409(IF:4.147)
[2] Li H, Pan R, Lu Q, et al. MicroRNA‑145‑5p inhibe las células de osteosarcoma proliferación al apuntar al factor de transcripción E2F 3. Int J Mol Med. 2020;45(5):1317-1326. doi:10.3892/ijmm.2020.4504(IF:4.101)
Pago y seguridad
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Consulta
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Preguntas frecuentes
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