E. coli ADN ligasa (60 U/μl) _ 14955ES

Sku: 14955ES82

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Descripción

E. coli La ADN ligasa puede catalizar la formación de enlaces fosfodiéster entre los extremos 5'-PO4 y 3'-OH de las cadenas de ADN adyacentes. No muestra actividad detectable para el ADN sustrato con extremos romos. El pH óptimo para esta reacción es de 7,5 a 8,0 (tampón Tris-HCl) y se requiere NAD como coenzima. A diferencia de la ADN ligasa T4, que puede unir extremos tanto pegajosos como romos, esta enzima solo cataliza la ligación entre moléculas de ADN con extremos cohesivos. Sin embargo, en presencia de PEG y altas concentraciones de cationes monovalentes, también puede ligar ADN con extremos romos. Además, este producto no puede catalizar las ligaduras entre ADN y ARN o entre moléculas de ARN. Esta enzima se puede utilizar para reacciones de ligación en la biblioteca de metilación NGS y también se puede emplear en el método Okayama-Berg para la clonación de ADNc.

Presupuesto

Concentración

60 uds./microlitros

Definición de unidad

En un 20 microlitros sistema de reacción de ligadura, la cantidad de enzima necesaria para ligar más del 90%f 6 μg de ADN λ-Fragmentos de Hind III a los 16°C por 30 minutos se define como una unidad de actividad (U)

Componentes

Componentes No.

Nombre

14955ES82

14955-A

E. coli Ligasa de ADN (60 U/μL)

20 μL

14955-B

10× E. coli Tampón de ligasa de ADN

100 μl

14955-C

10× ASC (0,05 %)

100 μl

Nota: La BSA debe protegerse de la congelación y descongelación repetidas. Para el almacenamiento a corto plazo, se puede mantener a 4 ℃.

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