Descripción
nortenadie-Tn5 es un recombinante Transposasa Tn5 fusionado con nanocuerpoy que puede unirse específicamente con anticuerpos primarios de dos especies diferentes (ratón y conejo).
PAGproducto IInformación
| Catalogar No. | 12595ES01/12595ES02/12595ES03 |
| presupuesto | 10 μL/80 μL/100 μL |
Producto Componentes
| Componente No. | Nombre del componente | 12595ES01 | 12595ES02 | 12595ES03 |
| 12595-A | Tn5 anti-ratón | 10 μl | 80 μl | 100 μl |
| 12595-B | Tn5 anti-conejo | 10 μl | 80 μl | 100 μl |
| 12595-C | Ensamblar el buffer | 10 μl | 80 μl | 100 μl |
Envío y Salmacenamiento
Almacenado en -85° ～ -65℃ para uno año.
Cifras
H3K4me1:
H3K4me3
H3K9me3
H3K27ac
H3K27me3
H3K27me3
Control: pA/G-Tn5 convencional, Cut&Tag Multi Cut&Tag: Nanocuerpo Tn5
Instrucción
Tome una biblioteca de secuenciación de alto rendimiento preparación A modo de ejemplo, asegúrese de leer atentamente las instrucciones antes de usarlo.
1. Adaptador preparación
1) Referencia oligo Nombre y secuencia de la plataforma Illumina:
Oligo A-1：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATAAGGCTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-2：5'-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACATATCCTTCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3'
Oligo A-3：5'-TCGTCGGCAGCGTCAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo B：5'-GTTCCGTGGCTCGGAGATGTGTATAAGAGACAG-3′
Oligo C: 5'-fos-CTGTCTCTTATACACATCT-3'
2) Disolver el Oligo A, Oligo Banda Oligo C a 200 μM.
3) Se formulan respectivamente los siguientes sistemas de reacción:
| componente | Reacción 1 |
| Oligo B (200 μM) | 10 μl |
| Oligo C (200 μM) | 10 μl |
| total | 20 μL |
| componente | Reacción 2 |
| Oligo A-1 o A-2 o A-3 (200 μM) | 10 μl |
| Oligo C (200 μM) | 10 μl |
| total | 20 μL |
4) Mezcle las reacciones 1 y 2 y centrifugue brevemente para que la solución vuelva al fondo del tubo. Colóquela en el instrumento de PCR. Configure el siguiente programa y ejecútelo: tapa caliente a 105 °C,y luego calentar a 94℃ durante 2 minutosUna vez transcurrido el tiempo, se detuvo el procedimiento de reacción sin abrir la tapa caliente..El tubo de PCR se enfrió naturalmente en el instrumento de PCR durante 2 h y luego se colocó a 4 ℃ durante 5 min.
5) Después de la reacción, mezcle los volúmenes iguales de Reacción 1 y Reacción 2. Nombrado anuncio Adaptador Mezclar y almacenar entre – 25 y – 15℃.
2. para la generación de transposones
1) Para configurar el siguiente sistema de reacción:
| componente | volumen (μL) |
| Anti-Tn5 de ratón o anti-Tn5 de conejo | 10 |
| Mezcla de adaptadores (50 μM) | 0.5 |
| Ensamblar el buffer | 0,5 |
2) Condiciones de reacción: utilizar la pipeta para soplar suavemente y mezclar bien. Realizar el reacción en 25℃ durante 1 h (con la tapa abierta). Los productos de reacción Se puede aplicar directamente a la biblioteca. preparación o almacenado desde -25 a -15℃.
Notas
1. La transposasa es sensible a la temperatura, por lo que se recomienda completar la adaptador Incorporar lo antes posible. El transposón generado se puede almacenar a una temperatura de entre -25 y -15 °C y tiene un período de validez de 1 año.
2. Este producto se utiliza únicamente con fines de investigación científica.
3. Para su seguridad y salud, utilice ropa de laboratorio y guantes desechables.
Pago y seguridad
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Consulta
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Preguntas frecuentes
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