Descripción
CRISPR/Cas9 es una técnica en la que la nucleasa Cas dirigida por ARN realiza modificaciones específicas del ADN en genes específicos, lo que constituye un mecanismo de defensa inmunitaria adquirido desarrollado por bacterias y arqueobacterias en respuesta a ataques de fagos y plásmidos extraños. En este sistema, la nucleasa Cas9 es guiada por un ARN guía simple (sgRNA) optimizado artificialmente para cortar el ADN bicatenario (dsDNA) en el sitio objetivo, lo que provoca roturas del ADN. El ADN se repara con la unión de extremos no homólogos o el mecanismo de reparación dirigida por homología in vivo, lo que da como resultado una mutación por cambio de marco, el reemplazo o la eliminación de genes.
El kit de síntesis de ARNm de precisión HifairTM utiliza una mezcla de ARN polimerasa T7 para transcribir de manera eficiente el ARNm de spCas9. El kit contiene una secuencia específica que es reconocida por la proteína Cas9 y actúa como un andamiaje. Una parte de la secuencia se puede superponer parcialmente con la secuencia específica de destino diseñada por el usuario. Las cadenas complementarias son rellenadas por la ADN polimerasa para generar plantillas de dsADN para la transcripción. Utilizando el reactivo suministrado y las secuencias de ADN específicas diseñadas por el usuario, el kit puede obtener entre 20 y 100 micrasg de sgRNA funcional en 4 horas en una reacción de un solo tubo.
Características
Alto rendimiento de síntesisEn una reacción de un solo tubo durante 4 horas, el rendimiento de sgRNA puede alcanzar entre 20 y 100 μg.
Amplia gama de aplicacionesSe pueden obtener altos rendimientos para diferentes tipos de sgRNA.
Alta pureza:El sgRNA sintetizado tiene una sola banda.
Alta actividad:El sgRNA sintetizado puede guiar eficazmente a Cas9 para escindir el ADN objetivo.
Aplicaciones
Edición genética CRISPR/Cas
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 11355ES05 | 11355ES25 | 11355ES50 | 11355ES60 |
| 11355-A | Mezcla de enzimas 10×sgRNA | 10 μl | 50 μl | 100 μl | 200 μL |
| 11355-B | Tampón de reacción 10×sgRNA | 10 μl | 50 μl | 100 μl | 200 μL |
| 11355-C | 2×Mezcla de enzimas Canace | 62,5 μl | 312.5 μL | 625 μL | 1,25 ml |
| 11355-D | Plantilla de andamio | 6,25 μL | 31,25 μL | 62,5 μl | 125 μl |
| 11355-E | NTP (25 mM cada uno) | 40 μl | 200 μL | 400 μl | 800 μL |
| 11355-F | Control de oligonucleótidos sgRNA (10 micrasMETRO) | 2 μL | 10 μl | 20 μL | 40 μl |
Envío y almacenamiento
Este producto debe almacenarse a una temperatura entre -25 y -15 °C.odo para 2 años.
Cifras
Cifra 1.La cantidad de síntesis de sgRNA en diferentes puntos temporales
Cifra 2.El rendimiento de la síntesis de sgRNA con diferentes secuencias
Cifra 3.La pureza del sgRNA sintetizado (determinada por Agilent 2100)
Cifra 4.Cuadro de eficiencia de escisión de sgRNA
Documentos:
Hoja de datos de seguridad
11355_Ficha de datos de seguridad_Versión EN20250120.pdf
Manuales
11355_Manual_Ver.ES20240710.pdf
Pago y seguridad
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Consulta
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