Hifair^™ El kit avanzado de RT-qPCR en un solo paso es un kit para la cuantificación de la fluorescencia basado en el colorante SYBR Green I. Mediante cebadores específicos para cada gen, las reacciones de transcripción inversa y qPCR se completan en un solo tubo, eliminando la necesidad de abrir y pipetear repetidamente la tapa, mejorando considerablemente la eficiencia del ensayo y reduciendo el riesgo de contaminación. Para las muestras de ARN, el kit utiliza Hifair resistente al calor.^™ V Transcriptasa inversa para una síntesis eficiente de ADNc y UNICON^™ ADN polimerasa HotStart Taq para amplificación cuantitativa. Con el sistema de tampón optimizado, la sensibilidad del kit puede alcanzar hasta 0,1 pg para dianas con alta expresión y hasta 1 pg para dianas con expresión moderada. El kit también es adecuado para la amplificación y cuantificación de muestras de ADN. Permite la detección y cuantificación con alta sensibilidad de ácidos nucleicos de diversas muestras vegetales y animales, células y microorganismos.

Presupuesto

Componentes

Almacenamiento

Este producto debe almacenarse a -25 ~ -15 ℃. lejos de luz para 1 año.

Instrucciones

1. Reacción sistema configuración*****

* Los modelos de baja Rox y los modelos sin corrección de Rox se preparan directamente según el sistema de reacción descrito anteriormente. Al utilizar el modelo de alta Rox, añada Hieff™ SP High Rox a 2 tampones Hifair™ Advanced SG a una proporción de 1:250 v/v, mezcle bien y centrifugue. El tampón Hifair 2x^™ El búfer SG avanzado con Hieff™ SP High Rox no afecta el uso de los modelos de corrección Low Rox y No Rox.

** La concentración final del cebador fue de 0,2 μmol/L, que también podría ajustarse entre 0,1 y 1 μmol/L según corresponda.

*** El reactivo es extremadamente sensible, con ARN total en el rango de 1 pg-1 μg, y las pruebas de muestras humanas mostraron una entrada óptima de 1 pg-100 ng, controlando un valor Ct general en el rango de 15-30 según corresponda.

**** Se recomienda utilizar 20 μL o 50 μL para garantizar la validez y reproducibilidad de la amplificación del gen objetivo.

***** Prepare el reactivo en la mesa ultralimpia y utilice puntas y tubos de reacción sin residuos de nucleasa; se recomiendan puntas con cartuchos de filtro. Evite la contaminación cruzada y la contaminación por aerosoles.

2）Programa de reacción

*La temperatura de transcripción inversa puede seleccionarse entre 50 y 55 °C según las necesidades experimentales. Para muestras de ADN, el proceso de transcripción inversa puede omitirse.

** En casos especiales, la temperatura de recocido/extensión se puede ajustar según el valor Tm del cebador; se recomienda 60 °C.

3）Modelo aplicable

Modelos de instrumentos que no requieren calibración Rox:

Bio-Rad: CFX96, CFX384, iCycler iQ, iQ5, MyiQ, MiniOpticon, Opticon, Opticon 2, Chromo4;

Eppendorf: Mastercycler ep realplex, realplex 2 s;

Qiagen: Corbett Rotor-Gene Q, Rotor-Gene 3000, Rotor-Gene 6000;

Roche Ciencias Aplicadas: LightCycler 480, LightCycler2.0, Lightcycler 96;

Thermo Scientific: Ciclador PikoReal; Cepheid: SmartCycler; Illumina: Eco qPCR;

Modelos aplicables de bajo Rox:

ABI 7500, 7500 Fast, ViiA7, QuantStudio 3 y 5, QuantStudio 6, 7, 12k Flex;

Stratagene MX3000P, MX3005P, MX4000P;

Modelos aplicables de alto Rox*:

ABI 5700, 7000, 7300, 7700, 7900HT Rápido, StepOne, StepOne Plus.

* Para los modelos High Rox, tenga en cuenta que Hieff™ SP High Rox debe agregarse proporcionalmente a 2 x Hifair^™ Tampón SG avanzado antes de usar.

Notas

1. Este producto es solo para uso en investigación.
2. Por favor, trabaje con bata de laboratorio y guantes desechables, para su seguridad.

Documentos:

Ficha de datos de seguridad

11175ES-A-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-B-MSDS-HB230927.PDF

11175ES-do-MSDS-HB230927.PDF

Manuales