Descripción
La nucleasa AapCas12b (también conocida como C2c1) es una endonucleasa de ADN mediada por tracrRNA:crRNA (o sgRNA), derivada de la bacteria termófila Aliciclobacillus acidophilusEn presencia de una secuencia PAM (TTN) en el ADN bicatenario (dsDNA) objetivo, escinde específicamente el dsDNA objetivo, lo que provoca roturas de doble cadena y genera extremos pegajosos. AapCas12b puede escindir específicamente objetivos de ADN monocatenario independientemente de la secuencia PAM. Tanto los objetivos de ADN bicatenario como los monocatenarios pueden activar la actividad de escisión trans de AapCas12b. Cuando la enzima AapCas12b forma un complejo ternario con sgRNA y ADN objetivo, se activa para la actividad de escisión trans de ssDNA no específica, cortando cualquier secuencia arbitraria de ssDNA en el sistema. La temperatura de reacción de escisión óptima para AapCas12b es 60odo, lo que lo hace más resistente al calor que AacCas12b y más adecuado para su uso con LAMP para desarrollar sistemas de detección CRISPR-Cas/amplificación isotérmica.
Características
Amplio rango de temperatura de reacción:Exhibe actividad de escisión dentro del rango de temperatura de 37~65odo
Residuos de nucleasa bajos:No hay exonucleasa, nickasa o ARNasa residual
Actividad de escisión cis:Escisión altamente eficaz de ADN bicatenario in vitro
Actividad de transescisión:Alta actividad de escisión trans, adecuada para la detección de ácidos nucleicos.
Aplicaciones
Edición genética CRISPR/Cas
Diagnóstico y detección basados en el sistema CRISPR/Cas
Otras aplicaciones de detección combinadas con tecnologías de amplificación isotérmica de ácidos nucleicos (RPA y LAMP), etc.
Presupuesto
| Peso molecular | 130 kDa |
| Concentración | 10 µM |
| Pureza | >95% (Hoja de datos de seguridad (SDS)) |
| Definición de unidad | La cantidad de enzima Cas12b necesaria para escindir 1 pmol de sonda de ssDNA en 1 minuto a 60odo en un volumen total de reacción de 20 micrasL, que contiene 1×El tampón de reacción se define como 1 U |
Componentes
| Componentes No. | Nombre | 14808ES65 | 14808ES80 |
| 14808-A | Nucleasa AapCas12b (10 micrasMETRO) | 100 μl | |
| 14808-B | 10×Tampón de reacción | 1 ml | 1 ml |
Barcoping y almacenamiento
Este producto debe almacenarse a una temperatura entre -25 y -15 °C.odo por 2 años.
Cifras
Cifra 1. Verificación de la actividad de escisión cis de la nucleasa AapCas12b
Nota: En un 20 micrasSistema de reacción L que contiene dsDNA objetivo con una secuencia PAM, sgRNA, Cas12b y 1×tampón de reacción, la mezcla se incubó a 60odo durante 30 minutos y luego se inactiva a 85odo durante 5 minutos. Los resultados de la electroforesis en gel de agarosa mostraron que tres lotes de nucleasa AapCas12b fueron capaces de escindir eficazmente el dsADN, con una eficiencia de escisión comparable a la de la marca importada T*.
Cifra 2. Resultados de la prueba de actividad de transescisión de la nucleasa AapCas12b
Nota: En un 20 micrasSistema de reacción L que contiene dsDNA objetivo con una secuencia PAM, sgRNA, Cas12b, sonda fluorescente ssDNA de informe y 1×tampón de reacción, la mezcla se incubó a 60odo durante 1 hora y la señal de fluorescencia se recopiló cada 30 segundos. Los resultados mostraron que en presencia de ADN objetivo, sgRNA y Cas12b juntos, la sonda fluorescente de ssDNA de informe se pudo escindir, liberando así la señal de fluorescencia.
Documentos:
Hoja de datos de seguridad
14808_Ficha de datos de seguridad_Versión EN20241209.pdf
Manuales
Pago y seguridad
Su información de pago se procesa de forma segura. No almacenamos detalles de la tarjeta de crédito ni tenemos acceso a la información de su tarjeta de crédito.
Consulta
También te puede gustar
Preguntas frecuentes
El producto es solo para fines de investigación y no está destinado a uso terapéutico o diagnóstico en humanos o animales. Los productos y el contenido están protegidos por patentes, marcas comerciales y derechos de autor propiedad de Yeasen Biotechnology. Los símbolos de marca comercial indican el país de origen, no necesariamente el registro en todas las regiones.
Algunas aplicaciones pueden requerir derechos de propiedad intelectual adicionales de terceros.
Yeasen se dedica a la ciencia ética y cree que nuestra investigación debe abordar cuestiones críticas al tiempo que garantiza la seguridad y los estándares éticos.