1) La concentración del adaptador PE en este kit es de 15 μM y la cantidad de adaptadores utilizados para la construcción de bibliotecas individuales se ajusta de acuerdo con la cantidad recomendada del kit de construcción de bibliotecas. El cebador de índice tiene una concentración de 10 μM.

2) El adaptador PE que se incluye con este kit es un adaptador corto de uso general que requiere amplificación por PCR para obtener una biblioteca completa. El cebador de índice proporciona etiquetas de secuencia de código de barras para distinguir las muestras durante la secuenciación de alto rendimiento.

3) Cada juego de este kit contiene 8 cebadores de índice i5 (RP 5xx) y 12 cebadores de índice i7 (RP 7xx), que se pueden combinar entre sí para construir 96 combinaciones diferentes de bibliotecas etiquetadas con índice de doble extremo. 2 juegos ofrecen un total de 16 de cebadores de índice i5 y 24 cebadores de índice i7. Puede utilizar el cebador de índice i5 (o cebador de índice i7) del catálogo n.° 12414 y el cebador de índice i7 (o cebador de índice i5) del catálogo n.° 12415 para crear hasta 384 combinaciones diferentes de bibliotecas etiquetadas con índices de doble extremo.

4) No caliente el adaptador, déjelo disolverse lentamente a temperatura ambiente; la temperatura del laboratorio se establece mejor entre 20 y 25 °C. Se necesitan adaptadores para evitar congelaciones y descongelaciones repetidas, y se recomienda almacenarlos en alícuotas y guardarlos a 4 °C durante un corto período de tiempo.

5) La estructura de la biblioteca de secuenciación construida utilizando el kit Hieff NGS® RNA 384 CDI Primer para Illumina® es la siguiente:



6) Para su seguridad y salud, utilice bata de laboratorio y guantes desechables.
7) ¡Este producto es sólo para fines de investigación científica!

Instrucciones
1. Uso de adaptadores: Diluir a una concentración adecuada de acuerdo con la dosis recomendada para diferentes cantidades de entrada en el manual de construcción de la biblioteca utilizada.
2. Uso del cebador de índice: Prepare el sistema de reacción de acuerdo con el manual de construcción de la biblioteca del sistema de amplificación de la biblioteca (como se muestra en la tabla a continuación), y el procedimiento de reacción se establece de acuerdo con el procedimiento del manual de construcción de la biblioteca.

Información de secuencia

Adaptador PE para Illumina:

5´-/5Fos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´

5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTTCCGATC*T-3´

Primer del índice i5 para Illumina:

5´-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACAC[Índice i5]ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATCT -3´

Primer del índice i7 para Illumina:

5´-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGAT[Índice i7]GTGACTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-3´

[Índice i5]8 pb de i5 Secuencia de índice,[Índice i7]8 pb de Secuencia de índice i7.

El nombre del índice correspondiente a cada cebador, la secuencia del índice contenida en el cebador y la información de la secuencia del índice correspondiente durante la secuenciación se muestran en la siguiente tabla: