Descripción
Exonucleasa I, obtenida a partir de una molécula genéticamente modificada E. coli La cepa que expresa el gen Exo I exhibe actividad exonucleasa que digiere el ADN monocatenario desde el extremo 3' al 5'. Libera secuencialmente desoxirribonucleótidos 5'-monofosfatos, preservando la integridad de los dinucleótidos 5'-terminales. Esta enzima se utiliza predominantemente para la descomposición y eliminación de cebadores después de la amplificación por PCR. Permanece inactiva frente al ADN bicatenario y las cadenas de ADN con extremos hidroxilo 3' que están bloqueados por fosforilación o acetilación.
Características
Sin exonucleasa residual (bicatenaria), endonucleasa o ARNasa
Se inactiva simplemente tratándolo a 80°C durante 15 minutos.
Aplicaciones
Retire los cebadores monocatenarios del sistema de reacción de PCR antes de la secuenciación de ADN de Sanger o el análisis de SNP
Eliminar cebadores monocatenarios del sistema de reacción de PCR anidada
Eliminar el ADN monocatenario lineal de la muestra, dejando atrás el ADN bicatenario.
Presupuesto
| Sfuente | E. coli |
| Peso molecular | 55 KDa |
| Concentración | 20 U/μL |
| Unidad DDefinición | Una unidad se define como la cantidad de enzima necesaria para catalizar la liberación de 10 nmol de nucleótidos solubles en ácido a partir de ADN monocatenario [3H] a una concentración de 0,17 mg/ml en un volumen de 50 μl.yo Sistema de reacción que contiene tampón de reacción de exonucleasa I 1X a 37 °C en 30 minutos |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 14535ES80 | 14535ES90 |
| 14535-A | Exonucleasa I (20 U/μL) | 250 μl | |
| 14535-B | 10×Exonucleasa I Tampón de reacción | 1 ml | 1 ml |
Envío y almacenamiento
Este producto debe almacenarse a una temperatura entre -25 y -15 °C.℃ por 2 años.
Cifras
Figura 1. Capacidad de digestión de la exonucleasa I sobre ADN monocatenario
Nota: En un sistema de reacción de 20 μL, se añadió una concentración final de 15 pmol/μL de sustrato de ADN monocatenario. Se utilizaron diferentes cantidades (0,63, 1,25, 2,5, 5, 10, 20 U) de la exonucleasa I de Yeasen y del proveedor A y se incubaron a 37 °C durante 15 minutos, seguido de una inactivación térmica a 80 °C durante 15 minutos. Se empleó una electroforesis en gel de poliacrilamida para detectar la degradación del ADN monocatenario. Los resultados demostraron que la exonucleasa I de Yeasen tiene la misma capacidad para digerir el ADN monocatenario que el proveedor A.
Documentos:
Hoja de datos de seguridad
14535_Ficha de datos de seguridad_Versión EN20241210.pdf
Manuales
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Consulta
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