Hieff UNICON™ ColorGPS qPCR Master Mix (Low Rox) es una presolución para la amplificación cuantitativa por PCR en tiempo real 2×, que presenta una alta intensidad de fluorescencia, alta sensibilidad y especificidad, y un alto rendimiento de amplificación. El componente principal, Hieff UNICON™ Taq DNA Polymerase, se inicia en caliente mediante el método de anticuerpos, lo que puede inhibir eficazmente la amplificación no específica causada por la hibridación de cebadores durante la preparación de la muestra. Al mismo tiempo, la fórmula agrega factores para mejorar la eficiencia de amplificación de la reacción de PCR y facilitadores para igualar la amplificación de genes con diferentes contenidos de GC (30~70%), de modo que la PCR cuantitativa pueda obtener una buena relación lineal en una amplia gama de regiones cuantitativas. El producto utiliza la reacción de cambio de color mixto de diferentes colorantes para monitorear la operación de pipeteo, lo que reduce eficazmente la aparición de errores de pipeteo.

Características

Seguimiento del pipeteo: reduzca el riesgo de errores de adición o de omisión

Excelente amplificación: Buena linealidad en un amplio rango lineal

Alta precisión: puede distinguir con precisión plantillas con una diferencia de concentración de 2 veces

Buena repetibilidad: pequeña variabilidad entre pocillos en pocillos replicados, lo que resulta en una mejor repetibilidad

Estable y confiable: el sistema de reacción se puede almacenar a temperatura ambiente durante 24 horas y el producto permanece inalterado después de 20 ciclos de congelación y descongelación.

Aplicaciones

Análisis de las diferencias en la expresión genética

Análisis cuantitativo absoluto

Presupuesto

Componentes

Envío y almacenamiento

Este producto debe almacenarse entre -25 y -15 ℃ durante 1 año.

Cifras

Figura 1. Se pueden obtener resultados confiables dentro del rango dinámico.

Utilizando 2 µL de plantillas de plásmidos con un gradiente de 10^1-10^7, se amplificaron los genes relacionados. Hieff UNICON™ La mezcla maestra ColorGPS puede detectar eficazmente un rango de cantidad de plantilla de 7 órdenes de magnitud, logrando una buena linealidad dentro de un amplio rango lineal.

Cifra2. Puede distinguir con precisión diferencias de concentración de plantilla de 2 veces.

Utilizando 2 µL de plásmido diluido en un gradiente doble como plantilla, se amplificaron los genes relacionados. Hieff UNICON™ La mezcla maestra ColorGPS puede resolver con precisión las diferencias de concentración de plantillas.

Cifra3Se observa una pequeña variabilidad entre pocillos, lo que muestra una mejor repetibilidad.

Utilizando decenas de copias del plásmido como plantilla, se realizó la amplificación con diferentes reactivos cuantitativos fluorescentes según los procedimientos especificados en sus respectivos manuales de instrucciones. Los valores de desviación estándar indican que, en comparación con otros reactivos de transcripción inversa, el nuevo producto presenta menores diferencias entre pocillos replicados y mejor repetibilidad.

Cifra4. Más flexible, adecuado para procedimientos estándar o rápidos.

En el procedimiento estándar, el tiempo de desnaturalización y el tiempo de extensión se establecen en 10 segundos y 30 segundos, respectivamente, mientras que en el procedimiento rápido, el tiempo de desnaturalización y el tiempo de extensión se establecen en 3 segundos y 10 segundos, respectivamente, para detectar los valores Ct correspondientes a 10 genes diana. Los resultados muestran que los valores Ct obtenidos con el nuevo producto tanto en los procedimientos estándar como en los rápidos tienen una fuerte correlación, y el nuevo producto puede lograr buenos resultados utilizando el procedimiento rápido.

Cifra5Una vez preparado el sistema de reacción, puede permanecer estable a temperatura ambiente durante 24 horas.

Utilizando diferentes genes de ratón, células 293 humanas y Arabidopsis thaliana como objetivos, después de preparar el sistema de reacción, se colocó en la oscuridad a diferentes temperaturas durante 24 horas antes de la detección. En comparación con el procesamiento inmediato, la diferencia de detección para diferentes genes no supera los 0,5 Ct, lo que indica que también se pueden obtener resultados estables con operaciones de larga duración.

Documentos:

Manuales

11189_Manual_Versión EN20241218.pdf