Descripción
La polinucleótido quinasa T4 (T4 PNK) es una quinasa 5'-hidroxi que facilita la transferencia del fosfato gamma desde el ATP a los extremos 5'-hidroxi de las cadenas de oligonucleótidos o polinucleótidos, incluidos el ADN o ARN bicatenario y monocatenario, así como a los nucleótidos 3'-monofosfato. Esta transferencia es reversible. La T4 PNK también posee actividad 3'-fosfatasa, que desfosforila los extremos 3'-fosforilados de los oligonucleótidos, los nucleótidos desoxi 3'-monofosfato y los nucleótidos desoxi 3'-difosfato. En presencia de ADP, la T4 PNK puede actuar como una 5'-fosfatasa, promoviendo el intercambio de grupos 5'-fosfato en oligonucleótidos o polinucleótidos 5'-fosforilados con ATP. Esta enzima se utiliza ampliamente para la construcción de bibliotecas de ADN y para el etiquetado de extremos para generar sondas.
Aplicaciones
Fosforilación de los extremos 5' del ADN o ARN para su posterior ligación
Marcado terminal de ADN o ARN para que sirvan como sondas y con fines de secuenciación.
Fosforilación 5' de mononucleótidos con un extremo 3' fosforilado para preparar sustratos pNp para su unión a los extremos 3' del ADN o ARN
Etiquetado de los extremos 5' de oligonucleótidos que poseen un grupo fosfato 3'
Presupuesto
| Sfuente | Bacteriófago T4 |
| Peso molecular | 36,78 kDa |
| Concentración | 10 U/μL |
| Unidad dDefinición | Una unidad se define como la cantidad necesaria para catalizar la incorporación de 1 nmol de [γ-32P] ATP en una reacción en 30 minutos a 37 °C. |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 12902ES76 | 12902ES86 | 12902ES92 |
| 12902-A | Polinucleótido quinasa T4(10 U/μL) | 50 μl | 250 μL | 1 ml |
| 12902-B | Tampón PNK 10×T4 | 500 μL | 1 ml | 2×1 ml |
[Nota]: El tampón PNK 10×T4 no contiene ATP; los clientes deben agregarlo ellos mismos, con una concentración final de referencia de 1 mM, o utilizar el tampón de ligasa de ADN T4.
Envío y almacenamiento
Este producto debe almacenarse a una temperatura entre -25 y -15 °C.℃ por 1 año.
Documentos:
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Manuales
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